论文目录 | |
| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 主要中英文缩略表 | 第15-16页 |
| 文献综述 | 第16-35页 |
| 第一章 低等脊椎动物IL-1F研究进展 | 第17-22页 |
| 第二章 水生动物Toll样受体家族研究进展 | 第22-30页 |
| 第三章 益生菌的应用及其在对肠道免疫的影响 | 第30-35页 |
| 试验研究 | 第35-108页 |
| 第一章 中华鳖IL-1β的克隆和鉴定 | 第36-67页 |
| 1. 引言 | 第36-37页 |
| 2. 材料与方法 | 第37-53页 |
| 2.1. 中华鳖的样品采集 | 第37页 |
| 2.2. IL-1β的cDNA全长克隆 | 第37-40页 |
| 2.3. 序列分析 | 第40-41页 |
| 2.4. 嗜水气单胞菌感染中华鳖 | 第41页 |
| 2.5. tIL-1β原核表达和纯化 | 第41-42页 |
| 2.6. 抗tIL-1β多克隆抗体的制备和免疫印迹 | 第42-43页 |
| 2.7. 荧光定量PCR | 第43页 |
| 2.8. IL-1β的ICE位点的鉴定 | 第43-45页 |
| 2.9. 真核表达的tIL-1β刺激中华鳖外周血单核细胞(PBMo) | 第45-49页 |
| 2.10. 引物设计 | 第49-53页 |
| 3. 试验结果 | 第53-63页 |
| 3.1. 中华鳖IL-1β的cDNA全长序列 | 第53-55页 |
| 3.2. 中华鳖基因内含子/外显子组成与进化树分析 | 第55-57页 |
| 3.3. 中华鳖tIL-1β在嗜水气单胞菌感染后的组织表达差异 | 第57-59页 |
| 3.4. tIL-1β的切割位点的探索 | 第59-60页 |
| 3.5. PBMo细胞的分离培养 | 第60-61页 |
| 3.6. 真核表达的tIL-1β用于刺激PBMo | 第61-63页 |
| 4. 讨论 | 第63-65页 |
| 5. 小结 | 第65-67页 |
| 第二章 中华鳖Toll样受体4的克隆和功能鉴定 | 第67-89页 |
| 1. 引言 | 第67-68页 |
| 2. 材料与方法 | 第68-74页 |
| 2.1. 引物设计 | 第68-70页 |
| 2.2. 中华鳖的组织样品采集 | 第70页 |
| 2.3. 总RNA抽提 | 第70页 |
| 2.4. tTLR4的cDNA全长序列的获取 | 第70页 |
| 2.5. 序列分析 | 第70页 |
| 2.6. 细胞培养 | 第70页 |
| 2.7. tTLR4的组织表达差异分析 | 第70页 |
| 2.8. 稳定表达tTLR4的HEK293细胞系的构建 | 第70-73页 |
| 2.9. tTLR4的功能验证实验 | 第73-74页 |
| 3. 结果与分析 | 第74-85页 |
| 3.1. tTLR4全长cDNA序列克隆 | 第74-75页 |
| 3.2. TLR4序列分析 | 第75-80页 |
| 3.3. 嗜水气单胞菌感染后的tTLR4的mRNA组织表达差异 | 第80-81页 |
| 3.4. LPS刺激中华鳖PBMo细胞 | 第81-82页 |
| 3.5. tTLR4能够识别LPS,并激活NF-κB启动子 | 第82-85页 |
| 4. 讨论 | 第85-88页 |
| 5. 小结 | 第88-89页 |
| 第三章 枯草芽孢杆菌对中华鳖肠道菌群以及免疫相关基因的影响 | 第89-108页 |
| 1. 引言 | 第89页 |
| 2. 材料与方法 | 第89-94页 |
| 2.1. 引物设计 | 第89-91页 |
| 2.2. 中华鳖外周血单核/巨噬细胞转录组测序 | 第91页 |
| 2.3. 测序 | 第91-92页 |
| 2.4. Toll样受体基因的搜索 | 第92页 |
| 2.5. 动物饲养实验设计 | 第92-93页 |
| 2.6. 样品采集 | 第93页 |
| 2.7. 肠道酶活的测定 | 第93页 |
| 2.8. 肠道微生物的454测序 | 第93-94页 |
| 2.9. 肠道组织免疫相关基因表达水平的测定 | 第94页 |
| 2.10. 分离培养外周血单核/巨噬细胞(PBMo)细胞 | 第94页 |
| 2.11. 枯草芽孢杆菌与嗜水气单胞菌刺激PBMo | 第94页 |
| 3. 结果与分析 | 第94-105页 |
| 3.1. De novo拼接中华鳖外周血转录组 | 第94-96页 |
| 3.2. 中华鳖的TLRs基因 | 第96-98页 |
| 3.3. 中枯草芽孢杆菌对中华鳖生产的影响 | 第98页 |
| 3.4. 枯草芽孢杆菌对甲鱼肠道微生物菌群组成的影响 | 第98-102页 |
| 3.5. 肠道中消化酶的酶活 | 第102-103页 |
| 3.6. 枯草芽孢杆菌对肠道免疫相关基因的影响 | 第103页 |
| 3.7. 枯草芽孢杆菌与嗜水气单胞菌对PBMo细胞免疫基因表达的影响 | 第103-105页 |
| 4. 讨论 | 第105-107页 |
| 5. 小结 | 第107-108页 |
| 全文结论 | 第108-109页 |
| 创新点 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-123页 |
| 作者简介 | 第123-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
| 附录 | 第125-128页 |
