论文目录 | |
中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
英文缩写词表 | 第8-14页 |
引言 | 第14-15页 |
第一篇 文献综述 | 第15-34页 |
第一章 新城疫病毒概述 | 第15-25页 |
1.1 新城疫病毒分子生物学 | 第15-20页 |
1.1.1 新城疫病毒的形态特征 | 第15页 |
1.1.2 新城疫病毒基因组及其所编码的蛋白质 | 第15-20页 |
1.2 新城疫病毒的分型 | 第20-21页 |
1.3 家禽 NDV 感染的先天免疫 | 第21-23页 |
1.4 新城疫病毒介导的细胞免疫 | 第23-25页 |
第二章 PBMC 研究进展 | 第25-34页 |
2.1 禽类 NK 细胞 | 第25-27页 |
2.1.1 NK 细胞功能 | 第25-26页 |
2.1.2 NK 细胞受体家族 | 第26-27页 |
2.2 禽类 T 细胞 | 第27-29页 |
2.2.1 TCR 结构和谱系 | 第27-28页 |
2.2.2 CD4 和 CD8 | 第28-29页 |
2.3 禽类树突状细胞 | 第29-31页 |
2.3.1 鸡树突状细胞的功能的特性 | 第29-31页 |
2.4 单核细胞 | 第31页 |
2.5 禽类外周血 B 细胞的活化 | 第31-34页 |
第二篇 研究内容 | 第34-88页 |
第一章 新城疫病毒感染鸡外周血单个核细胞蛋白质组分析 | 第34-54页 |
1.1 材料 | 第34-36页 |
1.1.1 实验动物和病毒 | 第34页 |
1.1.2 主要试剂 | 第34-35页 |
1.1.3 主要仪器 | 第35页 |
1.1.4 溶液配制 | 第35-36页 |
1.2 方法 | 第36-40页 |
1.2.1 实验动物感染和样品采集 | 第36-37页 |
1.2.2 二维凝胶电泳和图像分析 | 第37-39页 |
1.2.3 Western Blot 分析 | 第39-40页 |
1.3 结果 | 第40-50页 |
1.3.1 NDV 感染结果 | 第40-41页 |
1.3.2 2-DE 分析结果 | 第41-42页 |
1.3.3 质谱鉴定结果 | 第42-44页 |
1.3.4 部分蛋白点质谱鉴定 | 第44-50页 |
1.3.5 Western blot 分析 | 第50页 |
1.4 讨论 | 第50-53页 |
1.5 小结 | 第53-54页 |
第二章 ILK 对 NDV 复制和增殖的影响 | 第54-77页 |
2.1 材料 | 第54-56页 |
2.1.1 菌株载体 | 第54页 |
2.1.2 主要试剂 | 第54-55页 |
2.1.3 主要仪器 | 第55页 |
2.1.4 溶液配制 | 第55-56页 |
2.2 方法 | 第56-66页 |
2.2.1 构建 pFLAG-CMV-2-ILK 真核表达质粒 | 第56-61页 |
2.2.2 荧光定量 PCR 反应体系的建立 | 第61-62页 |
2.2.3 转染与表达检测 | 第62-63页 |
2.2.4 真核表达质粒pFLAG-CMV-2-ILK 转染DF-1 细胞及接种NDV | 第63-64页 |
2.2.5 siRNA 分子设计合成 | 第64页 |
2.2.6 siRNA 分子转染与表达检测 | 第64-65页 |
2.2.7 siILK 分子转染 DF-1 细胞及接种 NDV | 第65-66页 |
2.3 结果 | 第66-74页 |
2.3.1 目的片段的扩增 | 第66-67页 |
2.3.2 真核表达质粒 pFLAG-CMV-2-ILK 的鉴定 | 第67-68页 |
2.3.3 测序结果 | 第68页 |
2.3.4 实时荧光定量 PCR 标准曲线的绘制 | 第68-69页 |
2.3.5 真核质粒 pFLAG-CMV-2-ILK 上调表达 ILK 的表达 | 第69页 |
2.3.6 ILK 上调表达对 NDV 复制的影响 | 第69-70页 |
2.3.7 ILK 上调表达对 NDV 增殖的影响 | 第70-71页 |
2.3.8 siRNA 下调 DF-1 细胞 ILK 表达 | 第71-72页 |
2.3.9 ILK 下调表达对 NDV 复制的影响 | 第72-73页 |
2.3.10 ILK 下调表达对 NDV 增殖的影响 | 第73-74页 |
2.4 讨论 | 第74-76页 |
2.5 小结 | 第76-77页 |
第三章 CyPA 上调表达对 NDV 复制的影响 | 第77-88页 |
3.1 材料 | 第77-79页 |
3.1.1 菌株载体 | 第77页 |
3.1.2 主要试剂 | 第77-78页 |
3.1.3 主要仪器 | 第78页 |
3.1.4 溶液配制 | 第78-79页 |
3.2 方法 | 第79-82页 |
3.2.1 构建 pFLAG-CMV-2-CyPA 真核表达质粒 | 第79-81页 |
3.2.2 转染与表达检测 | 第81页 |
3.2.3 真核表达质粒 pFLAG-CMV-2-CyPA 转染 DF-1 细胞及接种NDV | 第81-82页 |
3.3 结果 | 第82-86页 |
3.3.1 目的片段的扩增 | 第82页 |
3.3.2 真核表达质粒 pFLAG-CMV-2-CyPA 的鉴定 | 第82-83页 |
3.3.3 测序结果 | 第83页 |
3.3.4 真核质粒 pFLAG-CMV-2-CyPA 在 DF-1 细胞中表达 | 第83-84页 |
3.3.5 CyPA 上调表达对 NDV 复制的影响 | 第84-85页 |
3.3.6 CyPA 上调表达对 NDV 增殖的影响 | 第85-86页 |
3.4 讨论 | 第86-87页 |
3.5 小结 | 第87-88页 |
结论 | 第88-90页 |
参考文献 | 第90-106页 |
导师简介 | 第106-108页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第108-110页 |
致谢 | 第110页 |