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化学杂交剂单嘧磺酯钠诱导甘蓝型油菜雄性不育分子机制的初步研究

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化学杂交剂单嘧磺酯钠诱导甘蓝型油菜雄性不育分子机制的初步研究
论文目录
 
摘要第1-9页
ABSTRACT第9-16页
第一章 文献综述第16-38页
  1.1 油菜的杂种优势及其利用第16-19页
    1.1.1 植物杂种优势利用第16-17页
    1.1.2 油菜杂种优势利用途径第17-19页
  1.2 植物化学杂交剂研究概况第19-26页
    1.2.1 植物化学杂交剂诱导雄性不育研究的发展历史第19-20页
    1.2.2 油菜化学杂交剂的的发展及使用现状第20-23页
    1.2.3 杀雄剂单嘧磺酯钠的化学特性第23-26页
  1.3 油菜雄性不育的发生机理第26-31页
    1.3.1 高等植物花药发育过程第26-27页
    1.3.2 油菜细胞质雄性不育的发生机理第27-28页
    1.3.3 油菜细胞核雄性不育的发生机理第28页
    1.3.4 油菜化学杀雄剂诱导的雄性不育第28-31页
  1.4 植物花药转录组研究概况第31-33页
    1.4.1 正常花药转录组研究概况第31-32页
    1.4.2 不育花药与正常花药的比较转录组研究第32-33页
  1.5 病毒介导的植物基因沉默技术及其应用第33-37页
    1.5.1 VIGS技术的发现及应用第34-35页
    1.5.2 烟草脆裂病毒介导的VIGS第35-37页
  1.6 本研究的目的和意义第37-38页
第二章 CHA-MES对甘蓝型油菜花药发育的细胞学影响第38-51页
引言第38页
  2.1 材料、试剂及仪器第38-39页
    2.1.1 材料第38页
    2.1.2 试剂及仪器第38-39页
  2.2 实验方法第39页
    2.2.1 供试材料的种植第39页
    2.2.2 单嘧磺酯钠溶液的配制第39页
    2.2.3 化学杀雄处理及样品采集第39页
    2.2.4 透射电镜样品制备及观察第39页
  2.3 结果与分析第39-48页
    2.3.1 花粉母细胞时期对照组与处理组花药细胞超微结构比较第40-41页
    2.3.2 四分体时期对照组与处理组花药细胞超微结构比较第41-43页
    2.3.3 单核花粉粒时期对照组与处理组花药细胞超微结构比较第43-45页
    2.3.4 成熟花粉粒时期对照组与处理组花药细胞超微结构比较第45-47页
    2.3.5 单核花粉粒时期对照组与处理组花药外皮层和内皮层细胞超微结构比较第47-48页
  2.4 讨论与结论第48-51页
第三章 甘蓝型油菜花药正常发育过程中的转录组分析第51-73页
引言第51页
  3.1 材料、试剂及仪器第51-52页
    3.1.1 植物材料第51页
    3.1.2 试剂、仪器及软件工具第51-52页
  3.2 实验方法第52-54页
    3.2.1 供试植物材料的种植及样品采集第52页
    3.2.2 RNA提取、芯片杂交、数据采集以及归一化处理第52-53页
    3.2.3 基因表达的差异显著性分析及功能注释第53页
    3.2.4 差异表达基因的聚类分析第53页
    3.2.5 GO功能富集分析第53-54页
    3.2.6 基因表达调控网络的预测第54页
    3.2.7 实时定量PCR分析第54页
  3.3 结果与分析第54-69页
    3.3.1 甘蓝型油菜花药发育过程中各阶段转录组的检测第54-57页
    3.3.2 甘蓝型油菜花药发育过程中各阶段转录组的动态变化情况第57-59页
    3.3.3 甘蓝型油菜花药发育中差异表达基因的注释、聚类以及功能分析第59-63页
    3.3.4 甘蓝型油菜花药发育中脂肪酸及碳水化合物代谢相关基因的表达变化第63-67页
    3.3.5 甘蓝型油菜花药发育过程中的代谢调节网络分析第67-68页
    3.3.6 Real-time PCR验证第68-69页
  3.4 讨论与结论第69-73页
    3.4.1 植物花药发育早期和晚期之间普遍存在着转录组的调整变化第69-70页
    3.4.2 油菜花药转录组功能从早期的脂肪酸代谢到晚期的碳水化合物代谢转变第70-71页
    3.4.3 油菜花药发育过程中的基因表达调控网络第71-73页
第四章 CHA-MES诱导甘蓝型油菜不育花药的差异转录组分析第73-93页
引言第73页
  4.1 材料、试剂及仪器第73-74页
    4.1.1 材料第73-74页
    4.1.2 试剂及仪器第74页
  4.2 实验方法第74-76页
    4.2.1 供试植物材料的种植、MES处理及样品采集第74-75页
    4.2.2 RNA提取、芯片杂交、数据采集以及归一化处理第75页
    4.2.3 利用实时定量PCR方法验证基因芯片数据第75页
    4.2.4 差异基因的筛选及功能注释第75页
    4.2.5 差异基因的功能分类、富集分析以及代谢途径分析第75-76页
    4.2.6 碳水化合物含量测定第76页
  4.3 结果与分析第76-89页
    4.3.1 CHA-MES诱导甘蓝型油菜雄性不育的差异表达基因筛选第76-79页
    4.3.2 CHA-MES诱导甘蓝型油菜雄性不育差异表达转录本的注释及功能分析第79-83页
    4.3.3 CHA-MES诱导甘蓝型油菜雄性不育株差异表达基因的代谢途经分析第83页
    4.3.4 碳水化合物和脂肪酸代谢相关基因的表达量变化情况第83-88页
    4.3.5 CHA-MES诱导油菜雄性不育植株叶片及花药中碳水化合物含量的变化第88-89页
  4.4 讨论与结论第89-93页
    4.4.1 CHA-MES可能通过影响质体和线粒体的结构而影响花药的育性第89页
    4.4.2 CHA-MES影响花药发育过程中脂肪酸和碳水化合物代谢相关基因的表达第89-90页
    4.4.3 CHA-MES诱导植物雄性不育过程与ALS抑制剂除草过程的比较第90-92页
    4.4.4 推测CHA-MES诱导甘蓝型油菜发生雄性不育的工作模型第92-93页
第五章 CHA-MES诱导植物雄性不育靶标的验证及不育候选基因的筛选第93-105页
引言第93页
  5.1 材料、试剂及仪器第93-94页
    5.1.1 材料第93页
    5.1.2 试剂及仪器第93-94页
  5.2 实验方法第94-95页
    5.2.1 CHA-MES诱导拟南芥雄性不育的处理第94页
    5.2.2 花粉活力显微观察第94页
    5.2.3 TRV-VIGS载体构建及农杆菌处理第94-95页
    5.2.4 目标基因的半定量检测第95页
  5.3 结果与分析第95-103页
    5.3.1 ALS酶作为CHA-MES诱导植物雄性不育作用靶标的验证第95-96页
    5.3.2 TRV-VIGS载体构建及干扰体系建立第96-99页
    5.3.3 TRV介导的ALS基因沉默可诱导拟南芥植株发生雄性不育现象第99-101页
    5.3.4 利用TRV-VIGS技术筛选其他与植物育性相关的候选基因第101-103页
  5.4 讨论与结论第103-105页
第六章 全文总结与创新点第105-107页
  6.1 全文总结第105-106页
    6.1.1 CHA-MES诱导甘蓝型油菜雄性不育的超微结构观察第105页
    6.1.2 甘蓝型油菜花药发育过程中物质代谢相关基因的调控网络第105页
    6.1.3 CHA-MES诱导甘蓝型油菜雄性不育花药的差异转录组分析第105-106页
    6.1.4 CHA-MES诱导植物雄性不育的靶标验证以及不育候选基因的筛选第106页
  6.2 全文结论第106页
  6.3 创新点第106-107页
参考文献第107-118页
附录第118-126页
缩略词第126-127页
致谢第127-128页
作者简介第128-129页

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