论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-14页 |
| 文献综述 | 第14-46页 |
| 第一章 动物腺病毒载体研究进展 | 第14-37页 |
| 1.1 腺病毒简介 | 第14-15页 |
| 1.2 腺病毒载体 | 第15-16页 |
| 1.3 腺病毒免疫研究进展 | 第16-21页 |
| 1.3.1 腺病毒介导的免疫反应 | 第16-18页 |
| 1.3.2 影响机体抗腺病毒免疫的因素及改造策略 | 第18-21页 |
| 1.4 动物腺病毒载体研究进展 | 第21-26页 |
| 1.4.1 犬腺病毒载体 | 第21-22页 |
| 1.4.2 牛腺病毒载体 | 第22-23页 |
| 1.4.3 猪腺病毒载体 | 第23页 |
| 1.4.4 非人灵长类腺病毒载体 | 第23-24页 |
| 1.4.5 禽腺病毒载体 | 第24-25页 |
| 1.4.6 羊腺病毒载体 | 第25页 |
| 1.4.7 鼠腺病毒载体 | 第25-26页 |
| 1.5 PAdV-3 载体研究进展 | 第26-37页 |
| 1.5.1 PAdV-3 基因组的结构，转录及蛋白功能 | 第26-33页 |
| 1.5.2 PAdV-3 载体 | 第33页 |
| 1.5.3 PAdV-3 的受体和组织嗜性 | 第33-34页 |
| 1.5.4 PAdV-3 介导的免疫 | 第34页 |
| 1.5.5 PAdV-3 载体的应用 | 第34-37页 |
| 第二章 腺病毒衣壳pIX的结构与功能研究进展 | 第37-46页 |
| 2.1 pIX在病毒基因组中的位置 | 第37-38页 |
| 2.2 pIX是病毒的次要结构蛋白 | 第38-40页 |
| 2.3 pIX是一个转录激活因子 | 第40页 |
| 2.4 pIX与病毒嗜性和免疫 | 第40-41页 |
| 2.5 pIX与病毒进入 | 第41页 |
| 2.6 pIX与腺病毒载体 | 第41-42页 |
| 2.7 pIX作为配体展示平台 | 第42-45页 |
| 2.8 本研究的目的 | 第45-46页 |
| 试验研究 | 第46-92页 |
| 第三章 一种高效的PAdV-3 表达系统的构建 | 第46-58页 |
| 3.1 材料 | 第46-47页 |
| 3.1.1 细胞 | 第46页 |
| 3.1.2 菌株和质粒 | 第46-47页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第47页 |
| 3.2 方法 | 第47-51页 |
| 3.2.1 重组质粒的构建 | 第47-48页 |
| 3.2.2 重组猪腺病毒系统的评价 | 第48-49页 |
| 3.2.3 重组病毒的拯救 | 第49-50页 |
| 3.2.4 病毒滴度（TCID50）的测定 | 第50页 |
| 3.2.5 重组病毒增殖特性的测定 | 第50页 |
| 3.2.6 病毒转导试验 | 第50-51页 |
| 3.3 结果 | 第51-55页 |
| 3.3.1 重组猪腺病毒载体系统的构建 | 第51页 |
| 3.3.2 重组猪腺病毒载体系统的评价 | 第51-53页 |
| 3.3.3 重组猪腺病毒拯救及病毒的增殖特性 | 第53-54页 |
| 3.3.4 病毒转导试验 | 第54-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-57页 |
| 3.5 小结 | 第57-58页 |
| 第四章 pIX C端融合红色荧光蛋白Mcherry影响PAdV-3 的复制 | 第58-66页 |
| 4.1 材料 | 第58-59页 |
| 4.1.1 细胞 | 第58页 |
| 4.1.2 菌株和质粒 | 第58页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第58-59页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第59页 |
| 4.2 方法 | 第59-61页 |
| 4.2.1 pIX C端融合红色荧光蛋白mcherry重组病毒构建 | 第59-60页 |
| 4.2.2 重组病毒的拯救 | 第60页 |
| 4.2.3 病毒基因组的提取与PCR鉴定 | 第60页 |
| 4.2.4 Western blot鉴定 | 第60页 |
| 4.2.5 病毒滴度（Transducing unit, TU）的测定 | 第60页 |
| 4.2.6 重组病毒增殖曲线的测定 | 第60-61页 |
| 4.2.7 融合蛋白pIX-mcherry的细胞定位 | 第61页 |
| 4.3 结果 | 第61-64页 |
| 4.3.1 pIX C端融合入荧光蛋白Mcherry的猪腺病毒载体基因组质粒的构建 | 第61页 |
| 4.3.2 重组病毒的拯救 | 第61-62页 |
| 4.3.3 重组病毒的复制能力检测 | 第62-63页 |
| 4.3.4 pIX-Mcherry的细胞的表达与定位 | 第63-64页 |
| 4.4 讨论 | 第64页 |
| 4.5 小结 | 第64-66页 |
| 第五章 pIX缺失对PAdV-3 复制的影响 | 第66-75页 |
| 5.1 材料 | 第66页 |
| 5.1.1 细胞 | 第66页 |
| 5.1.2 菌株和质粒 | 第66页 |
| 5.1.3 主要试剂和仪器 | 第66页 |
| 5.2 方法 | 第66-67页 |
| 5.2.1 重组病毒的拯救 | 第66页 |
| 5.2.2 病毒基因组的提取与PCR鉴定 | 第66页 |
| 5.2.3 Western blot检测 | 第66-67页 |
| 5.2.4 病毒滴度（TU）测定 | 第67页 |
| 5.2.5 重组病毒增殖曲线的测定 | 第67页 |
| 5.2.6 病毒空斑试验 | 第67页 |
| 5.2.7 病毒的热稳定试验 | 第67页 |
| 5.3 结果 | 第67-72页 |
| 5.3.1 重组猪腺病毒质粒构建与鉴定 | 第67-68页 |
| 5.3.2 重组猪腺病毒的拯救 | 第68-70页 |
| 5.3.3 重组猪腺病毒的增殖特性 | 第70页 |
| 5.3.4 重组猪腺病毒的成斑能力 | 第70-71页 |
| 5.3.5 重组猪腺病毒的热稳定性 | 第71-72页 |
| 5.4 讨论 | 第72-74页 |
| 5.5 小结 | 第74-75页 |
| 第六章 PAdV-3 的pIX C端结构域的缺失影响病毒的复制 | 第75-84页 |
| 6.1 材料 | 第75页 |
| 6.1.1 细胞 | 第75页 |
| 6.1.2 菌株和质粒 | 第75页 |
| 6.1.3 主要试剂和仪器 | 第75页 |
| 6.2 方法 | 第75-77页 |
| 6.2.1 pIX C端缺失的重组猪腺病毒质粒的构建 | 第75-76页 |
| 6.2.2 重组病毒的拯救 | 第76页 |
| 6.2.3 病毒基因组的提取与PCR鉴定 | 第76页 |
| 6.2.4 Western blot检测 | 第76页 |
| 6.2.5 病毒滴度（TU）测定 | 第76-77页 |
| 6.2.6 重组病毒增殖曲线的测定 | 第77页 |
| 6.2.7 病毒空斑试验 | 第77页 |
| 6.2.8 病毒的热稳定试验 | 第77页 |
| 6.3 结果 | 第77-82页 |
| 6.3.1 pⅨ蛋白氨基酸序列比对及功能域划分 | 第77-78页 |
| 6.3.2 pIX C端缺失重组猪腺病毒质粒构建与鉴定 | 第78-79页 |
| 6.3.3 pIX C端缺失重组猪腺病毒的拯救 | 第79-80页 |
| 6.3.4 pIX C端缺失重组猪腺病毒的增殖特性 | 第80-81页 |
| 6.3.5 pIX C端缺失重组猪腺病毒的扩散能力 | 第81页 |
| 6.3.6 重组猪腺病毒的热稳定性 | 第81-82页 |
| 6.4 讨论 | 第82-83页 |
| 6.5 小结 | 第83-84页 |
| 第七章 pIX嵌合法实现PAdV-3 表面展示的研究 | 第84-92页 |
| 7.1 材料 | 第84页 |
| 7.1.1 细胞 | 第84页 |
| 7.1.2 菌株和质粒 | 第84页 |
| 7.1.3 主要试剂和仪器 | 第84页 |
| 7.1.4 分子生物学分析软件 | 第84页 |
| 7.2 方法 | 第84-86页 |
| 7.2.1 重组质粒的构建 | 第84-85页 |
| 7.2.2 重组病毒的拯救 | 第85页 |
| 7.2.3 病毒基因组的提取与PCR鉴定 | 第85页 |
| 7.2.4 Western blot检测 | 第85页 |
| 7.2.5 病毒滴度（TU）测定 | 第85页 |
| 7.2.6 重组病毒增殖曲线的测定 | 第85页 |
| 7.2.7 病毒的热稳定试验 | 第85页 |
| 7.2.8 pIX-mcherry在细胞中的定位 | 第85-86页 |
| 7.3 结果 | 第86-90页 |
| 7.3.1 pIX嵌合重组猪腺病毒质粒构建与鉴定 | 第86页 |
| 7.3.2 pIX嵌合猪腺病毒的拯救 | 第86-88页 |
| 7.3.3 pIX嵌合猪腺病毒的增殖特性 | 第88页 |
| 7.3.4 pIX嵌合猪腺病毒的热稳定性 | 第88-89页 |
| 7.3.5 pIX- mcherry融合蛋白的细胞定位 | 第89-90页 |
| 7.4 讨论 | 第90-91页 |
| 7.5 小结 | 第91-92页 |
| 结论 | 第92-93页 |
| 本研究创新点 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-118页 |
| 附录 | 第118-120页 |
| 致谢 | 第120-121页 |
| 作者简介 | 第121页 |
