论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第14-31页 |
| 1.1 研究问题的由来 | 第14页 |
| 1.2 文献综述 | 第14-30页 |
| 1.2.1 猪抗病候选基因研究进展 | 第14-18页 |
| 1.2.2 Cav1基因研究进展 | 第18-24页 |
| 1.2.3 microRNA的基本特征与功能 | 第24-26页 |
| 1.2.4 靶向Cav1基因的miRNA的研究进展与不足 | 第26页 |
| 1.2.5 miRNA的抗病毒研究与不足 | 第26-27页 |
| 1.2.6 胞吞介导的病毒入胞机制 | 第27-29页 |
| 1.2.7 乙脑病毒的特性、危害及侵入细胞的途径 | 第29-30页 |
| 1.3 本研究的目的与意义 | 第30-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-50页 |
| 2.1 材料 | 第31-37页 |
| 2.1.1 样品、细胞和病毒 | 第31页 |
| 2.1.2 载体和菌株 | 第31-33页 |
| 2.1.3 试剂、药品和试剂盒 | 第33-36页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第36页 |
| 2.1.5 主要分子生物学软件、网站和数据库 | 第36-37页 |
| 2.2 方法 | 第37-50页 |
| 2.2.1 本研究的技术路线 | 第37页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第37-38页 |
| 2.2.3 靶向猪Cav1基因的miRNA预测 | 第38页 |
| 2.2.4 双荧光素酶报告基因实验 | 第38-42页 |
| 2.2.5 基因的定量表达分析 | 第42-44页 |
| 2.2.6 蛋白质印迹(Western blot) | 第44-46页 |
| 2.2.7 Caveolae的电镜观察 | 第46-48页 |
| 2.2.8 病毒感染和滴度测定 | 第48页 |
| 2.2.9 免疫荧光染色 | 第48-49页 |
| 2.2.10 流式细胞仪检测JEV感染的阳性细胞 | 第49-50页 |
| 3 结果 | 第50-69页 |
| 3.1 靶向猪Cav1基因的miRNA的预测与鉴定 | 第50-56页 |
| 3.1.1 靶向猪Cav1基因的miRNA的预测 | 第50页 |
| 3.1.2 双荧光素酶报告基因结果 | 第50-52页 |
| 3.1.3 mRNA水平检测结果 | 第52-54页 |
| 3.1.4 蛋白水平检测结果 | 第54-55页 |
| 3.1.5 猪Cav1基因和miR-124的组织表达谱 | 第55-56页 |
| 3.2 超表达miR-124对caveolae数量的影响 | 第56-58页 |
| 3.2.1 PK15细胞中caveolin-1亚细胞定位 | 第56-57页 |
| 3.2.2 超表达miR-124降低caveolae的密度 | 第57-58页 |
| 3.3 超表达miR-124对乙脑病毒增殖的影响 | 第58-69页 |
| 3.3.1 PK15细胞感染乙脑病毒后Cav1基因和miR-124表达变化 | 第58-60页 |
| 3.3.2 超表达miR-124对乙脑病毒增殖的作用 | 第60-61页 |
| 3.3.3 甲基-β-环糊精(MβCD)对乙脑病毒增殖的影响 | 第61-63页 |
| 3.3.4 敲低Cav1基因表达对乙脑病毒增殖的影响 | 第63-65页 |
| 3.3.5 金雀异黄素(Genistein)对乙脑病毒增殖的影响 | 第65-67页 |
| 3.3.6 敲低Clathrin heavy chain基因表达对乙脑病毒增殖的影响 | 第67-69页 |
| 4 讨论 | 第69-78页 |
| 4.1 关于microRNA对Cav1基因调控 | 第69-71页 |
| 4.1.1 关于靶向Cav1基因的miRNA的预测与验证 | 第69-70页 |
| 4.1.2 关于miR-124对Cav1基因的调控作用 | 第70-71页 |
| 4.2 关于caveolae结构的电镜观察 | 第71-74页 |
| 4.2.1 关于透射电镜样品的制作 | 第71-72页 |
| 4.2.2 关于细胞膜caveolae密度的统计方法 | 第72-73页 |
| 4.2.3 关于miR-124对细胞膜caveolae密度的影响 | 第73-74页 |
| 4.3 关于miR-124对乙脑病毒增殖的影响 | 第74-78页 |
| 4.3.1 关于研究病毒通过caveolae胞吞途径进入细胞的方法 | 第74-75页 |
| 4.3.2 关于乙脑病毒进入细胞的胞吞途径 | 第75-76页 |
| 4.3.3 关于miR-124抑制乙脑病毒增殖的机制 | 第76-78页 |
| 5 小结 | 第78-80页 |
| 5.1 主要研究结果与结论 | 第78页 |
| 5.2 本研究的创新点与特色 | 第78-79页 |
| 5.3 本研究的不足之处与值得进一步研究的问题 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-98页 |
| 在读期间其他工作 | 第98-101页 |
| 攻读学位期间撰写论文题录 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
