论文目录 | |
| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-16页 |
| 缩略词 | 第16-17页 |
| 第一章 前言 | 第17-35页 |
| 1 盐胁迫对植物的危害 | 第17-23页 |
| 1.1 盐胁迫对生长的影响 | 第18页 |
| 1.2 盐胁迫对水分平衡的影响 | 第18-19页 |
| 1.3 盐胁迫对光合作用及色素含量的影响 | 第19-20页 |
| 1.4 盐胁迫对类脂的影响 | 第20页 |
| 1.5 盐胁迫对离子水平的影响 | 第20-21页 |
| 1.6 盐胁迫对抗氧化酶和抗氧化剂的影响 | 第21-22页 |
| 1.7 盐胁迫对蛋白质的影响 | 第22-23页 |
| 2 植物的耐盐机制 | 第23-31页 |
| 2.1 离子的调节与区隔化 | 第23-25页 |
| 2.2 渗透调节物质的合成 | 第25-26页 |
| 2.3 抗氧化物质的诱导 | 第26-27页 |
| 2.4 植物激素的调节 | 第27-28页 |
| 2.5 分子机制 | 第28-31页 |
| 3 盐应答基因及蛋白质 | 第31-33页 |
| 3.1 热激蛋白 | 第31页 |
| 3.2 脱水应答蛋白 | 第31页 |
| 3.3 RNA解旋酶 | 第31-32页 |
| 3.4 NADPH氧化还原酶 | 第32页 |
| 3.5 叶绿素A/B结合蛋白 | 第32-33页 |
| 3.6 蛋白激酶 | 第33页 |
| 4 研究目的和意义 | 第33-35页 |
| 第二章 观音竹盐胁迫的生长与生理生化响应 | 第35-49页 |
| 1 材料与方法 | 第36-38页 |
| 1.1 植物培养与盐处理 | 第36-37页 |
| 1.2 测定指标与方法 | 第37-38页 |
| 1.2.1 细胞质膜透性的测定 | 第37页 |
| 1.2.2 相对含水量(RWC)和水分饱和亏缺(WSD)测定 | 第37页 |
| 1.2.3 游离脯氨酸(Pro)测定 | 第37页 |
| 1.2.4 叶绿素含量测定 | 第37页 |
| 1.2.5 抗氧化酶活性的测定 | 第37-38页 |
| 1.2.6 MDA及可溶性蛋白质含量测定 | 第38页 |
| 1.2.7 生物量的测定 | 第38页 |
| 1.3 数据分析 | 第38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-45页 |
| 2.1 盐胁迫对植株生物量积累的影响 | 第38-39页 |
| 2.2 盐胁迫对叶片相对含水量和水分饱和亏缺的影响 | 第39页 |
| 2.3 盐胁迫对游离脯氨酸与可溶性蛋白质含量的影响 | 第39-40页 |
| 2.4 盐胁迫对叶绿素含量的影响 | 第40-41页 |
| 2.5 盐胁迫对叶片抗氧化酶活性的影响 | 第41-43页 |
| 2.6 盐胁迫对质膜透性与丙二醛含量的影响 | 第43页 |
| 2.7 盐胁迫下各生理指标的因子分析 | 第43-45页 |
| 3 讨论 | 第45-49页 |
| 3.1 盐胁迫下观音竹的生理响应 | 第45-47页 |
| 3.2 盐胁迫下观音竹的生长抑制 | 第47页 |
| 3.3 观音竹的耐盐性评价 | 第47-49页 |
| 第三章 观音竹幼叶均一化全长CDNA文库的构建 | 第49-59页 |
| 1 材料与方法 | 第50-51页 |
| 1.1 植物培养与盐处理 | 第50页 |
| 1.2 总RNA的提取 | 第50页 |
| 1.3 全长cDNA的合成 | 第50页 |
| 1.4 全长cDNA的均一化处理 | 第50-51页 |
| 1.5 均一化全长cDNA原始文库的构建 | 第51页 |
| 1.6 均一化全长cDNA文库质量的检测与测序 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-57页 |
| 2.1 总RNA的提取 | 第51-52页 |
| 2.2 双链CDNA的合成 | 第52页 |
| 2.3 均一化效果检测 | 第52页 |
| 2.4 库容及插入片段大小检测 | 第52-54页 |
| 2.5 ESTS测序结果分析 | 第54-57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 3.1 三种RNA提取方法的比较 | 第57页 |
| 3.2 均一化cDNA文库的优点及构建原理 | 第57-58页 |
| 3.3 本研究的技术创新之处 | 第58-59页 |
| 第四章 耐盐相关基因的差异表达分析 | 第59-69页 |
| 1 材料与方法 | 第60-63页 |
| 1.1 植物培养与盐处理 | 第60页 |
| 1.2 主要试剂与仪器 | 第60页 |
| 1.3 基因的特异引物设计 | 第60页 |
| 1.4 总RNA的提取 | 第60-62页 |
| 1.5 CDNA第一链合成及基因表达荧光定量分析 | 第62-63页 |
| 2 结果与分析 | 第63-65页 |
| 2.1 RNA浓度测定及质量鉴定 | 第63-65页 |
| 2.2 耐盐相关基因在盐处理和对照材料中的表达分析 | 第65页 |
| 3 讨论 | 第65-69页 |
| 第五章 观音竹BMPTI1基因功能的初步鉴定 | 第69-92页 |
| 1 材料与方法 | 第71-75页 |
| 1.1 材料 | 第71页 |
| 1.2 主要试剂 | 第71页 |
| 1.3 BMPTI1基因的序列分析 | 第71-72页 |
| 1.4 BMPTI1基因启动子的克隆与序列分析 | 第72页 |
| 1.4.1 DNA的提取 | 第72页 |
| 1.4.2 BmPti1基因5’端启动子序列的克隆 | 第72页 |
| 1.5 植物表达载体的构建与转化 | 第72-73页 |
| 1.5.1 引物设计与BmPti1基因的扩增 | 第72-73页 |
| 1.5.2 植物表达载体的构建与向农杆菌的转化 | 第73页 |
| 1.6 农杆菌介导的水稻遗传转化与植株的再生 | 第73-74页 |
| 1.6.1 水稻成熟胚愈伤组织的诱导 | 第73-74页 |
| 1.6.2 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第74页 |
| 1.6.3 抗性愈伤筛选与植株的再生 | 第74页 |
| 1.7 转基因水稻植株的分子检测 | 第74-75页 |
| 1.7.1 PCR检测 | 第74-75页 |
| 1.7.2 RT-PCR验证 | 第75页 |
| 1.8 转基因水稻植株的抗盐性鉴定 | 第75页 |
| 2 结果与分析 | 第75-88页 |
| 2.1 BMPTI1基因的生物信息学分析 | 第75-79页 |
| 2.1.1 BmPti1 基因核苷酸比对及其翻译的氨基酸特性分析 | 第75-76页 |
| 2.1.2 BmPti1蛋白质高级结构预测 | 第76-79页 |
| 2.1.3 BmPti1蛋白质功能预测 | 第79页 |
| 2.2 BMPTI1基因启动子克隆及序列分析 | 第79-84页 |
| 2.3 BMPTI1基因植物表达载体的构建 | 第84页 |
| 2.4 转基因植株的获得与分子检测 | 第84-87页 |
| 2.5 转基因水稻植株抗盐性鉴定 | 第87-88页 |
| 2.5.1 盐胁迫下转基因水稻的表型 | 第87页 |
| 2.5.2 盐胁迫下转基因水稻的叶绿素含量及SOD活性 | 第87-88页 |
| 3 讨论 | 第88-92页 |
| 3.1 BMPTI1可能编码一个有功能的蛋白激酶 | 第88-89页 |
| 3.2 BMPTI1的表达可能受多种逆境条件及激素的调控 | 第89-90页 |
| 3.3 转BMPTI1提高了转基因植株的耐盐性 | 第90-92页 |
| 第六章 小结与展望 | 第92-94页 |
| 1 小结 | 第92页 |
| 2 展望 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-114页 |
| 附录 | 第114-136页 |
| 攻读博士学位期间公开发表的学术论文 | 第136-137页 |
| 致谢 | 第137页 |
