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核仁因子Def在斑马鱼肝脏部分切除后伤口无疤修复中的功能研究

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核仁因子Def在斑马鱼肝脏部分切除后伤口无疤修复中的功能研究
论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-8页
缩略词表第8-13页
第一章 前言第13-27页
  1.1 哺乳动物肝脏再生的生物学特征第14-16页
  1.2 哺乳动物肝脏再生与信号通路第16-20页
    1.2.1 启动阶段第17-18页
    1.2.2 增殖阶段第18-19页
    1.2.3 终止阶段第19-20页
  1.3 斑马鱼的肝脏结构与功能第20-22页
  1.4 斑马鱼肝脏再生及其研究进展第22-24页
  1.5 基因def及其研究进展第24-26页
  1.6 本研究的内容、目的与意义第26-27页
第二章 材料与方法第27-45页
  2.1 斑马鱼品系及饲养第27页
  2.2 常规生化试剂及配方第27-30页
  2.3 DNA相关实验方法第30-31页
    2.3.1 基因的克隆第30-31页
    2.3.2 DNA测序第31页
    2.3.3 PCR鉴定转基因鱼及突变体第31页
  2.4 RNA相关实验方法第31-35页
    2.4.1 总RNA的提取第32页
    2.4.2 总RNA中基因组DNA的消化第32页
    2.4.3 两步法RT-PCR第32-33页
    2.4.4 Northern杂交第33-34页
    2.4.5 转录组RNA测序(RNA seq)第34-35页
  2.5 蛋白质相关实验方法第35-37页
    2.5.1 mu-Leg1多抗制备第35-36页
    2.5.2 蛋白质免疫印迹杂交(Western Blotting)第36页
    2.5.3 抗体免疫荧光染色第36-37页
  2.6 组织原位杂交相关实验方法第37-38页
    2.6.1 肝脏组织切片的制备第37页
    2.6.2 Masson染色第37页
    2.6.3 HE染色第37-38页
    2.6.4 PAS染色第38页
    2.6.5 EdU(5-乙炔基-2’-脱氧尿苷)的标记及检测第38页
  2.7 斑马鱼的操作第38-39页
    2.7.1 肝脏部分切除手术(Partial Hepatectomy,PH)第38-39页
    2.7.2 肝重/体重比值(Liver-to-Body Ratio,LBR)的测量第39页
    2.7.3 小分子药物的处理第39页
  2.8 斑马鱼显微注射第39-40页
  2.9 mu-leg1基因条件性剔除小鼠模型的建立第40页
  2.10 Western强度及荧光强度的定量第40-41页
  2.11 本研究涉及的列表第41-45页
第三章 def~(hi429/+)突变体部分肝脏切除后切口处再生缺陷第45-51页
  3.1 def~(hi429/+)成年斑马鱼肝脏中Def单倍剂量表达不足第45-46页
  3.2 def~(hi429/+)突变体部分肝脏切除后切口处再生缺陷第46-47页
  3.3 def~(hi429/+)突变体部分肝脏切除后LBR值和肝组织结构未显异常第47-51页
第四章 def~(hi429/+)突变体部分肝脏切除后伤口形成疤痕第51-59页
  4.1 def~(hi429/+)突变体术后早期细胞增殖或凋亡无异常第51-53页
  4.2 def~(hi429/+)突变体术后肝脏伤口无法正常重塑第53-55页
  4.3 def~(hi429/+)突变体术后伤口纤维化第55-59页
第五章 def~(hi429/+)突变体术后伤口处结疤与异常的炎症反应有关第59-73页
  5.1 def~(hi429/+)突变体术后肝脏切口处TGFβ信号异常第59-63页
  5.2 def~(hi429/+)突变体肝脏伤口处胶原蛋白沉积与活性氧化物信号无关第63-64页
  5.3 def~(hi429/+)突变体肝脏术后伤口处TGFβ信号异常源于过度的炎症反应第64-65页
  5.4 def~(hi429/+)突变体肝脏内促炎症因子异常表达第65-66页
  5.5 def~(hi429/+)突变体肝脏术后炎症细胞行为紊乱第66-73页
第六章 def~(hi429/+)突变体术后切口处结疤依赖于Def-p53信号通路第73-83页
  6.1 def~(hi429/+)突变体术后结疤源于肝细胞中Def单倍剂量表达不足第73-79页
  6.2 def~(hi429/+)突变体术后切口结疤依赖于p53信号通路的持续激活第79-83页
第七章 def~(hi429/+)突变体术后结疤与HMGB1表达上调有关第83-85页
  7.1 def~(hi429/+)突变体肝脏中HMGB1表达上调第83页
  7.2 def~(hi429/+)突变体术后伤疤的形成依赖于HMGB1第83-85页
第八章 肝脏再生细胞的来源第85-95页
  8.1 斑马鱼部分肝脏切除后切口处再生肝细胞具有肝前体细胞特性第85-87页
  8.2 斑马鱼部分肝脏切除后非切口处再生肝细胞的来源第87-89页
  8.3 Tg(fabp10a:CreER~(T2)转基因斑马鱼的构建及表达分析第89-95页
第九章 斑马MJegl复系同源基因在小鼠中的表达谱分析及mu-legl基因敲除第95-101页
  9.1 小鼠mu-leg1基因克隆与序列分析第95-96页
  9.2 基因mu-leg1组织表达谱分析第96-97页
  9.3 mu-Leg1多抗的制备第97页
  9.4 mu-Leg1组织表达谱分析第97-99页
  9.5 mu-leg1基因条件性剔除小鼠模型的建立第99-101页
第十章 结论与讨论第101-107页
  10.1 结论第101-103页
  10.2 讨论第103-107页
参考文献第107-116页
作者简介第116-117页
致谢第117-118页

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