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水稻纹枯病菌营养体亲和性分化研究

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水稻纹枯病菌营养体亲和性分化研究
论文目录
 
摘要第1-6页
Abstract第6-9页
英文缩略词对照表第9-14页
1 前言第14-30页
  1.1 丝核菌的分类地位第14页
  1.2 R. solani AG-1生理分化及融合亚群划分第14-15页
  1.3 生物学技术在研究稻纹枯病菌遗传分化中的应用第15-18页
    1.3.1 同工酶第15-16页
    1.3.2 可溶性蛋白第16页
    1.3.3 随机扩增多态性第16-17页
    1.3.4 扩增片段长度多态性第17-18页
    1.3.5 简单序列重复间第18页
  1.4 病原菌的致病与寄主的抗病机理第18-20页
    1.4.1 病原菌致病机理第18-19页
    1.4.2 寄主的抗病机理第19-20页
  1.5 水稻纹枯病抗病育种研究第20-25页
    1.5.1 水稻纹枯病的抗性鉴定方法第20-22页
      1.5.1.1 成株期抗性鉴定第20-21页
      1.5.1.2 苗期抗性鉴定第21-22页
    1.5.2 水稻纹枯病的接种和调查时期第22页
    1.5.3 水稻纹枯病的调查标准第22-23页
    1.5.4 抗源筛选第23-24页
    1.5.5 水稻的抗性遗传研究第24-25页
    1.5.6 水稻纹枯病的抗病育种方法第25页
  1.6 真菌营养体不亲和性鉴定方法第25-26页
  1.7 真菌营养体不亲和的遗传基础第26-27页
  1.8 研究真菌营养体不亲和性的意义第27-28页
  1.9 本研究的目的意义第28-30页
2 水稻纹枯病菌营养体亲和性分化的田间调查第30-46页
  2.1 材料与方法第31-32页
    2.1.1 培养基第31页
    2.1.2 病害样本采集第31页
    2.1.3 病原菌的分离纯化与保存第31页
    2.1.4 菌株间营养体亲和性鉴定第31-32页
  2.2 结果与分析第32-44页
  2.3 结论与讨论第44-46页
3 影响水稻纹枯病菌营养体亲和性分化的因子研究第46-62页
  3.1 材料与方法第47-51页
    3.1.1 培养基第47页
    3.1.2 供试菌株及水稻材料第47-48页
    3.1.3 水稻品种对稻纹枯病菌营养体亲和性分化的影响第48页
      3.1.3.1 水稻的种植及连续接种第48页
      3.1.3.2 再分离菌株与原始接种菌株的营养体亲和性鉴定第48页
    3.1.4 水稻抗性对菌株cx-2营养体亲和性分化的影响第48-49页
    3.1.5 杀菌剂胁迫对菌株cx-2连续继代菌株营养体亲和性分化的影响第49页
      3.1.5.1 不同杀菌剂对菌株cx-2的毒力曲线第49页
      3.1.5.2 cx-2在不同杀菌剂胁迫下的连续继代培养及继代菌株的营养体亲和性鉴定第49页
    3.1.6 培养温度对稻纹枯病菌连续继代菌株营养体亲和性分化的影响第49页
    3.1.7 不同pH值对菌株cx-2连续继代菌株营养体亲和性分化的影响第49-50页
    3.1.8 不同营养对菌株cx-2连续继代菌株营养体亲和性分化的影响第50页
    3.1.9 室内诱导菌株cx-2营养体亲和性分化最佳条件的探讨第50-51页
      3.1.9.1 不同营养成分对稻纹枯病菌营养体亲和性分化的影响第50页
      3.1.9.2 影响cx-2营养体亲和性分化因素的最佳组合第50-51页
  3.2 结果与分析第51-59页
    3.2.1 水稻品种对菌株cx-2营养体亲和性分化的影响第51-54页
    3.2.2 水稻抗性对菌株cx-2营养体亲和性分化的影响第54-55页
    3.2.3 供试杀菌剂对菌株cx-2营养体亲和性分化的影响第55页
    3.2.4 供试温度对菌株cx-2营养体亲和性分化的影响第55-56页
    3.2.5 pH对菌株cx-2营养体亲和性分化的影响第56-57页
    3.2.6 不同营养对菌株cx-2营养体亲和性分化的影响第57页
    3.2.7 室内诱导菌株cx-2营养体亲和性分化最佳条件的探讨第57-59页
      3.2.7.1 不同营养成分对稻纹枯病菌营养体亲和性分化的影响第57-58页
      3.2.7.2 影响菌株cx-2营养体亲和性分化因素的最佳组合第58-59页
  3.3 结论与讨论第59-62页
4 营养体亲和性分化菌株的致病力测定和AFLP分析第62-75页
  4.1 材料与方法第62-69页
    4.1.1 供试菌株第62-63页
    4.1.2 致病力测定第63-64页
    4.1.3 AFLP分析第64-69页
      4.1.3.1 菌株总DNA的提取第64页
      4.1.3.2 DNA浓度和纯度的测定第64-65页
      4.1.3.3 基因组酶切第65页
      4.1.3.4 接头连接第65-66页
      4.1.3.5 预扩增第66页
      4.1.3.6 选择性扩增第66-67页
      4.1.3.7 聚丙烯酰胺变性胶电泳第67-69页
  4.2 结果与分析第69-73页
    4.2.1 菌株的致病力第69-70页
    4.2.2 菌株AFLP分析第70-73页
      4.2.2.1 预扩增第70-71页
      4.2.2.2 选择性扩增第71-72页
      4.2.2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳第72-73页
  4.3 结论与讨论第73-75页
5 营养体亲和性分化菌株不亲和原因初步分析第75-96页
  5.1 材料与方法第75-82页
    5.1.1 主要试剂和仪器第75-76页
      5.1.1.1 主要试剂第75-76页
      5.1.1.2 主要仪器第76页
    5.1.2 供试菌株第76页
    5.1.3 融合细胞观察第76-77页
    5.1.4 胞外分泌物第77页
    5.1.5 融合细胞的DNAladder观察第77页
    5.1.6 双向电泳分析第77-81页
      5.1.6.1 菌株生长速率测定第77页
      5.1.6.2 供试菌株及菌体制备第77-78页
      5.1.6.3 菌体总蛋白提取第78页
      5.1.6.4 蛋白的溶解及定量第78-79页
      5.1.6.5 SDS-PAGE检测第79页
      5.1.6.6 等电聚焦相关参数的优化第79-80页
      5.1.6.7 IPG胶条平衡第80页
      5.1.6.8 第二向电泳(SDS-PAGE电泳)第80页
      5.1.6.9 染色第80-81页
      5.1.6.10 不同蛋白提取方案的评估第81页
    5.1.7 亲和性分化菌株与原始菌株的总蛋白图谱分析第81页
    5.1.8 营养体亲和性分化菌株与原始菌株互作的蛋白质组学分析第81-82页
    5.1.9 质谱鉴定第82页
  5.2 结果与分析第82-93页
    5.2.1 融合细胞死亡观察第82-83页
    5.2.2 胞外分泌物第83页
    5.2.3 融合细胞的DNA ladder观察第83-84页
    5.2.4 双向电泳体系的建立第84-89页
      5.2.4.1 生长速率测定第84页
      5.2.4.2 标准曲线第84页
      5.2.4.3 SDS-PAGE电泳检测第84-85页
      5.2.4.4 电泳相关参数的确定第85-87页
      5.2.4.5 不同蛋白提取方案的比较第87-89页
    5.2.5 营养体亲和性分化菌株与原始菌株的蛋白质双向电泳分析第89-91页
      5.2.5.1 单向比较第89-90页
      5.2.5.2 向电泳第90-91页
    5.2.6 营养体亲和性分化菌株与原始菌株互作的蛋白质组学分析第91-92页
    5.2.7 质谱鉴定第92-93页
  5.3 结论与讨论第93-96页
6 全文总结第96-99页
  6.1 全文结论第96-97页
    6.1.1 田间菌株营养体亲和性变化情况第96页
    6.1.2 影响水稻纹枯病菌营养体亲和性分化的因子第96页
    6.1.3 诱导水稻纹枯病菌营养体亲和性分化的条件第96-97页
    6.1.4 菌株营养体亲和性分化与致病力的关系第97页
    6.1.5 菌株营养体不亲和的原因第97页
  6.2 本文的特色和创新点第97-98页
  6.3 进一步的研究设想第98-99页
致谢第99-100页
参考文献第100-114页
攻读学位期间发表的主要论文(著作)及科研项目和成果第114页

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