论文目录 | |
符号说明 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
英文摘要 | 第11-14页 |
1 前言 | 第14-31页 |
1.1 玉米花序的结构和发育过程 | 第14-18页 |
1.1.1 玉米成熟花序的结构 | 第14-15页 |
1.1.2 玉米花序的发育过程 | 第15-18页 |
1.2 生长素合成与转运的研究进展 | 第18-28页 |
1.2.1 生长素合成途径 | 第18-22页 |
1.2.1.1 色氨酸依赖的IAA生物合成 | 第18-19页 |
1.2.1.2 YUCCA在色胺途径中可能参与催化限速步骤 | 第19-20页 |
1.2.1.3 吲哚3乙醛肟是能转变成IAA的吲哚硫配醣体的前体 | 第20-21页 |
1.2.1.4 通过分析trp突变体来揭示Trp-不依赖的IAA生物合成 | 第21-22页 |
1.2.2 YUC基因的功能和表达模式 | 第22-25页 |
1.2.2.1 YUC基因的功能研究 | 第22-23页 |
1.2.2.2 YUC基因的表达模式 | 第23-25页 |
1.2.3 生长素转运载体PIN基因家族的研究进展 | 第25-28页 |
1.2.3.1 生长素转运载体PIN基因的表达模式及功能 | 第25-27页 |
1.2.3.2 生长素转运与合成的关系 | 第27-28页 |
1.3 玉米的遗传转化 | 第28-30页 |
1.3.1 玉米遗传转化方法 | 第28-30页 |
1.3.1.1 基因枪法 | 第29页 |
1.3.1.2 农杆菌介导法 | 第29-30页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
2 材料与方法 | 第31-49页 |
2.1 实验材料 | 第31页 |
2.1.1 植物材料 | 第31页 |
2.1.2 菌株、质粒 | 第31页 |
2.1.3 酶及生化试剂 | 第31页 |
2.2 方法 | 第31-49页 |
2.2.1 RNA的提取和纯化 | 第31-32页 |
2.2.2 实时定量PCR分析 | 第32-33页 |
2.2.3 PCR扩增目的片段 | 第33页 |
2.2.4 目的片段与克隆载体的连接 | 第33-34页 |
2.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
2.2.6 大肠杆菌感受态细胞的转化(热击法) | 第35页 |
2.2.7 碱法小量质粒DNA的提取 | 第35-36页 |
2.2.8 目的片段和质粒DNA的酶切与回收 | 第36页 |
2.2.9 DNA测序 | 第36页 |
2.2.10 ZmYUC4基因过表达载体的构建 | 第36页 |
2.2.11 Artificial microRNA沉默ZmYUC基因表达载体的构建 | 第36-40页 |
2.2.12 LBA4404农杆菌感受态制备 | 第40页 |
2.2.13 农杆菌感受态细胞的转化(电击法) | 第40-41页 |
2.2.14 农杆菌介导的玉米幼胚转化及抗性植株的获得 | 第41页 |
2.2.15 原位杂交分析 | 第41-48页 |
2.2.15.1 材料的固定 | 第41-42页 |
2.2.15.2 材料的包埋 | 第42页 |
2.2.15.3 切片 | 第42页 |
2.2.15.4 探针标记 | 第42-46页 |
2.2.15.5 脱蜡、消化、乙酰化和杂交 | 第46-47页 |
2.2.15.6 洗片 | 第47-48页 |
2.2.15.7 检测 | 第48页 |
2.2.16 共聚焦显微镜观察和图像处理 | 第48-49页 |
3 结果与分析 | 第49-69页 |
3.1 生长素响应信号在玉米雌花序发育过程中的分布模式 | 第49-50页 |
3.2 生长素合成相关基因YUC家族在玉米雌花序发育过程中的表达分析 | 第50-62页 |
3.2.1 玉米YUC基因家族的鉴定与分析 | 第50-52页 |
3.2.2 玉米、水稻和拟南芥YUC基因家族的进化树分析 | 第52-54页 |
3.2.3 玉米YUC基因家族在雌花序发育过程中的表达模式分析 | 第54-57页 |
3.2.3.1 玉米YUC基因家族的实时定量PCR分析 | 第54-56页 |
3.2.3.2 玉米YUC基因的原位杂交分析 | 第56-57页 |
3.2.4 玉米YUC基因的克隆、转化 | 第57-62页 |
3.2.4.1 玉米YUC基因的artificial microRNA载体的构建 | 第58页 |
3.2.4.2 玉米YUC基因过表达载体的构建 | 第58-60页 |
3.2.4.3 农杆菌介导的玉米幼胚转化及再生植株的获得 | 第60-61页 |
3.2.4.4 转基因植株的分子检测 | 第61-62页 |
3.3 玉米PIN基因家族在雌花序发育过程中的表达分析 | 第62-69页 |
3.3.1 玉米PIN基因家族的实时定量PCR分析 | 第62-64页 |
3.3.2 ZmPIN1a基因在玉米雌花序发育过程中的表达模式 | 第64-65页 |
3.3.3 生长素响应信号及生长素转运信号在不同节位的腋芽中的分布模式 | 第65-69页 |
4 讨论 | 第69-72页 |
4.1 YUC基因参与的IAA生物合成在玉米雌花序发育过程中的作用 | 第69页 |
4.2 YUC基因的过表达与敲除对玉米雌花序发育的影响 | 第69-70页 |
4.3 生长素转运在玉米雌花序发育过程中的作用 | 第70-71页 |
4.4 生长素合成及转运在玉米不同节位的腋芽发育过程中存在差异 | 第71-72页 |
5 结论 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
附录 | 第86-88页 |