论文目录 | |
| 致谢 | 第1-13页 |
| 缩略词 | 第13-15页 |
| 摘要 | 第15-17页 |
| Abstract | 第17-20页 |
| 前言 | 第20-23页 |
| 1 文献综述 | 第23-36页 |
| 1.1 MAPK级联途径 | 第23-26页 |
| 1.1.1 基本组成 | 第23页 |
| 1.1.2 植物MAPKKK | 第23-24页 |
| 1.1.3 植物MAPKK | 第24-25页 |
| 1.1.4 植物MAPK | 第25-26页 |
| 1.2 植物MAPK级联途径的生物学功能 | 第26-33页 |
| 1.2.1 在植物生长发育中的作用 | 第26-29页 |
| 1.2.1.1 在细胞分裂中的作用 | 第27-28页 |
| 1.2.1.2 在细胞分化及发育中的作用 | 第28页 |
| 1.2.1.3 在植物生殖发育中的作用 | 第28-29页 |
| 1.2.1.4 在植物衰老和器官脱落中的作用 | 第29页 |
| 1.2.2 在植物响应生物胁迫中的作用 | 第29-31页 |
| 1.2.3 在植物响应非生物胁迫中的作用 | 第31-33页 |
| 1.3 植物MAPK的下游作用因子 | 第33-35页 |
| 1.4 番茄MAPK级联途径的研究进展 | 第35-36页 |
| 2 植物MAPK级联途径基因家族的进化及相关基因的表达分析 | 第36-83页 |
| 2.1 材料与方法 | 第37-40页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第37页 |
| 2.1.2 试验试剂 | 第37页 |
| 2.1.3 植物MAPK、MAPKK、MAPKKK家族成员鉴定 | 第37-38页 |
| 2.1.4 植物MAPK级联途径家族基因序列特征分析 | 第38页 |
| 2.1.5 苗期逆境胁迫处理 | 第38-39页 |
| 2.1.6 植物MAPK级联途径家族基因的表达分析 | 第39-40页 |
| 2.1.6.1 植物总RNA的提取反转录合成cDNA | 第39页 |
| 2.1.6.2 荧光实时定量PCR | 第39-40页 |
| 2.2 结果与分析 | 第40-81页 |
| 2.2.1 植物MAPKKK基因家族成员的鉴定及进化分析 | 第40-62页 |
| 2.2.1.1 番茄MAPKKK基因的鉴定及表达特征分析 | 第40-49页 |
| 2.2.1.2 黄瓜MAPKKK基因家族成员的鉴定及表达分析 | 第49-56页 |
| 2.2.1.3 植物MAPKKK基因家族的进化分析 | 第56-62页 |
| 2.2.2 植物MAPKK基因家族成员的鉴定及进化分析 | 第62-72页 |
| 2.2.2.1 番茄MAPKK基因家族成员的鉴定及表达分析 | 第62-66页 |
| 2.2.2.2 黄瓜MAPKK基因家族成员的鉴定及表达分析 | 第66-69页 |
| 2.2.2.3 植物MAPKK基因家族的进化分析 | 第69-72页 |
| 2.2.3 植物MAPK基因家族成员的鉴定及进化分析 | 第72-81页 |
| 2.2.3.1 番茄MAPK基因家族成员的鉴定及表达分析 | 第72-74页 |
| 2.2.3.2 黄瓜MAPK基因家族成员的鉴定及表达分析 | 第74-78页 |
| 2.2.3.3 植物MAPK基因家族的进化分析 | 第78-81页 |
| 2.3 讨论 | 第81-83页 |
| 2.3.1 植物MAPKKK基因家族的进化 | 第81页 |
| 2.3.2 植物MAPKK基因家族的进化 | 第81-82页 |
| 2.3.3 植物MAPK基因家族的进化 | 第82-83页 |
| 3 番茄SlMPK13的表达特征及所编码蛋白质的基本特性分析 | 第83-99页 |
| 3.1 材料与方法 | 第84-91页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第84页 |
| 3.1.2 试验试剂 | 第84页 |
| 3.1.3 SlMPK13的时空表达特性分析 | 第84-88页 |
| 3.1.3.1 QRT-PCR分析 | 第84-85页 |
| 3.1.3.2 植物组织原位杂交分析 | 第85-88页 |
| 3.1.4 SlMPK13的基本特性分析 | 第88-91页 |
| 3.1.4.1 原核表达分析 | 第88-90页 |
| 3.1.4.2 蛋白SDS-PAGE电泳及Western Blot印迹 | 第90页 |
| 3.1.4.3 SlMPK13的亚细胞定位 | 第90-91页 |
| 3.2 结果与分析 | 第91-97页 |
| 3.2.1 SlMPK13在番茄开放花的雄蕊中优势表达 | 第91-94页 |
| 3.2.2 SlMPK13的磷酸化性质分析 | 第94-95页 |
| 3.2.3 SlMPK13的亚细胞定位 | 第95-97页 |
| 3.3 讨论 | 第97-99页 |
| 3.3.1 SlMPK13是一个在成熟花药中优势表达的重要基因 | 第97页 |
| 3.3.2 SlMPK13定位于细胞各部位并具有MPK激酶活性 | 第97-99页 |
| 4 番茄SlMPK13在花粉发育中的功能鉴定 | 第99-127页 |
| 4.1 材料方法 | 第100-107页 |
| 4.1.1 试验材料与试验试剂 | 第100页 |
| 4.1.2 RNAi载体的构建 | 第100-101页 |
| 4.1.2.1 正义片段和反义片段序列扩增 | 第100页 |
| 4.1.2.2 CaMV35S组成型启动子的RNAi载体构建 | 第100-101页 |
| 4.1.2.3 番茄花粉特异启动子LAT52的RNAi载体构建 | 第101页 |
| 4.1.3 RNAi载体对番茄植株的遗传转化 | 第101-103页 |
| 4.1.3.1 农杆菌菌株的获得与侵染菌液制备 | 第101-102页 |
| 4.1.3.2 番茄无菌苗的培养 | 第102页 |
| 4.1.3.3 番茄植株的遗传转化 | 第102-103页 |
| 4.1.4 转基因植株的分子检测 | 第103-104页 |
| 4.1.4.1 PCR检测 | 第103-104页 |
| 4.1.4.2 GUS组织化学染色 | 第104页 |
| 4.1.4.3 QRT-PCR检测 | 第104页 |
| 4.1.5 转基因番茄植株的表型观察 | 第104-107页 |
| 4.1.5.1 转基因番茄植株的形态观察 | 第104-105页 |
| 4.1.5.2 花粉生活力观察 | 第105-106页 |
| 4.1.5.3 花粉形态扫描电镜观察 | 第106页 |
| 4.1.5.4 花粉半薄切片观察 | 第106页 |
| 4.1.5.5 花粉形态超薄透射电镜观察 | 第106-107页 |
| 4.2 结果与分析 | 第107-124页 |
| 4.2.1 抑制SlMPK13表达对番茄营养生长的影响 | 第107-111页 |
| 4.2.2 抑制SlMPK13表达对番茄花器官的影响 | 第111-113页 |
| 4.2.3 SlMPK13组织特异性抑制表达对番茄花粉发育及坐果的影响 | 第113-119页 |
| 4.2.4 抑制SlMPK13表达对花粉超微结构的影响 | 第119-124页 |
| 4.3 讨论 | 第124-127页 |
| 4.3.1 SlMPK13在番茄生长发育过程中的作用存在多效型 | 第124-125页 |
| 4.3.2 SlMPK13在番茄花粉发育过程中起重要作用 | 第125-126页 |
| 4.3.3 SlMPK13通过影响细胞膜和液泡的变化而影响番茄花粉发育 | 第126-127页 |
| 5 抑制SlMPK13的表达对番茄转录组水平的影响 | 第127-139页 |
| 5.1 材料与方法 | 第128-130页 |
| 5.1.1 试验材料与试验试剂 | 第128页 |
| 5.1.2 植物总RNA提取及质量检测 | 第128页 |
| 5.1.3 转录组文库的构建及测序 | 第128-129页 |
| 5.1.4 测序数据处理 | 第129-130页 |
| 5.2 结果与分析 | 第130-137页 |
| 5.2.1 差异基因的鉴定 | 第130-132页 |
| 5.2.2 差异表达基因的基因本体论分析 | 第132-134页 |
| 5.2.3 差异表达基因的生物学代谢途径分析 | 第134-137页 |
| 5.3 讨论 | 第137-139页 |
| 5.3.1 转录组测序研究MAPK下游作用因子的可行性 | 第137页 |
| 5.3.2 SlMPK13在番茄花粉成熟过程中的调控机制推测 | 第137-139页 |
| 结论 | 第139-141页 |
| 参考文献 | 第141-157页 |
| 附表 | 第157-186页 |
| 博士在读期间发表的论文 | 第186页 |
