论文目录 | |
| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-16页 |
| 前言 | 第16-18页 |
| 符号及缩略语说明 | 第18-19页 |
| 上篇 文献综述 | 第19-59页 |
| 第一章 禽致病性大肠杆菌的研究进展 | 第19-39页 |
| 1 病原学 | 第19-20页 |
| 2 流行病学 | 第20-21页 |
| 3 致病机理 | 第21页 |
| 4 禽致病性大肠杆菌的毒力因子 | 第21-32页 |
| 4.1 黏附素(Adhesin) | 第22-24页 |
| 4.2 摄铁系统(Ferric uptake regulator,Fur) | 第24-25页 |
| 4.3 溶血素(Haemolysin) | 第25-26页 |
| 4.4 抗血清存活因子 | 第26-30页 |
| 4.5 毒素(Toxin) | 第30页 |
| 4.6 侵袭素 | 第30-31页 |
| 4.7 其它的毒力因子 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-39页 |
| 第二章 Red重组技术研究进展 | 第39-45页 |
| 1 Red重组系统的结构 | 第39页 |
| 2 Red系统的重组机制 | 第39-40页 |
| 3 Red系统的同源重组过程 | 第40-41页 |
| 4 Red重组系统的应用 | 第41-42页 |
| 4.1 染色体上基因的修饰与改造 | 第41页 |
| 4.2 质粒DNA的靶向修饰 | 第41-42页 |
| 5 Red重组技术的应用前景 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-45页 |
| 第三章 细胞凋亡的研究进展 | 第45-59页 |
| 1 细胞凋亡的一般概念 | 第45-48页 |
| 1.1 细胞凋亡的概念 | 第45-46页 |
| 1.2 细胞凋亡与坏死的鉴别及研究方法 | 第46-48页 |
| 2 细胞凋亡的生物学特征 | 第48-49页 |
| 2.1 形态学变化 | 第48页 |
| 2.2 生物化学改变 | 第48-49页 |
| 3 细胞凋亡的分子调控机理 | 第49-52页 |
| 4 细胞凋亡的检测方法 | 第52-55页 |
| 4.1 细胞凋亡的形态学检测 | 第52-53页 |
| 4.2 细胞凋亡的生化检测 | 第53-54页 |
| 4.3 细胞凋亡检测方法的选择 | 第54-55页 |
| 5 细胞凋亡与医学的关系 | 第55-56页 |
| 5.1 细胞凋亡与免疫学的关系 | 第55页 |
| 5.2 细胞凋亡与疾病的关系 | 第55页 |
| 5.3 细胞凋亡与临床医学的关系 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 下篇 研究内容 | 第59-165页 |
| 第四章 华东地区鸭源APEC的分离鉴定与系统进化群分析 | 第59-73页 |
| 摘要 | 第59-61页 |
| 1 材料与方法 | 第61-63页 |
| 1.1 病料及菌株来源 | 第61页 |
| 1.2 试剂和仪器 | 第61页 |
| 1.3 细菌的分离与纯培养 | 第61-62页 |
| 1.4 生化试验 | 第62页 |
| 1.5 大肠杆菌显色培养基快速鉴定 | 第62页 |
| 1.6 系统进化群分析 | 第62-63页 |
| 1.7 统计分析 | 第63页 |
| 2 结果 | 第63-66页 |
| 2.1 临床病例大肠杆菌分离 | 第63-65页 |
| 2.2 PCR扩增 | 第65页 |
| 2.3 分离菌株的系统进化群分析 | 第65-66页 |
| 3 小结与讨论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-71页 |
| ABSTRACT | 第71-73页 |
| 第五章 华东地区鸭源APEC非侵袭相关的16个毒力基因的检测 | 第73-93页 |
| 摘要 | 第73-74页 |
| 1 材料与方法 | 第74-78页 |
| 1.1 菌株来源 | 第74-75页 |
| 1.2 试剂和仪器 | 第75页 |
| 1.3 检测用毒力基因 | 第75-76页 |
| 1.4 DNA模板的制备 | 第76页 |
| 1.5 引物设计及PCR检测 | 第76-78页 |
| 1.6 PCR产物电泳鉴定 | 第78页 |
| 1.7 多重PCR方法的建立 | 第78页 |
| 1.8 统计分析 | 第78页 |
| 2 结果 | 第78-86页 |
| 2.1 PCR检测电泳结果 | 第78-80页 |
| 2.2 临床分离株非侵袭相关的毒力基因的PCR检测结果 | 第80-81页 |
| 2.3 临床分离株非侵袭相关的毒力基因的分布 | 第81-82页 |
| 2.4 临床分离株中非侵袭相关的毒力基因间的分布 | 第82-83页 |
| 2.5 临床分离株非侵袭相关的毒力基因的分布模式 | 第83-86页 |
| 3 讨论与小结 | 第86-89页 |
| 参考文献 | 第89-91页 |
| ABSTRACT | 第91-93页 |
| 第六章 华东地区鸭源APEC侵袭相关基因的检测 | 第93-109页 |
| 摘要 | 第93-94页 |
| 1 材料与方法 | 第94-96页 |
| 1.1 菌株来源 | 第94页 |
| 1.2 主要材料 | 第94页 |
| 1.3 检测用侵袭相关基因 | 第94页 |
| 1.4 DNA模板的制备 | 第94-95页 |
| 1.5 引物设计及PCR检测 | 第95-96页 |
| 1.6 PCR产物电泳鉴定 | 第96页 |
| 1.7 多重PCR方法的建立 | 第96页 |
| 1.8 统计分析 | 第96页 |
| 2 结果 | 第96-103页 |
| 2.1 PCR检测电泳结果 | 第96-98页 |
| 2.2 临床分离株侵袭相关基因的PCR检测结果 | 第98-99页 |
| 2.3 临床分离株侵袭相关基因的分布 | 第99-100页 |
| 2.4 临床分离株中两个侵袭相关基因间的关系 | 第100页 |
| 2.5 侵袭相关基因的分布模式 | 第100-103页 |
| 2.6 毒力相关基因和系统进化群的关系 | 第103页 |
| 3 讨论与小结 | 第103-106页 |
| 参考文献 | 第106-108页 |
| ABSTRACT | 第108-109页 |
| 第七章 核酸斑点杂交法检测鸭源APEC毒力相关基因 | 第109-121页 |
| 摘要 | 第109-110页 |
| 1 材料和方法 | 第110-112页 |
| 1.1 菌株来源 | 第110页 |
| 1.2 试剂和器材 | 第110页 |
| 1.3 引物设计及PCR | 第110页 |
| 1.4 地高辛标记探针的制备 | 第110-111页 |
| 1.5 地高辛标记探针的效率检测 | 第111页 |
| 1.6 地高辛标记探针的敏感性检测 | 第111页 |
| 1.7 探针特异性检测 | 第111-112页 |
| 1.8 样品检测 | 第112页 |
| 2 结果 | 第112-116页 |
| 2.1 PCR法对目的基因扩增 | 第112-113页 |
| 2.2 探针标记效率 | 第113页 |
| 2.3 探针敏感性 | 第113-114页 |
| 2.4 探针特异性 | 第114页 |
| 2.5 临床样品的检测 | 第114-116页 |
| 3 讨论与小结 | 第116-118页 |
| 参考文献 | 第118-120页 |
| ABSTRACT | 第120-121页 |
| 第八章 鸭源APEC分离株DE205B的主要特性研究 | 第121-135页 |
| 摘要 | 第121-122页 |
| 1 材料与方法 | 第122-125页 |
| 1.1 菌株、细胞和实验动物 | 第122-123页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第123页 |
| 1.3 溶血反应 | 第123页 |
| 1.4 SUMECs的体外培养 | 第123-124页 |
| 1.5 分离株的致病性试验 | 第124-125页 |
| 2 结果 | 第125-129页 |
| 2.1 溶血反应 | 第125页 |
| 2.2 细胞生长曲线 | 第125-126页 |
| 2.3 感染SUMECs的光镜观察 | 第126-127页 |
| 2.4 体外感染SUMECs DNA琼脂糖电泳分析 | 第127页 |
| 2.5 流式细胞仪分析 | 第127-128页 |
| 2.6 SUMECs的侵袭率 | 第128页 |
| 2.7 致病性试验 | 第128-129页 |
| 3 讨论与小结 | 第129-131页 |
| 参考文献 | 第131-133页 |
| ABSTRACT | 第133-135页 |
| 第九章 鸭源APEC分离株DE205B侵袭相关基因IBEA的序列分析 | 第135-149页 |
| 摘要 | 第135-136页 |
| 1 材料与方法 | 第136-139页 |
| 1.1 材料 | 第136页 |
| 1.2 方法 | 第136-139页 |
| 2 结果 | 第139-146页 |
| 2.1 基因的PCR结果 | 第139-140页 |
| 2.2 重组质粒的鉴定 | 第140-141页 |
| 2.3 基因片段全长序列测定 | 第141-142页 |
| 2.4 基因片段遗传起源分析 | 第142页 |
| 2.5 基因序列差异性分析 | 第142-146页 |
| 3 讨论与小结 | 第146-147页 |
| 参考文献 | 第147-148页 |
| ABSTRACT | 第148-149页 |
| 第十章 鸭源APEC分离株DE205B侵袭相关基因IBEA的缺失及主要生物学特性分析 | 第149-165页 |
| 摘要 | 第149-151页 |
| 1 材料与方法 | 第151-154页 |
| 1.1 材料 | 第151-152页 |
| 1.2 PCR引物设计和扩增条件 | 第152页 |
| 1.3 DE205B电击感受态细胞的制备及电击转化 | 第152-153页 |
| 1.4 DE205B/pKD46电击感受态细胞的制备及电击转化 | 第153页 |
| 1.5 缺失株的筛选 | 第153页 |
| 1.6 卡那霉素抗性基因的去除 | 第153页 |
| 1.7 缺失株的主要生物学特性分析 | 第153-154页 |
| 2 结果 | 第154-159页 |
| 2.1 线性打靶DNA的制备 | 第154-155页 |
| 2.2 大肠杆菌DE205B缺失突变株的构建 | 第155-156页 |
| 2.3 大肠杆菌DE205B缺失突变株抗性基因的去除与验证 | 第156页 |
| 2.4 缺失株的主要生物学特性分析 | 第156-159页 |
| 3 讨论与小结 | 第159-161页 |
| 参考文献 | 第161-163页 |
| ABSTRACT | 第163-165页 |
| 全文总结 | 第165-167页 |
| 致谢 | 第167-169页 |
| 攻读博士学位期间发表及待发表的文章 | 第169页 |
