论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 英文缩略词表 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一篇 文献综述 | 第15-39页 |
| 第1章 miRNA 的研究进展及研究策略 | 第15-31页 |
| 1.1 真核生物 miRNA 的生物学合成过程 | 第16-18页 |
| 1.2 miRNA 的主要作用机制 | 第18-20页 |
| 1.3 miRNA 的检测与鉴定技术 | 第20-24页 |
| 1.3.1 克隆技术 | 第20-21页 |
| 1.3.2 Northern blotting 杂交技术 | 第21页 |
| 1.3.3 实时荧光定量 PCR 检测技术 | 第21-22页 |
| 1.3.4 miRNA 基因芯片技术 | 第22-23页 |
| 1.3.5 新一代高通量测序技术 | 第23-24页 |
| 1.4 miRNA 靶基因的预测及鉴定方法 | 第24-26页 |
| 1.4.1 生物信息学对 miRNA 靶基因的预测 | 第24-25页 |
| 1.4.2 miRNA 靶基因体外验证技术 | 第25-26页 |
| 1.4.3 miRNA 靶基因体内验证 | 第26页 |
| 1.5 哺乳动物 miRNA 研究中经常用到的数据库、软件 | 第26-31页 |
| 1.5.1 miRBase 数据库 | 第27页 |
| 1.5.2 targetScan 软件数据库 | 第27页 |
| 1.5.3 miRanda 软件 | 第27-28页 |
| 1.5.4 RNA22 软件 | 第28页 |
| 1.5.5 PicTar 软件 | 第28页 |
| 1.5.6 RNAhybrid 软件 | 第28-29页 |
| 1.5.7 miRecords 软件数据库 | 第29-31页 |
| 第2章 垂体及生殖系统 miRNA 研究进展 | 第31-39页 |
| 2.1 哺乳动物垂体 miRNA 研究进展 | 第31-34页 |
| 2.1.1 正常垂体组织中 miRNA 调控功能 | 第31-33页 |
| 2.1.2 miRNA 对垂体瘤调控影响 | 第33-34页 |
| 2.2 miRNA 对睾丸及精子发生的影响 | 第34-36页 |
| 2.3 miRNA 对卵巢及卵母细胞发育的影响 | 第36-37页 |
| 2.4 miRNA 对乳腺发育及泌乳的影响 | 第37-38页 |
| 2.5 本研究的目的意义 | 第38-39页 |
| 第二篇 研究内容 | 第39-99页 |
| 第1章 性成熟前后牛腺垂体 miRNAs 高通量测序及生物信息学分析 | 第39-65页 |
| 1.1 材料与方法 | 第39-45页 |
| 1.1.1 材料 | 第39-40页 |
| 1.1.2 方法 | 第40-45页 |
| 1.2 结果 | 第45-61页 |
| 1.2.1 总 RNA 提取与质量检测 | 第45-47页 |
| 1.2.2 垂体组织鉴定 | 第47页 |
| 1.2.3 Solexa 测序结果 | 第47-51页 |
| 1.2.4 性成熟前后牛腺垂体 miRNAs 表达谱差异分析 | 第51-60页 |
| 1.2.5 荧光定量 PCR 验证差异 miRNA | 第60-61页 |
| 1.3 讨论 | 第61-64页 |
| 1.3.1 miRNA 的信息挖掘与鉴定 | 第61-62页 |
| 1.3.2 性成熟前后 miRNAs 表达差异分析 | 第62页 |
| 1.3.3 候选 miRNAs 分析 | 第62-63页 |
| 1.3.4 miRNAs 荧光定量检测 | 第63-64页 |
| 1.4 小结 | 第64-65页 |
| 第2章 差异 miRNAs 靶基因预测及验证 | 第65-83页 |
| 2.1 材料与方法 | 第65-67页 |
| 2.1.1 材料 | 第65-66页 |
| 2.1.2 方法 | 第66-67页 |
| 2.2 结果 | 第67-79页 |
| 2.2.1 miRNAs 靶基因预测 | 第67-71页 |
| 2.2.2 靶基因的功能注释 | 第71-77页 |
| 2.2.3 pmirGLO-FSHR/MUT 重组质粒鉴定 | 第77-78页 |
| 2.2.4 miR-23a 靶基因 FSHR 结合位点验证 | 第78-79页 |
| 2.3 讨论 | 第79-81页 |
| 2.3.1 关于 miRNAs 靶基因预测方法 | 第79页 |
| 2.3.2 miRNAs 靶基因功能注释 | 第79-80页 |
| 2.3.3 miR-23a 生物学功能 | 第80-81页 |
| 2.4 小结 | 第81-83页 |
| 第3章 miR-23a 鉴定及对 FSHR 基因表达的影响 | 第83-99页 |
| 3.1 材料与方法 | 第83-85页 |
| 3.1.1 材料 | 第83页 |
| 3.1.2 方法 | 第83-85页 |
| 3.2 结果 | 第85-93页 |
| 3.2.1 大鼠腺垂体细胞体外培养结果 | 第85-86页 |
| 3.2.2 大鼠垂体细胞小 RNA 文库建立 | 第86页 |
| 3.2.3 基因芯片检测 | 第86-87页 |
| 3.2.4 性成熟前后大鼠垂体细胞 miRNA 表达谱差异分析 | 第87-92页 |
| 3.2.5 大鼠垂体 miRNA 差异表达谱与牛对比分析 | 第92-93页 |
| 3.2.6 miRNA-23a转染大鼠腺垂体细胞 | 第93页 |
| 3.3 讨论 | 第93-97页 |
| 3.3.1 关于大鼠腺垂体细胞体外分离培养技术体系 | 第93-94页 |
| 3.3.2 miRNAs 在不同物种同一组织间保守性 | 第94-95页 |
| 3.3.3 miRNAs 靶基因鉴定方法比较 | 第95-96页 |
| 3.3.4 FSHR 的功能与本研究意义 | 第96-97页 |
| 3.4 小结 | 第97-99页 |
| 结论 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-113页 |
| 附表 | 第113-129页 |
| 导师简介 | 第129-130页 |
| 作者简介 | 第130-131页 |
| 致谢 | 第131页 |
