论文目录 | |
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-26页 |
| 1.1 杆状病毒 | 第14页 |
| 1.2 杆状病毒的形态结构和两相复制周期 | 第14-16页 |
| 1.3 杆状病毒基因组 | 第16-18页 |
| 1.4 杆状病毒基因表达的调控 | 第18页 |
| 1.5 杆状病毒结构蛋白 | 第18-22页 |
| 1.5.1 BV特有的囊膜蛋白 | 第19页 |
| 1.5.2 ODV特有的囊膜蛋白 | 第19-20页 |
| 1.5.3 BV和ODV共有的囊膜蛋白 | 第20-21页 |
| 1.5.4 BV和ODV的核衣壳蛋白 | 第21-22页 |
| 1.6 杆状病毒非结构蛋白 | 第22-25页 |
| 1.7 研究目的和意义 | 第25-26页 |
| 第二章 ac130(gp16)的功能研究 | 第26-76页 |
| 2.1 研究背景 | 第26页 |
| 2.2 实验材料 | 第26-35页 |
| 2.2.1 菌株、病毒、昆虫细胞和实验昆虫 | 第26-27页 |
| 2.2.2 引物、质粒和bacmids | 第27-30页 |
| 2.2.3 培养基 | 第30-32页 |
| 2.2.4 试剂盒、工具酶和分子量标准 | 第32页 |
| 2.2.5 抗生素和化学试剂 | 第32-35页 |
| 2.2.6 主要仪器 | 第35页 |
| 2.3 实验方法 | 第35-47页 |
| 2.3.1 感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
| 2.3.2 质粒提取 | 第36-37页 |
| 2.3.3 Bacmid的提取 | 第37页 |
| 2.3.4 PCR | 第37页 |
| 2.3.5 从凝胶中回收DNA片段 | 第37-38页 |
| 2.3.6 重组bacmid构建 | 第38-39页 |
| 2.3.7 转染和感染 | 第39页 |
| 2.3.8 病毒滴度测定 | 第39页 |
| 2.3.9 SDS-PAGE和Western-blot | 第39-40页 |
| 2.3.10 病毒DNA复制检测 | 第40-41页 |
| 2.3.11 病毒感染细胞和病毒电镜分析 | 第41页 |
| 2.3.12 病毒感染细胞亚细胞组分分离 | 第41-42页 |
| 2.3.13 生物测定 | 第42-43页 |
| 2.3.14 酵母双杂交 | 第43-47页 |
| 2.4 结果 | 第47-73页 |
| 2.4.1 gp16缺失和回复突变体构建 | 第47-50页 |
| 2.4.2 gp16缺失和回复突变体在Sf9细胞中的复制产率 | 第50-53页 |
| 2.4.3 gp16缺失和回复突变体在受感染细胞中的DNA复制分析 | 第53页 |
| 2.4.4 gp16缺失和回复突变体VP39和多角体蛋白表达分析 | 第53-55页 |
| 2.4.5 gp16缺失和回复突变体在受感染细胞中的形态发生 | 第55-59页 |
| 2.4.6 GP16在受感染细胞中的亚细胞定位 | 第59-61页 |
| 2.4.7 gp16缺失对病毒杀虫毒力的影响 | 第61-64页 |
| 2.4.8 gp16过表达和早表达突变体在Sf9细胞中的复制产率 | 第64-67页 |
| 2.4.9 与AcMNPV GP16蛋白相互作用的寄主细胞蛋白的筛选 | 第67-73页 |
| 2.5 讨论 | 第73-76页 |
| 第三章 ac132的功能研究 | 第76-106页 |
| 3.1 研究背景 | 第76页 |
| 3.2 实验材料 | 第76-80页 |
| 3.2.1 菌株、病毒和昆虫细胞 | 第76页 |
| 3.2.2 引物、bacmids和质粒 | 第76-78页 |
| 3.2.3 培养基 | 第78-79页 |
| 3.2.4 试剂盒、工具酶和分子量标准 | 第79页 |
| 3.2.5 抗生素和化学试剂 | 第79-80页 |
| 3.2.6 主要仪器 | 第80页 |
| 3.3 实验方法 | 第80-84页 |
| 3.3.1 感受态细胞的制备 | 第80页 |
| 3.3.2 质粒和bacmid提取 | 第80页 |
| 3.3.3 PCR反应 | 第80页 |
| 3.3.4 重组bacmid构建 | 第80页 |
| 3.3.5 转染和感染 | 第80页 |
| 3.3.6 病毒滴度测定 | 第80页 |
| 3.3.7 SDS-PAGE和Western-blot | 第80-81页 |
| 3.3.8 病毒核衣壳和囊膜分离、纯化以及AC132检测 | 第81-82页 |
| 3.3.9 免疫荧光实验 | 第82-83页 |
| 3.3.10 病毒感染细胞电镜分析 | 第83页 |
| 3.3.11 免疫共沉淀 | 第83-84页 |
| 3.4 实验结果 | 第84-102页 |
| 3.4.1 ac129、ac130、ac131和ac132多基因缺失突变体的构建及其对病毒BV复制影响的分析 | 第84-89页 |
| 3.4.2 ac132缺失突变体的构建及其对病毒BV复制影响的分析 | 第89-93页 |
| 3.4.3 ac132缺失对病毒基因组DNA复制以及晚期基因表达无显著影响 | 第93-94页 |
| 3.4.4 ac132缺失对病毒形态发生的影响 | 第94-97页 |
| 3.4.5 AC132序列分析 | 第97页 |
| 3.4.6 AC132的病毒结构定位 | 第97-99页 |
| 3.4.7 AC132在受感染细胞中的表达时程 | 第99-100页 |
| 3.4.8 AC132在受感染细胞中的亚细胞定位 | 第100-102页 |
| 3.4.9 AC132与E18和P6.9发生相互作用 | 第102页 |
| 3.5 讨论 | 第102-106页 |
| 结论 | 第106-107页 |
| 本论文的主要创新点 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-118页 |
| 附录 | 第118-120页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第120-121页 |
| 致谢 | 第121页 |
