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堆型艾美耳球虫新抗原基因鉴定与分子特性研究

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堆型艾美耳球虫新抗原基因鉴定与分子特性研究
论文目录
 
摘要第11-13页
ABSTRACT第13-18页
前言第18-19页
第一篇 文献综述第19-43页
第一章 鸡堆型艾美耳球虫主要抗原及DNA疫苗研究进展第19-31页
1 堆型艾美耳球虫(Eimeria.acervulina)的流行状况第19页
2 鸡球虫病的防治状况第19-20页
3 E.acervulina主要抗原基因第20-21页
  3.1 虫体表面抗原基因第20-21页
  3.2 阶段性虫体抗原第21页
4 E.acervulina DNA疫苗研究现状第21-22页
5 细胞因子在DNA疫苗中的作用第22-24页
  5.1 干扰素-γ(IFN-γ)第22页
  5.2 白细胞介素-2(IL-2)第22-23页
  5.3 β-转化生长因子(TGF-β)第23-24页
  5.4 IL-17第24页
6 E.acervulina DNA疫苗研究前景第24-26页
参考文献第26-31页
第二章 表达文库免疫的研究进展第31-43页
1 前言第31-33页
  1.1 核酸疫苗第31页
  1.2 核酸疫苗的新策略——表达文库免疫(ELI)第31-33页
2 表达文库免疫种类第33-34页
  2.1 rELI第33页
  2.2 dELI第33-34页
  2.3 cDELI第34页
3 表达文库免疫的关键因素第34-37页
  3.1 实验动物第34-35页
  3.2 高效的表达载体第35页
  3.3 文库的大小和容量第35-36页
  3.4 免疫途径、方法和剂量第36页
  3.5 增强剂和佐剂的作用第36-37页
  3.6 文库筛选第37页
4 表达文库免疫存在的问题第37-38页
5 ELI在疫苗研制中的应用前景第38-39页
参考文献第39-43页
第二篇 试验研究第43-143页
第一章 堆型艾美耳球虫子孢子cDNA表达文库的构建第43-57页
摘要第43页
1 材料与方法第43-51页
  1.1 试验动物和饲料第43-44页
  1.2 试剂第44页
  1.3 仪器设备第44页
  1.4 E.acerlina江苏株孢子化卵囊的准备第44页
  1.5 收集子孢子第44页
  1.6 子孢子总RNA的提取第44-45页
  1.7 RNA的检测第45页
  1.8 mRNA的分离第45-46页
  1.9 cDNA的合成与修饰第46-50页
  1.10 cDNA与载体pVAX1.0连接第50-51页
2 结果第51-52页
  2.1 总RNA的质量鉴定第51页
  2.2 大片段cDNA的选择第51页
  2.3 文库容量第51页
  2.4 克隆插入片段酶切鉴定第51-52页
3 讨论第52-54页
参考文献第54-56页
Abstract第56-57页
第二章 堆型艾美耳球虫cDNA表达文库免疫筛选第57-73页
摘要第57页
1 材料与方法第57-60页
  1.1 材料第57-59页
  1.2 方法第59-60页
2 结果第60-68页
  2.1 文库筛选第60-66页
  2.2 筛选的阳性克隆的特性第66-68页
3 讨论第68-70页
参考文献第70-71页
ABSTRACT第71-73页
第三章 cSZ-JN1基因的克隆、表达和特性分析第73-93页
摘要第73页
1 材料与方法第73-83页
  1.1 材料第73-76页
  1.2 方法第76-83页
2 结果第83-89页
  2.1 cSZ-JN1基因PCR扩增结果第83-84页
  2.2 cSZ-JN1基因pMD-18T重组质粒酶切鉴定第84页
  2.3 cSZ-JN1基因生物信息学分析第84-85页
  2.4 表达载体的构建和鉴定第85-86页
  2.5 pET28a(+)-cSZ-JN1重组表达质粒在E.coli中的表达第86-87页
  2.6 pET28a(+)-cSZ-JN1重组蛋白表达与纯化第87-88页
  2.7 Western blotting分析第88页
  2.8 cSZ-JN1蛋白在E.acervalina各阶段的表达分析第88-89页
3 讨论第89-90页
参考文献第90-91页
Abstract第91-93页
第四章 cSZ-JN1基因DNA疫苗的构建及体内表达检测第93-101页
摘要第93页
1 材料与方法第93-95页
  1.1 材料第93-94页
  1.2 方法第94-95页
2 结果第95-97页
  2.1 DNA疫苗重组质粒pVAX1.0-cSZ-JN1的鉴定第95-96页
  2.2 RT-PCR检测第96-97页
  2.3 Western Blot检测第97页
3 讨论第97-99页
参考文献第99-100页
Abstract第100-101页
第五章 cSZ-JN1基因重组蛋白和DNA疫苗的免疫保护性实验第101-115页
摘要第101-102页
1 材料与方法第102-105页
  1.1 材料第102页
  1.2 方法第102-105页
2 结果第105-110页
  2.1 增重变化第105-106页
  2.2 OPG值(克粪便球虫卵囊数)第106-107页
  2.3 十二指肠病变记分第107页
  2.4 抗球虫指数(ACI)第107-108页
  2.5 血清细胞因子水平检测第108-110页
  2.6 特异性IgG抗体检测第110页
3 讨论第110-112页
参考文献第112-113页
Abstract第113-115页
第六章 cSZ-JN2基因的克隆、表达和蛋白表达分析第115-127页
摘要第115页
1 材料与方法第115-117页
  1.1 材料第115页
  1.2 方法第115-117页
2 结果第117-124页
  2.1 cSZ-JN2基因PCR扩增结果第117-118页
  2.2 表达载体的构建和鉴定第118-119页
  2.3 cSZ-JN2基因生物信息学分析第119-120页
  2.4 pET28a(+)-cSZ-JN2重组表达质粒在E coli中的表达第120-121页
  2.5 pET28a(+)-cSZ-JN2重组蛋白表达与纯化第121-122页
  2.6 Western blotting分析第122-123页
  2.7 cSZ-JN2蛋白在E.acervalina各阶段的抗原表达分布第123-124页
3 讨论第124-125页
参考文献第125-126页
Abstract第126-127页
第七章 cSZ-JN2基因DNA疫苗的构建及体内表达检测第127-135页
摘要第127页
1 材料与方法第127-128页
  1.1 材料第127页
  1.2 方法第127-128页
2 结果第128-130页
  2.1 DNA疫苗重组质粒pVAX1.0-cSZ-JN2的鉴定第128-129页
  2.2 RT-PCR检测第129-130页
  2.3 Western Blot检测第130页
3 讨论第130-132页
参考文献第132-133页
Abstract第133-135页
第八章 cSZ-JN2基因重组蛋白和DNA疫苗的免疫保护性实验第135-143页
摘要第135页
1 材料与方法第135-136页
  1.1 材料第135页
  1.2 方法第135-136页
2 结果第136-140页
  2.1 增重变化第136页
  2.2 OPG值(克粪便球虫卵囊数)第136-137页
  2.3 十二指肠病变记分第137-138页
  2.4 抗球虫指数(ACI)第138页
  2.5 血清细胞因子水平检测第138-139页
  2.6 特异性IgG抗体检测第139-140页
3 讨论第140-141页
参考文献第141-142页
Abstract第142-143页
全文总结第143-145页
本论文的创新点第145-147页
致谢第147-149页
论文发表情况第149页

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