论文目录 | |
| 摘要 | 第11-14页 |
| Abstract | 第14-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-38页 |
| 1.1 我国棉花现状 | 第18页 |
| 1.2 棉花产量构成因素 | 第18页 |
| 1.3 棉花纤维发育研究进展 | 第18-22页 |
| 1.3.1 棉花纤维起始发育 | 第19页 |
| 1.3.2 棉花纤维伸长发育 | 第19-21页 |
| 1.3.3 棉花纤维次生壁发育 | 第21页 |
| 1.3.4 利用基因工程改良棉花纤维长度和强度 | 第21-22页 |
| 1.4 棉花种子发育 | 第22-24页 |
| 1.5 细胞分裂素的特性 | 第24-29页 |
| 1.5.1 细胞分裂素的发现 | 第24页 |
| 1.5.2 细胞分裂素的合成 | 第24-25页 |
| 1.5.3 细胞分裂素的降解 | 第25页 |
| 1.5.4 细胞分裂素的运输 | 第25-26页 |
| 1.5.5 细胞分裂素的信号传导 | 第26页 |
| 1.5.6 细胞分裂素功能 | 第26-29页 |
| 1.5.6.1 细胞分裂素调控生殖发育 | 第26-27页 |
| 1.5.6.2 细胞分裂素调控茎端分生组织发育 | 第27-28页 |
| 1.5.6.3 细胞分裂素调控根系发育 | 第28页 |
| 1.5.6.4 细胞分裂素延缓叶片衰老 | 第28-29页 |
| 1.6 细胞分裂素对棉花纤维的影响 | 第29页 |
| 1.7 生长素调控棉花纤维的发育 | 第29-30页 |
| 1.8 激素间的相互作用调控生长发育 | 第30-34页 |
| 1.8.1 生长素和细胞分裂素调控茎端分生组织的形成 | 第31-32页 |
| 1.8.2 生长素和细胞分裂素调控根系分生组织的发育 | 第32页 |
| 1.8.3 生长素和细胞分裂素调控叶序和侧芽的形成 | 第32-33页 |
| 1.8.4 生长素与细胞分裂素之间共同调控种子发育 | 第33-34页 |
| 1.9 基因聚合定向改良新品种 | 第34-38页 |
| 1.9.1 转基因聚合技术的研究 | 第35-36页 |
| 1.9.2 多基因聚合棉花推广利用 | 第36-38页 |
| 第二章 引言 | 第38-42页 |
| 2.1 研究意义及立题依据 | 第38-40页 |
| 2.2 技术路线 | 第40-42页 |
| 第三章 调控细胞分裂素水平促进棉花生长发育 | 第42-86页 |
| 3.1 材料 | 第42-44页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第42页 |
| 3.1.2 菌株和载体 | 第42页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第42页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第42-43页 |
| 3.1.5 主要缓冲液配方 | 第43-44页 |
| 3.2 方法 | 第44-50页 |
| 3.2.1 棉花RNA提取 | 第44-45页 |
| 3.2.2 cDNA合成 | 第45页 |
| 3.2.3 定量PCR反应 | 第45页 |
| 3.2.4 棉花中细胞分裂素含量分析 | 第45-46页 |
| 3.2.5 棉花叶片叶绿素含量分析 | 第46页 |
| 3.2.6 棉花叶片光合速率分析 | 第46页 |
| 3.2.7 棉花可溶性糖含量分析 | 第46-48页 |
| 3.2.8 棉花可溶性蛋白含量分析 | 第48页 |
| 3.2.9 棉花胚珠培养 | 第48页 |
| 3.2.10 测定根系长度 | 第48页 |
| 3.2.11 田间性状统计 | 第48-50页 |
| 3.3 结果与分析 | 第50-82页 |
| 3.3.1 体外添加细胞分裂素促进棉花胚珠发育 | 第50-51页 |
| 3.3.2 组成型下调细胞分裂素氧化酶基因表达促进棉花种子和纤维的发育 | 第51-74页 |
| 3.3.2.1 转基因棉花的获得 | 第51页 |
| 3.3.2.2 转基因棉花茎中GhCKX基因表达分析 | 第51-52页 |
| 3.3.2.3 转基因棉花植株表型 | 第52-54页 |
| 3.3.2.4 组成型下调GhCKX增加分枝数和花蕾数量 | 第54-56页 |
| 3.3.2.5 组成型下调GhCKX棉花提高了内源细胞分裂素含量 | 第56-63页 |
| 3.3.2.6 组成型下调GhCKX棉花叶绿素含量增加 | 第63-65页 |
| 3.3.2.7 组成型下调GhCKX棉花延迟叶片衰老 | 第65-66页 |
| 3.3.2.8 组成型下调GhCKX棉花光合速率增强 | 第66页 |
| 3.3.2.9 组成型下调GhCKX棉铃中可溶性糖和蛋白变化 | 第66-68页 |
| 3.3.2.10 组成型调控GhCKX对根系发育的影响 | 第68-69页 |
| 3.3.2.11 组成型下调GhCKX棉花的田间产量性状分析 | 第69-71页 |
| 3.3.2.12 组成型下调GhCKX棉花的纤维品质分析 | 第71-72页 |
| 3.3.2.13 CR-6株系的田间随机区组试验 | 第72-74页 |
| 3.3.3 种子特异下调GhCKX的表达促进棉花种子增大 | 第74-82页 |
| 3.3.3.1 利用种子特异启动子下调GhCKX获得的转基因棉花产量和品质性状 | 第74-77页 |
| 3.3.3.2 种子特异下调GhCKX的转基因棉花T_3代的种子萌发 | 第77页 |
| 3.3.3.3 种子中特异下调GhCKX转基因棉花T_3代幼苗根的发育 | 第77-79页 |
| 3.3.3.4 D113启动子下调GhCKX转基因棉花子叶脱落和黄化现象 | 第79-80页 |
| 3.3.3.5 测定内源调控GhCKX的转基因棉花种子的性状特征 | 第80-82页 |
| 3.4 小结 | 第82-84页 |
| 3.4.1 下调GhCKX的转基因提高了棉花内源细胞分裂素的含量 | 第82页 |
| 3.4.2 与ipt相比,CKX在调控内源细胞分裂素上是个“温和”基因 | 第82页 |
| 3.4.3 组成型下调GhCKX基因的表达提高叶片叶绿素的含量：延迟叶片的衰老促进棉花植株的光合作用,增加棉铃中物质的积累 | 第82-83页 |
| 3.4.4 适度下调GhCKX基因的表达促进纤维产量和种子产量的同步提高 | 第83页 |
| 3.4.5 种子中特异下调GhCKX促进棉花种子发育,子指增加 | 第83-84页 |
| 3.5 讨论 | 第84-86页 |
| 3.5.1 细胞分裂素促进棉花植株生长,调控棉铃的发育存在剂量效应 | 第84页 |
| 3.5.2 不同类型细胞分裂素在棉花不同时期、不同组织中的含量与组分不同 | 第84-86页 |
| 第四章 调控内源生长素和细胞分裂素的基因聚合,实现种子-纤维产量和品质同步改良 | 第86-128页 |
| 4.1 材料 | 第86-88页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第86页 |
| 4.1.2 菌株和载体 | 第86页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第86页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第86-87页 |
| 4.1.5 主要缓冲液配方 | 第87-88页 |
| 4.2 方法 | 第88-93页 |
| 4.2.1 棉花RNA提取 | 第88页 |
| 4.2.2 cDNA合成 | 第88页 |
| 4.2.3 PCR扩增 | 第88-89页 |
| 4.2.4 定量PCR反应 | 第89页 |
| 4.2.5 IAA和CKs含量测定 | 第89页 |
| 4.2.6 开花当天胚珠电镜扫描 | 第89-90页 |
| 4.2.7 成熟纤维计数 | 第90页 |
| 4.2.8 种子可溶性糖含量测定 | 第90-91页 |
| 4.2.9 棉花叶片光合速率分析 | 第91页 |
| 4.2.10 种子含油率测定 | 第91页 |
| 4.2.11 种子萌发 | 第91-92页 |
| 4.2.12 测定根系长度 | 第92页 |
| 4.2.13 田间性状统计 | 第92-93页 |
| 4.3 结果与分析 | 第93-127页 |
| 4.3.1 亲本FBP7::iaaM-9的特征 | 第93-94页 |
| 4.3.2 亲本35S::GhCKXRNAi-6的特征 | 第94页 |
| 4.3.3 亲本Pv::antisenseGhCKX-13的特征 | 第94页 |
| 4.3.4 亲本D113::antisenseGhCKX-43的特征 | 第94页 |
| 4.3.5 聚合FBP7::iaaM-9和35S::GhCKXRNAi-6后代性状 | 第94-116页 |
| 4.3.5.1 利用杂交手段实现FBP7::iaaM和35S::GhCKXRNAi的聚合 | 第94-95页 |
| 4.3.5.2 FBP7::iaaM×35S::GhCKXRNAi的F_1代植株表型 | 第95-96页 |
| 4.3.5.3 FBP7::iaaM×35S::GhCKXRNAi的F_2代单株分离 | 第96-99页 |
| 4.3.5.4 聚合双基因棉花单株纯合子鉴定 | 第99页 |
| 4.3.5.5 聚合双基因棉花中iaaM和GhCKX在双基因纯合株系中的表达分析 | 第99-101页 |
| 4.3.5.6 双基因纯合转基因棉花的纤维发育 | 第101-103页 |
| 4.3.5.7 双基因纯合转基因棉花的内源IAA和CKs含量 | 第103-104页 |
| 4.3.5.8 双基因纯合转基因棉花棉铃的发育 | 第104-107页 |
| 4.3.5.9 双基因纯合转基因棉花光合速率增加,叶片衰老延迟 | 第107-110页 |
| 4.3.5.10 双基因纯合转基因棉花根系发育情况 | 第110-111页 |
| 4.3.5.11 双基因纯合转基因棉花种子质量增加 | 第111-114页 |
| 4.3.5.12 转基因亲本、双基因纯合株系和野生型棉花棉花田间产量性状分析 | 第114-115页 |
| 4.3.5.13 转基因亲本、双基因纯合株系和野生型棉花纤维品质分析 | 第115-116页 |
| 4.3.6 聚合FBP7::iaaM-9和Pv::antisenseGhCKX-13双载体后代性状 | 第116-119页 |
| 4.3.6.1 FBP7::iaaM-9×Pv::antisenseGhCKX-13的F_1代棉花铃重性状 | 第116-117页 |
| 4.3.6.2 FBP7::iaaM-9×Pv::antisenseGhCKX-13的F_1代棉花的衣分 | 第117-118页 |
| 4.3.6.3 FBP7：：iaaM-9×Pv：：antisenseGhCKX-13 F_1代棉花的子指 | 第118-119页 |
| 4.3.6.4 FBP7：：iaaM-9×Pv：：antisenseGhCKX-13的F_1代棉花的纤维品质 | 第119页 |
| 4.3.7 聚合FBP7：：iaaM-9和D113：：antisenseGhCKX-43后代性状 | 第119-125页 |
| 4.3.7.1 聚合FBP7：：iaaM-9和D113：：antisenseGhCKX-43的F_1代棉花铃数 | 第119-120页 |
| 4.3.7.2 FBP7：：iaaM-9×D113：：antisenseGhCKX-43的F_1代棉花衣分 | 第120-121页 |
| 4.3.7.3 FBP7：：iaaM-9×D113：：antisenseGhCKX-43的F_1代棉花的子指 | 第121页 |
| 4.3.7.4 FBP7：：iaaM-9×D113：：antisenseGhCKX-43的F_1代棉花纤维品质 | 第121-122页 |
| 4.3.7.5 FBP7：：iaaM-9×Pv：：antisenseGhCKX-13/D113：：antisenseGhCKX-43后代的表达分析 | 第122-123页 |
| 4.3.7.6 FBP7：：iaaM-9×Pv：：antisenseGhCKX-13后代激素含量测定 | 第123-125页 |
| 4.3.8 FBP7：：iaaM-9×Pv：：antisenseGhCKX-13/D113：：antisenseGhCKX-43的F_3代性状分析 | 第125-127页 |
| 4.4 结论 | 第127-128页 |
| 4.4.1 三种不同启动子下调GhCKX的棉花与FBP7：：iaaM-9的基因聚合弥补亲本FBP7：：iaaM-9子指偏低的缺陷 | 第127页 |
| 4.4.2 基因聚合进一步提高了棉花纤维和种子的产量,同时改进了纤维的细度 | 第127-128页 |
| 第五章 讨论 | 第128-134页 |
| 5.1 CKX是调控内源细胞分裂素水平的理温和基因,在提高种子产量的基因工程育种中有重要利用价值 | 第128页 |
| 5.2 细胞分裂素提高棉花植株的光合作用效率,延迟叶片的衰老,增加棉铃中物质的积累 | 第128-129页 |
| 5.3 细胞分裂素促进棉花生殖器官的发育 | 第129-130页 |
| 5.4 三种不同启动子的比较 | 第130-131页 |
| 5.5 生长素的分布与纤维—胚胎发育 | 第131-132页 |
| 5.6 棉花胚珠中适时/适度的调控生长素和细胞分裂素水平可以在增加棉花纤维产量的同时促进种子发育 | 第132-134页 |
| 第六章 主要结论和创新点 | 第134-136页 |
| 6.1 主要结论 | 第134页 |
| 6.2 创新点 | 第134-136页 |
| 参考文献 | 第136-154页 |
| 附录 | 第154-158页 |
| 附录1：缩略词表 | 第154-156页 |
| 附录2：参加课题 | 第156-157页 |
| 附录3：发表文章 | 第157-158页 |
| 致谢 | 第158-159页 |
