论文目录 | |
| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-19页 |
| 缩略词表 | 第19-21页 |
| 1 前言 | 第21-47页 |
| 1.1 植物与逆境胁迫 | 第21-24页 |
| 1.1.1 植物体内非生物胁迫的信号转导 | 第21-23页 |
| 1.1.2 非生物胁迫的多层次调控模式 | 第23-24页 |
| 1.2 泛素/26s蛋白酶体系统 | 第24-34页 |
| 1.2.1 泛素及泛素化过程的基本概念 | 第24-25页 |
| 1.2.2 泛素化过程中的关键酶 | 第25-27页 |
| 1.2.3 泛素化修饰的几种方式 | 第27-28页 |
| 1.2.4 泛素蛋白酶体在植物体内的作用 | 第28-31页 |
| 1.2.5 泛素蛋白酶体途径在逆境胁迫中的作用机制(以干旱胁迫为例) | 第31-34页 |
| 1.2.5.1 单Ub分子对植物干旱胁迫的调控研究 | 第31页 |
| 1.2.5.2 E2蛋白对植物干旱胁迫的调控研究 | 第31-32页 |
| 1.2.5.3 E3蛋白对植物干旱胁迫的调控研究 | 第32-34页 |
| 1.3 植物抗高温的主要机制 | 第34-40页 |
| 1.3.1 抗氧化物质在高温胁迫中的作用 | 第35-39页 |
| 1.3.2 热激转录因子和热激蛋白在高温胁迫中的作用 | 第39页 |
| 1.3.3 转录因子在高温胁迫中的作用 | 第39-40页 |
| 1.4 ROS的双重作用 | 第40-45页 |
| 1.4.1 ROS作为信号分子 | 第40-43页 |
| 1.4.2 ROS参与气孔运动 | 第43-45页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第45-47页 |
| 2 材料与方法 | 第47-67页 |
| 2.1 实验材料 | 第47-48页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第47页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第47页 |
| 2.1.3 主要试剂及酶 | 第47-48页 |
| 2.2 实验方法 | 第48-67页 |
| 2.2.1 DNA提取及PCR鉴定 | 第48页 |
| 2.2.2 RNA的抽提和反转录 | 第48-49页 |
| 2.2.3 PCR、RT-PCR和Real=time PCR的检测 | 第49页 |
| 2.2.4 各种载体的构建 | 第49-53页 |
| 2.2.5 水稻的遗传转化(农杆菌介导法) | 第53-55页 |
| 2.2.6 逆境胁迫处理及取样 | 第55-56页 |
| 2.2.7 OsHTAS以及互作蛋白的亚细胞定位 | 第56-59页 |
| 2.2.8 酵母双杂交筛选互作蛋白 | 第59-61页 |
| 2.2.8.1 酵母双杂交筛库 | 第59-60页 |
| 2.2.8.2 酵母质粒提取 | 第60-61页 |
| 2.2.8.3 酵母双杂交的点对点验证 | 第61页 |
| 2.2.9 蛋白质的原核表达、纯化及Western blot | 第61-63页 |
| 2.2.9.1 蛋白质的原核表达和纯化 | 第61-62页 |
| 2.2.9.2 Western blot | 第62-63页 |
| 2.2.10 抗氧化物酶活性及过氧化氢含量测定 | 第63-64页 |
| 2.2.11 扫描电镜样品制各办法 | 第64-65页 |
| 2.2.12 ABA含量测定 | 第65页 |
| 2.2.13 水稻苗期高温处理表型鉴定 | 第65-67页 |
| 3 结果与分析 | 第67-100页 |
| 3.1 OsHTAS的表达模式分析 | 第67-69页 |
| 3.2 OsHTAS的结构特点 | 第69页 |
| 3.3 OsHTAS过量表达及干扰转基因植株的获得及鉴定 | 第69-72页 |
| 3.4 OsHTAS功能获得性突变体的鉴定 | 第72-74页 |
| 3.5 OsHTAS RNA干扰株系苗期高温处理 | 第74-77页 |
| 3.6 oshtas突变体苗期高温处理 | 第77页 |
| 3.7 过量表达OsHTAS提高水稻苗期高温抗性 | 第77-78页 |
| 3.8 OsHTAS的亚细胞定位分析 | 第78-79页 |
| 3.9 OsHTAS的酵母双杂交分析 | 第79-86页 |
| 3.9.1 自激活检测 | 第80-81页 |
| 3.9.2 酵母双杂交初步筛库 | 第81-82页 |
| 3.9.3 RING finger domain与S27a存在相互作用 | 第82-83页 |
| 3.9.4 RING finger domain与其它蛋白存在相互作用 | 第83-85页 |
| 3.9.5 OsHTASN与APX8存在相互作用 | 第85-86页 |
| 3.10 OsHTAS与S27a在水稻原生质体中的共定位分析 | 第86-88页 |
| 3.11 OsHTAS RNA干扰株系中逆境相关基因以及互作基因全部下调表达 | 第88-89页 |
| 3.12 oshtas中逆境相关基因及互作基因全部上调表达 | 第89-90页 |
| 3.13 OsHTAS过表达引起逆境相关基因及互作基因全部上调表达 | 第90-91页 |
| 3.14 高温处理后oshtas中抗坏血酸过氧化物酶(APX)、过氧化氢酶(CAT)活性低于ZH11 | 第91-92页 |
| 3.15 高温处理后oshtas中过氧化氢含量高于ZH11 | 第92页 |
| 3.16 OsHTAS调控气孔关闭 | 第92-94页 |
| 3.17 OsHTAS上调表达增加水稻体内ABA含量 | 第94-95页 |
| 3.18 OsHTAS抑制DST基因的表达 | 第95-96页 |
| 3.19 OsHTAS以及S27a蛋白的原核表达及Western杂交 | 第96-98页 |
| 3.20 OsHTAS RNA干扰株系的农艺性状调查 | 第98-100页 |
| 4 讨论 | 第100-104页 |
| 4.1 OsHTAS的亚细胞定位 | 第100-101页 |
| 4.2 OsHTAS调控气孔运动 | 第101-102页 |
| 4.3 OsHTAS的酵母双杂交分析 | 第102-104页 |
| 5 全文总计及展望 | 第104-106页 |
| 5.1 全文总结 | 第104-105页 |
| 5.2 展望 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-127页 |
| 附录 | 第127-135页 |
| 附表 (引物) | 第135-138页 |
| 作者简历 | 第138页 |
| 博士在读期间发表论文 | 第138页 |
