论文目录 | |
中文摘要 | 第11-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
第一章 引言 | 第15-27页 |
1 小麦的地位和起源 | 第15页 |
2 小麦条锈病的危害及防治 | 第15-18页 |
2.1 小麦条锈病的危害 | 第15-16页 |
2.2 小麦条锈病的防治 | 第16-18页 |
2.2.1 使用化学杀菌剂防治小麦条锈病 | 第16-17页 |
2.2.2 利用不同抗病品种的合理布局防治小麦条锈病 | 第17页 |
2.2.3 培育抗病品种防治小麦条锈病 | 第17-18页 |
3 中国小麦条锈菌生理小种及其命名 | 第18页 |
4 小麦抗条锈病基因的类型 | 第18-19页 |
5 小麦抗条锈病基因的定位及克隆 | 第19-21页 |
5.1 国际上已经定名的条锈病抗性基因 | 第19页 |
5.2 已经克隆的小麦条锈病抗性基因 | 第19-21页 |
6 小麦近缘属植物是抗条锈病基因的重要资源 | 第21-23页 |
7 用于基因定位的DNA分子标记 | 第23-25页 |
7.1 限制性片段长度多态性标记(Restriction fragment length polymorphism, RFLP) | 第24页 |
7.2 简单重复序列(Simple sequence repeats, SSR) | 第24页 |
7.3 扩增片段长度多态性(Amplified fragment length polymorphism, AFLP) | 第24-25页 |
7.4 单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism, SNP) | 第25页 |
8 小麦抗条锈病分子辅助育种的现状及展望 | 第25-27页 |
8.1 小麦抗条锈病育种 | 第25-26页 |
8.2 分子标记辅助育种在抗病育种中的应用及前景 | 第26-27页 |
第二章 Yr10CG、Yr18和Yr36在我国小麦中的分布 | 第27-50页 |
1 目的意义 | 第27页 |
2 材料与方法 | 第27-36页 |
2.1 实验材料 | 第27-29页 |
2.1.1 植物材料 | 第27-28页 |
2.1.2 小麦条锈菌 | 第28-29页 |
2.1.3 菌株及质粒 | 第29页 |
2.2 实验方法 | 第29-36页 |
2.2.1 常规实验方法 | 第29-34页 |
2.2.1.1 DNA提取相关溶液的配制 | 第29页 |
2.2.1.2 基因组DNA的 提取 | 第29-30页 |
2.2.1.3 RNA提取试剂的配制 | 第30页 |
2.2.1.4 RNA提取 | 第30-31页 |
2.2.1.5 cDNA第一链的合成 | 第31-32页 |
2.2.1.6 普通PCR扩增 | 第32页 |
2.2.1.7 高保真PCR扩增 | 第32页 |
2.2.1.8 琼脂糖凝胶电泳 | 第32-33页 |
2.2.1.9 DNA片段的胶回收 | 第33页 |
2.2.1.10 连接反应(以pGEM-T easy vector为例) | 第33-34页 |
2.2.1.11 大肠杆菌感受态细胞的转化及阳性克隆挑取 | 第34页 |
2.2.1.12 聚丙烯酰胺凝胶的制备及电泳 | 第34页 |
2.2.2 小麦条锈菌的接菌及表型鉴定方法 | 第34-35页 |
2.2.3 温室及田间(部分材料)抖粉接菌法 | 第35-36页 |
3 结果 | 第36-45页 |
3.1 中国小麦中 13%的种质携带Yr10CG基因 | 第36-39页 |
3.2 中国 11%的小麦种质携带Yr18RH抗性基因 | 第39-44页 |
3.3 中国小麦不含有Yr36基因 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-50页 |
4.1 抗病位点特异标记的重新开发 | 第45-46页 |
4.2 Yr10CG基因的功能尚需进一步验证 | 第46-47页 |
4.3 Yr18基因作为一个持久抗源在中国小麦育种中广泛应用 | 第47-48页 |
4.4 Yr36基因为中国小麦提供新型抗源 | 第48-49页 |
4.5 Yr10、Yr18和Yr36的聚合可以提高受体材料的抗病性 | 第49-50页 |
第三章 Yr10基因的精细定位 | 第50-73页 |
1 目的意义 | 第50页 |
2 材料与方法 | 第50-59页 |
2.1 植物材料 | 第50-51页 |
2.2 试验方法 | 第51-59页 |
2.2.1 Yr10CG基因表达载体的构建 | 第51页 |
2.2.1.1 Yr10CG基因的克隆 | 第51页 |
2.2.1.2 表达载体的构建 | 第51页 |
2.2.2 小麦的基因枪转化方法 | 第51-55页 |
2.2.2.1 所需要的培养基及试剂配制 | 第51-53页 |
2.2.2.2 Bobwhite幼胚愈伤的准备 | 第53-54页 |
2.2.2.3 共转化的表达载体的准备 | 第54页 |
2.2.2.4 金粉与转化载体的处理 | 第54页 |
2.2.2.5 基因枪轰击的步骤 | 第54-55页 |
2.2.2.6 转基因幼苗的培养及移栽 | 第55页 |
2.2.2.7 转基因苗的Basta抗性检测 | 第55页 |
2.2.2.8 转基因苗的PCR检测 | 第55页 |
2.2.3 含Yr10CG基因小麦品种的关联分析 | 第55-56页 |
2.2.4 基因作图群体的创建 | 第56-57页 |
2.2.5 基于 92K iSelect SNP芯片的BSA分析和基因定位 | 第57-58页 |
2.2.6 BSA抗性位点连锁标记的开发 | 第58-59页 |
3.结果与分析 | 第59-71页 |
3.1 Moro的条锈病抗性鉴定 | 第59页 |
3.2 Yr10CG基因的功能验证 | 第59-65页 |
3.2.1 含有Yr10CG的60份小麦品种的抗病性鉴定及关联分析 | 第61-65页 |
3.2.2 Yr10CG基因的克隆及表达载体的构建 | 第65页 |
3.2.3 Yr10CG转基因株系的条锈病抗性鉴定 | 第65页 |
3.3 Yr10基因的遗传分析及定位 | 第65-71页 |
3.3.1 Moro及含Yr10单基因分离群体的抗病性遗传分析 | 第65-67页 |
3.3.2 利用SSR及STS标记定位Yr10基因 | 第67-68页 |
3.3.3 Yr10CG标记与Yr10位点不连锁 | 第68页 |
3.3.4 基于 92K iSelect SNP芯片数据的BSA分析 | 第68-69页 |
3.3.5 Yr10基因区段的共线性分析及标记开发与定位 | 第69-71页 |
4 讨论 | 第71-73页 |
4.1 小种专一抗性基因的特点及合理利用 | 第71页 |
4.2 单基因分离群体的获得及应用 | 第71页 |
4.3 人工合成小麦在基因定位中的应用 | 第71-73页 |
第四章 YrD479基因的定位 | 第73-80页 |
1 目的及意义 | 第73页 |
2 材料与方法 | 第73-74页 |
2.1 试验材料 | 第73页 |
2.2 试验方法 | 第73-74页 |
2.2.1 SSR及STS标记的筛选 | 第73页 |
2.2.2 利用BSA分析初步定位DIC479来源的抗病基因 | 第73-74页 |
2.2.3 利用小麦与水稻的共线性开发标记 | 第74页 |
3.结果与分析 | 第74-78页 |
3.1 DIC479的条锈病抗性鉴定 | 第74-75页 |
3.2 DIC479的抗病性的遗传分析 | 第75-76页 |
3.3 多态性标记的筛选及高温成株抗病性基因的定位 | 第76-77页 |
3.4 比较基因组学分析及共线性标记的开发 | 第77-78页 |
4 讨论 | 第78-80页 |
结论 | 第80-82页 |
参考文献 | 第82-93页 |
致谢 | 第93-95页 |
攻读博士学位期间发表论文情况 | 第95-96页 |
附件 | 第96页 |