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栽培及野生小麦中条锈病抗性基因的定位和利用

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栽培及野生小麦中条锈病抗性基因的定位和利用
论文目录
 
中文摘要第11-12页
Abstract第12-15页
第一章 引言第15-27页
1 小麦的地位和起源第15页
2 小麦条锈病的危害及防治第15-18页
  2.1 小麦条锈病的危害第15-16页
  2.2 小麦条锈病的防治第16-18页
    2.2.1 使用化学杀菌剂防治小麦条锈病第16-17页
    2.2.2 利用不同抗病品种的合理布局防治小麦条锈病第17页
    2.2.3 培育抗病品种防治小麦条锈病第17-18页
3 中国小麦条锈菌生理小种及其命名第18页
4 小麦抗条锈病基因的类型第18-19页
5 小麦抗条锈病基因的定位及克隆第19-21页
  5.1 国际上已经定名的条锈病抗性基因第19页
  5.2 已经克隆的小麦条锈病抗性基因第19-21页
6 小麦近缘属植物是抗条锈病基因的重要资源第21-23页
7 用于基因定位的DNA分子标记第23-25页
  7.1 限制性片段长度多态性标记(Restriction fragment length polymorphism, RFLP)第24页
  7.2 简单重复序列(Simple sequence repeats, SSR)第24页
  7.3 扩增片段长度多态性(Amplified fragment length polymorphism, AFLP)第24-25页
  7.4 单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism, SNP)第25页
8 小麦抗条锈病分子辅助育种的现状及展望第25-27页
  8.1 小麦抗条锈病育种第25-26页
  8.2 分子标记辅助育种在抗病育种中的应用及前景第26-27页
第二章 Yr10CG、Yr18和Yr36在我国小麦中的分布第27-50页
1 目的意义第27页
2 材料与方法第27-36页
  2.1 实验材料第27-29页
    2.1.1 植物材料第27-28页
    2.1.2 小麦条锈菌第28-29页
    2.1.3 菌株及质粒第29页
  2.2 实验方法第29-36页
    2.2.1 常规实验方法第29-34页
      2.2.1.1 DNA提取相关溶液的配制第29页
      2.2.1.2 基因组DNA的 提取第29-30页
      2.2.1.3 RNA提取试剂的配制第30页
      2.2.1.4 RNA提取第30-31页
      2.2.1.5 cDNA第一链的合成第31-32页
      2.2.1.6 普通PCR扩增第32页
      2.2.1.7 高保真PCR扩增第32页
      2.2.1.8 琼脂糖凝胶电泳第32-33页
      2.2.1.9 DNA片段的胶回收第33页
      2.2.1.10 连接反应(以pGEM-T easy vector为例)第33-34页
      2.2.1.11 大肠杆菌感受态细胞的转化及阳性克隆挑取第34页
      2.2.1.12 聚丙烯酰胺凝胶的制备及电泳第34页
    2.2.2 小麦条锈菌的接菌及表型鉴定方法第34-35页
    2.2.3 温室及田间(部分材料)抖粉接菌法第35-36页
3 结果第36-45页
  3.1 中国小麦中 13%的种质携带Yr10CG基因第36-39页
  3.2 中国 11%的小麦种质携带Yr18RH抗性基因第39-44页
  3.3 中国小麦不含有Yr36基因第44-45页
4 讨论第45-50页
  4.1 抗病位点特异标记的重新开发第45-46页
  4.2 Yr10CG基因的功能尚需进一步验证第46-47页
  4.3 Yr18基因作为一个持久抗源在中国小麦育种中广泛应用第47-48页
  4.4 Yr36基因为中国小麦提供新型抗源第48-49页
  4.5 Yr10、Yr18和Yr36的聚合可以提高受体材料的抗病性第49-50页
第三章 Yr10基因的精细定位第50-73页
1 目的意义第50页
2 材料与方法第50-59页
  2.1 植物材料第50-51页
  2.2 试验方法第51-59页
    2.2.1 Yr10CG基因表达载体的构建第51页
      2.2.1.1 Yr10CG基因的克隆第51页
      2.2.1.2 表达载体的构建第51页
    2.2.2 小麦的基因枪转化方法第51-55页
      2.2.2.1 所需要的培养基及试剂配制第51-53页
      2.2.2.2 Bobwhite幼胚愈伤的准备第53-54页
      2.2.2.3 共转化的表达载体的准备第54页
      2.2.2.4 金粉与转化载体的处理第54页
      2.2.2.5 基因枪轰击的步骤第54-55页
      2.2.2.6 转基因幼苗的培养及移栽第55页
      2.2.2.7 转基因苗的Basta抗性检测第55页
      2.2.2.8 转基因苗的PCR检测第55页
    2.2.3 含Yr10CG基因小麦品种的关联分析第55-56页
    2.2.4 基因作图群体的创建第56-57页
    2.2.5 基于 92K iSelect SNP芯片的BSA分析和基因定位第57-58页
    2.2.6 BSA抗性位点连锁标记的开发第58-59页
3.结果与分析第59-71页
  3.1 Moro的条锈病抗性鉴定第59页
  3.2 Yr10CG基因的功能验证第59-65页
    3.2.1 含有Yr10CG的60份小麦品种的抗病性鉴定及关联分析第61-65页
    3.2.2 Yr10CG基因的克隆及表达载体的构建第65页
    3.2.3 Yr10CG转基因株系的条锈病抗性鉴定第65页
  3.3 Yr10基因的遗传分析及定位第65-71页
    3.3.1 Moro及含Yr10单基因分离群体的抗病性遗传分析第65-67页
    3.3.2 利用SSR及STS标记定位Yr10基因第67-68页
    3.3.3 Yr10CG标记与Yr10位点不连锁第68页
    3.3.4 基于 92K iSelect SNP芯片数据的BSA分析第68-69页
    3.3.5 Yr10基因区段的共线性分析及标记开发与定位第69-71页
4 讨论第71-73页
  4.1 小种专一抗性基因的特点及合理利用第71页
  4.2 单基因分离群体的获得及应用第71页
  4.3 人工合成小麦在基因定位中的应用第71-73页
第四章 YrD479基因的定位第73-80页
1 目的及意义第73页
2 材料与方法第73-74页
  2.1 试验材料第73页
  2.2 试验方法第73-74页
    2.2.1 SSR及STS标记的筛选第73页
    2.2.2 利用BSA分析初步定位DIC479来源的抗病基因第73-74页
    2.2.3 利用小麦与水稻的共线性开发标记第74页
3.结果与分析第74-78页
  3.1 DIC479的条锈病抗性鉴定第74-75页
  3.2 DIC479的抗病性的遗传分析第75-76页
  3.3 多态性标记的筛选及高温成株抗病性基因的定位第76-77页
  3.4 比较基因组学分析及共线性标记的开发第77-78页
4 讨论第78-80页
结论第80-82页
参考文献第82-93页
致谢第93-95页
攻读博士学位期间发表论文情况第95-96页
附件第96页

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