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遏蓝菜OPT3的克隆和功能研究及转柠檬酸合酶基因烟草对铅吸收转运的影响

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遏蓝菜OPT3的克隆和功能研究及转柠檬酸合酶基因烟草对铅吸收转运的影响
论文目录
 
致谢第1-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-12页
目录第12-15页
图表目录第15-16页
第一篇 文献综述第16-44页
第1章 植物修复技术与超积累植物第16-37页
  1.1 引言第16-17页
  1.2 重金属与植物修复第17-20页
    1.2.1 植物修复的概念和主要类型第17-18页
    1.2.2 重金属在植物体内的的吸收、运输与转化第18-20页
  1.3 超积累植物的耐性与积累机理与植物修复技术第20-31页
    1.3.1 超积累植物的发现及定义第20-22页
    1.3.2 超积累植物对重金属毒害的耐性及解毒机制第22-31页
  1.4 构建转基因植物用于污染物修复的研究进展第31-35页
    1.4.1 植物的内稳系统因子第32-35页
    1.4.2 跨膜金属载体的应用第35页
  1.5 研究展望第35-37页
第2章 OPT蛋白家族的研究进展第37-44页
  2.1 OPTs的转运底物第38-40页
    2.1.1 OPTs对小分子肽的转运第38-39页
    2.1.2 OPTs对GSH、PCs的转运第39页
    2.1.3 OPTs对金属及金属复合物的转运第39-40页
  2.2 植物中的OPT家族成员研究进展第40-41页
    2.2.1 拟南芥中的OPT家族成员第40页
    2.2.2 水稻中的OPT家族成员第40-41页
  2.3 ATOPT3研究进展第41-44页
第二篇 研究内容第44-93页
第3章 超积累植物遏蓝菜中OPT3的分子克隆第44-60页
  3.1 引言第44-45页
  3.2 材料与方法第45-52页
    3.2.1 植物培养第45页
    3.2.2 菌株与载体第45-46页
    3.2.3 主要化学与生物试剂第46页
    3.2.4 兼并引物设计与RT-PCR第46页
    3.2.5 RACE扩增目的基因全长片段第46-47页
    3.2.6 RACE与RT-PCR第47页
    3.2.7 生物信息学分析第47-48页
    3.2.8 半定量RT-PCR第48页
    3.2.9 实时定量PCR第48页
    3.2.10 原位杂交第48-49页
    3.2.11 洋葱表皮的亚细胞定位第49-52页
  3.3 结果第52-58页
    3.3.1 目的基因的获得,碱基序列及氨基酸序列分析第52-54页
    3.3.2 同源序列比对第54-56页
    3.3.3 TcOPT3在组织和器官中的表达分析第56-58页
    3.3.4 TcOPT3的亚细胞定位第58页
  3.4 讨论第58-60页
第4章 TcOPT3的功能研究第60-70页
  4.1 引言第60页
  4.2 材料与方法第60-62页
    4.2.1 菌株与载体第60-61页
    4.2.2 实时定量PCR第61页
    4.2.3 酵母功能验证第61-62页
  4.3 结果第62-66页
    4.3.1 缺Fe,缺Zn胁迫对TcOPT3基因表达的响应第62-63页
    4.3.2 酵母互补功能验证第63-64页
    4.3.3 TcOPT3对重金属耐性和积累的影响第64-66页
  4.4 讨论第66-70页
    4.4.1 TcOPT3具有转运金属离子的能力第66-67页
    4.4.2 TcOPT3在金属的长距离运输中的可能作用第67-70页
第5章 转柠檬酸合酶烟草对于铅耐性的提高第70-90页
  5.1 引言第70-71页
  5.2 材料和方法第71-75页
    5.2.1 植物材料第71页
    5.2.2 植物培养第71-72页
    5.2.3 转基因烟草的分子鉴定第72-73页
    5.2.4 转基因烟草柠檬酸合酶活性测定第73-74页
    5.2.5 转基因烟草柠檬酸含量及分泌测定第74页
    5.2.6 野生型烟草外源添加柠檬酸的耐性实验第74页
    5.2.7 Evans Blue染色第74-75页
    5.2.8 重金属亚细胞分布的测定第75页
    5.2.9 重金属含量测定第75页
  5.3 结果第75-87页
    5.3.1 OsCS1在转基因株系CS42的表达第75-77页
    5.3.2 转CS基因植物表现出对Pb胁迫耐性的提高第77-79页
    5.3.3 转基因植物对重金属胁迫的响应机理第79-82页
    5.3.4 野生型植物对Pb胁迫响应机理验证第82-83页
    5.3.5 水培条件下转CS基因植物中重金属含量的分布变化第83-87页
  5.4 讨论第87-90页
    5.4.1 转基因植物对Pb耐性的提高可能是由于柠檬酸分泌的增多第87页
    5.4.2 转基因株系从根部到地上部转运能力的提高第87-90页
第6章 全文总结、创新点及研究展望第90-93页
  6.1 主要研究结论第90页
  6.2 创新点第90-91页
  6.3 研究展望第91-93页
参考文献第93-116页
附录 本论文中出现的缩写及中英文对照第116-117页
作者简历及攻读博士期间论文发表情况第117页

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