论文目录 | |
致谢 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
主要英文缩写及译名 | 第13-19页 |
第一章 绪论 | 第19-38页 |
1.1 甲壳动物血细胞的分类方法 | 第19-23页 |
1.1.1 显微镜分类法 | 第19-20页 |
1.1.2 细胞染色分类法 | 第20-21页 |
1.1.3 透射电子显微镜分类法 | 第21-22页 |
1.1.4 流式细胞术分类法 | 第22-23页 |
1.2 甲壳动物血细胞的分离 | 第23-24页 |
1.3 甲壳动物血细胞的免疫功能 | 第24-33页 |
1.3.1 细胞吞噬作用 | 第25-26页 |
1.3.2 细胞粘附因子 | 第26-28页 |
1.3.3 细胞酚氧化酶原系统 | 第28-31页 |
1.3.4 细胞凝集素 | 第31-33页 |
1.3.5 结节形成、包囊作用和细胞毒理作用 | 第33页 |
1.4 甲壳动物血细胞凋亡的调控因子 | 第33-36页 |
1.4.1 IAPs和IAP结合蛋白 | 第34页 |
1.4.2 凋亡蛋白酶Caspases | 第34-35页 |
1.4.3 Bcl-2家族蛋白 | 第35页 |
1.4.4 Apaf-1和Apip家族蛋白 | 第35页 |
1.4.5 丝裂原活化蛋白激酶MAPK蛋白 | 第35-36页 |
1.5 研究目的及意义 | 第36-37页 |
1.6 技术路线 | 第37-38页 |
第二章 中华绒螯蟹血细胞分类及吞噬作用研究 | 第38-51页 |
2.1 材料与仪器 | 第38-40页 |
2.1.1 实验仪器 | 第38-39页 |
2.1.2 试剂及试剂盒 | 第39-40页 |
2.2 实验方法 | 第40-42页 |
2.2.1 实验动物 | 第40页 |
2.2.2 血细胞收集 | 第40页 |
2.2.3 血细胞形态观察与分类 | 第40-41页 |
2.2.4 血细胞数量统计 | 第41页 |
2.2.5 流式细胞术检测分类 | 第41页 |
2.2.6 血细胞超微结构观察 | 第41页 |
2.2.7 血细胞体内吞噬作用观察 | 第41-42页 |
2.2.8 数据统计分析 | 第42页 |
2.3 实验结果 | 第42-48页 |
2.3.1 中华绒螯蟹血细胞的分类 | 第42-46页 |
2.3.2 血细胞的体内吞噬作用 | 第46-48页 |
2.4 讨论 | 第48-50页 |
2.5 本章小结 | 第50-51页 |
第三章 LPS诱导中华绒螯蟹血细胞凋亡机制的研究 | 第51-71页 |
3.1 材料与仪器 | 第51-54页 |
3.1.1 实验仪器 | 第52页 |
3.1.2 试剂及试剂盒 | 第52-54页 |
3.2 实验方法 | 第54-56页 |
3.2.1 实验动物 | 第54页 |
3.2.2 血细胞收集 | 第54页 |
3.2.3 LPS、嗜水气单胞菌及枯草芽孢杆菌对血细胞数量的影响 | 第54页 |
3.2.4 LPS体外诱导血细胞凋亡的检测 | 第54-56页 |
3.2.5 LPS诱导血细胞ROS检测 | 第56页 |
3.2.6 数据统计分析 | 第56页 |
3.3 实验结果 | 第56-68页 |
3.3.1 嗜水气单胞菌和枯草芽孢杆菌对中华绒螯蟹血细胞数量的影响 | 第56-58页 |
3.3.2 不同浓度LPS对中华绒螯蟹血细胞数量的影响 | 第58-60页 |
3.3.3 LPS诱导中华绒螯蟹血细胞凋亡的形态学观察 | 第60-63页 |
3.3.4 LPS诱导中华绒螯蟹血细胞凋亡的DNA片段化分析 | 第63-64页 |
3.3.5 流式细胞术检测LPS诱导后中华绒螯蟹血细胞的凋亡 | 第64-65页 |
3.3.6 LPS诱导中华绒螯蟹血细胞的ROS检测 | 第65-68页 |
3.4 讨论 | 第68-70页 |
3.5 本章小结 | 第70-71页 |
第四章 中华绒螯蟹细胞粘附蛋白EsPX的克隆及其对外源刺激物的免疫反应 | 第71-94页 |
4.1 材料与仪器 | 第71-74页 |
4.1.1 实验仪器 | 第71-72页 |
4.1.2 试剂及试剂盒 | 第72-74页 |
4.2 实验方法 | 第74-80页 |
4.2.1 实验动物 | 第74页 |
4.2.2 血细胞收集 | 第74-75页 |
4.2.3 中华绒螯蟹EsPX序列分析 | 第75页 |
4.2.4 EsPX mRNA组织表达分析 | 第75-77页 |
4.2.5 外源刺激物对EsPX mRNA表达量的影响 | 第77-78页 |
4.2.6 EsPX蛋白的亚细胞定位 | 第78-79页 |
4.2.7 外源刺激物对EsPX蛋白表达的影响 | 第79-80页 |
4.2.8 数据统计分析 | 第80页 |
4.3 实验结果 | 第80-90页 |
4.3.1 EsPX序列及同源性分析结果 | 第80-82页 |
4.3.2 EsPX多序列比对和系统发育树的构建结果 | 第82-84页 |
4.3.3 EsPX在不同组织中的分布情况 | 第84页 |
4.3.4 外源刺激物对EsPX基因表达的影响 | 第84-86页 |
4.3.5 EsPX蛋白在不同血细胞的定位 | 第86-87页 |
4.3.6 外源刺激物对血细胞EsPX蛋白表达的影响 | 第87-90页 |
4.4 讨论 | 第90-92页 |
4.5 本章小结 | 第92-94页 |
第五章 中华绒螯蟹MAPK基因的克隆及功能分析 | 第94-121页 |
5.1 材料与仪器 | 第94-98页 |
5.1.1 实验仪器 | 第94-95页 |
5.1.2 主要软件 | 第95页 |
5.1.3 试剂及试剂盒 | 第95-98页 |
5.2 实验方法 | 第98-105页 |
5.2.1 实验动物 | 第98页 |
5.2.2 血细胞收集 | 第98页 |
5.2.3 中华绒螯蟹EsMAPK序列分析 | 第98-99页 |
5.2.4 EsMAPK mRNA组织表达分析 | 第99-101页 |
5.2.5 外源刺激物对EsMAPK mRNA表达量的影响 | 第101页 |
5.2.6 EsMAPK蛋白的原核表达 | 第101-104页 |
5.2.7 中华绒螯蟹EsMAPK蛋白的亚细胞定位 | 第104-105页 |
5.2.8 外源刺激物对EsMAPK蛋白表达的影响 | 第105页 |
5.2.9 数据统计分析 | 第105页 |
5.3 实验结果 | 第105-117页 |
5.3.1 EsMAPK序列分析 | 第105-106页 |
5.3.2 EsMAPK氨基酸序列同源性分析和系统发育树的构建 | 第106-110页 |
5.3.3 EsMAPK在不同组织中的表达 | 第110页 |
5.3.4 外源刺激物对EsMAPK基因表达的影响 | 第110-112页 |
5.3.5 EsMAPK蛋白原核表达 | 第112-115页 |
5.3.6 LPS和嗜水气单胞菌对EsMAPK蛋白表达的影响 | 第115-117页 |
5.4 讨论 | 第117-119页 |
5.5 本章小结 | 第119-121页 |
第六章 研究结果与展望 | 第121-125页 |
6.1 研究结果 | 第121-122页 |
6.2 主要创新点 | 第122-123页 |
6.3 不足和展望 | 第123-125页 |
参考文献 | 第125-140页 |
作者简历及攻读博士期间发表的论文 | 第140-141页 |