论文目录 | |
| 致谢 | 第1-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 摘要 | 第11-14页 |
| 1 真菌热激蛋白家族、钙离子ATP激酶家族、磷酸化酶Cdc14及腺苷酸环化酶的研究现状 | 第14-29页 |
| 1.1 生防真菌的胁迫应答机制 | 第14-18页 |
| 1.1.1 抗氧化 | 第14-15页 |
| 1.1.2 耐紫外辐射 | 第15-16页 |
| 1.1.3 耐高温胁迫 | 第16-17页 |
| 1.1.4 耐化学农药 | 第17-18页 |
| 1.1.5 其它抗逆机制 | 第18页 |
| 1.2 热激蛋白概述及其对生防真菌的意义 | 第18-25页 |
| 1.2.1 HSP主要特征 | 第19页 |
| 1.2.2 HSP家族成员的结构与分类 | 第19-21页 |
| 1.2.3 HSP家族成员的生物学功能 | 第21-23页 |
| 1.2.4 HSP家族的基因表达及调控 | 第23-25页 |
| 1.2.5 HSP家族蛋白对害虫生防真菌的意义 | 第25页 |
| 1.3 钙离子ATP激酶概述及其抗逆生物学功能 | 第25-27页 |
| 1.3.1 P型钙离子ATP激酶的定位与分类 | 第26-27页 |
| 1.3.2 P型钙离子ATP激酶的生物学功能 | 第27页 |
| 1.4 磷酸化酶Cdc14及腺苷酸环化酶的概述 | 第27-28页 |
| 1.5 展望 | 第28-29页 |
| 2 球孢白僵菌热激蛋白家族的功能解析及表达调控 | 第29-71页 |
| 2.1 材料 | 第30页 |
| 2.1.1 菌株及培养条件 | 第30页 |
| 2.1.2 试剂及试剂盒 | 第30页 |
| 2.2 方法 | 第30-42页 |
| 2.2.1 真菌核酸提取 | 第30-31页 |
| 2.2.2 球孢白僵菌Hsp和Hsf家族的基因克隆与分析 | 第31-32页 |
| 2.2.3 Hsp和Hsf家族单基因敲除/回补菌株的构建 | 第32-33页 |
| 2.2.4 表型分析 | 第33-36页 |
| 2.2.5 细胞外pH值测定 | 第36页 |
| 2.2.6 细胞壁损害程度的观察与测定 | 第36-39页 |
| 2.2.7 细胞内海藻糖、甘露醇及甘油含量的测定 | 第39页 |
| 2.2.8 表型相关基因转录水平的测定 | 第39-40页 |
| 2.2.9 数据统计与分析 | 第40-42页 |
| 2.3 结果与分析 | 第42-66页 |
| 2.3.1 球孢白僵菌Hsp和Hsf家族的构成及基本特征 | 第42-44页 |
| 2.3.2 Hsp和Hsf单基因缺失影响生长、产孢及孢子萌发 | 第44-47页 |
| 2.3.3 Hsp和Hsf单基因缺失影响对不同碳氮源的利用率 | 第47-51页 |
| 2.3.4 Hsp和Hsf单基因缺失影响菌落生长对化学胁迫剂的敏感性 | 第51-55页 |
| 2.3.5 Hsp和Hsf单基因缺失影响分生孢子对化学胁迫剂的敏感性 | 第55-56页 |
| 2.3.6 Hsp和Hsf单基因缺失影响生防潜能 | 第56-58页 |
| 2.3.7 Hsp和Hsf单基因缺失影响细胞壁完整性 | 第58页 |
| 2.3.8 Hsp和Hsf单基因缺失影响细胞内海藻糖、甘露醇及甘油积累水平 | 第58-60页 |
| 2.3.9 Hsp和Hsf单基因缺失影响pH适应性和pH平衡 | 第60-66页 |
| 2.3.10 Hsp和Hsf单基因缺失影响同一家族其它成员的转录表达 | 第66页 |
| 2.4 讨论 | 第66-71页 |
| 2.4.1 球孢白僵菌Hsp和Hsf家族成员对生长的影响 | 第66-67页 |
| 2.4.2 球孢白僵菌Hsp和Hsf家族成员对产孢的影响 | 第67-68页 |
| 2.4.3 球孢白僵菌Hsp和Hsf家族成员对细胞多胁迫应答的影响 | 第68-69页 |
| 2.4.4 球孢白僵菌Hsp和Hsf家族成员与细胞内胁迫保护因子积累的相互关系 | 第69-70页 |
| 2.4.5 球孢白僵菌Hsp和Hsf家族成员之间的相互关系 | 第70-71页 |
| 3 球孢白僵菌P型钙离子ATP激酶Pmr1的功能解析 | 第71-86页 |
| 3.1 材料与方法 | 第72-76页 |
| 3.1.1 菌株及生长条件 | 第72页 |
| 3.1.2 Bbpmr1的基因克隆及序列分析 | 第72页 |
| 3.1.3 Bbpmr1基因的敲除/回补株构建与鉴定 | 第72-73页 |
| 3.1.4 正常培养条件下的生长速率和产孢量测定 | 第73页 |
| 3.1.5 不同营养条件下的菌落生长速率测定 | 第73页 |
| 3.1.6 不同化学胁迫下菌落生长速率测定 | 第73页 |
| 3.1.7 分生孢子对不同化学和环境胁迫的耐受力测定 | 第73-74页 |
| 3.1.8 毒力测定 | 第74页 |
| 3.1.9 表型相关基因的转录表达分析 | 第74页 |
| 3.1.10 数据分析 | 第74-76页 |
| 3.2 结果与分析 | 第76-83页 |
| 3.2.1 Bbpmr1的基本特征 | 第76-77页 |
| 3.2.2 Bbpmr1失活影响菌落生长、产孢及孢子活力 | 第77-79页 |
| 3.2.3 Bbpmr1失活降低不同碳氮源营养的利用效率及耐饥饿能力 | 第79页 |
| 3.2.4 Bbpmr1失活改变对不同金属离子的敏感性 | 第79-80页 |
| 3.2.5 Bbpmr1失活升高对不同类型化学胁迫的敏感性 | 第80-81页 |
| 3.2.6 Bbpmr1失活削弱生防潜能 | 第81页 |
| 3.2.7 Bbpmr1失活改变若干效应基因和信号基因的转录表达 | 第81-83页 |
| 3.3 讨论 | 第83-86页 |
| 4 球孢白僵菌磷酸化酶Cdc14的功能及其信号枢纽作用 | 第86-100页 |
| 4.1 材料与方法 | 第87-91页 |
| 4.1.1 菌株及培养条件 | 第87页 |
| 4.1.2 球孢白僵菌Cdc14基因的克隆及分析 | 第87页 |
| 4.1.3 Cdc14的细胞定位 | 第87页 |
| 4.1.4 Cdc14基因的敲除/回补菌株的构建与鉴定 | 第87-88页 |
| 4.1.5 细胞分裂的观察 | 第88页 |
| 4.1.6 菌落生长速率与分生孢子产量测定 | 第88页 |
| 4.1.7 细胞对不同类型胁迫应答反应的测定 | 第88-89页 |
| 4.1.8 毒力测定 | 第89页 |
| 4.1.9 表型相关基因转录水平测定 | 第89-90页 |
| 4.1.10 Hog1和Slt2的磷酸化水平测定 | 第90-91页 |
| 4.1.11 数据分析 | 第91页 |
| 4.2 结果与分析 | 第91-98页 |
| 4.2.1 球孢白僵菌Cdc14的基本特征 | 第91-92页 |
| 4.2.2 Cdc14失活导致胞质分裂失常和严重产孢缺陷 | 第92-95页 |
| 4.2.3 Cdc14失活降低多胁迫耐受力和生防潜能 | 第95-96页 |
| 4.2.4 Cdc14失活改变若干胁迫响应基因的转录表达 | 第96页 |
| 4.2.5 Cdc14失活改变CWI和HOG信号通路的磷酸化信号 | 第96-98页 |
| 4.3 讨论 | 第98-100页 |
| 5 两种昆虫病原真菌中同源腺苷酸环化酶的功能比较 | 第100-110页 |
| 5.1 材料与方法 | 第100-103页 |
| 5.1.1 菌株与培养条件 | 第100-101页 |
| 5.1.2 BbAC及MrAC的克隆和分析 | 第101页 |
| 5.1.3 BbAC及MrAC的敲除/回补菌株构建与鉴定 | 第101-102页 |
| 5.1.4 生长速率及分生孢子产量测定 | 第102页 |
| 5.1.5 对化学/环境胁迫应答反应的测定 | 第102页 |
| 5.1.6 毒力测定 | 第102页 |
| 5.1.7 数据分析 | 第102-103页 |
| 5.2 结果与分析 | 第103-107页 |
| 5.2.1 BbAC及MrAC的特征及其单基因敲除与回补 | 第103-104页 |
| 5.2.2 BbAC和MrAC失活对生长、产孢及孢子萌发的影响 | 第104-105页 |
| 5.2.3 BbAC与MrAC失活对细胞胁迫应答的影响 | 第105页 |
| 5.2.4 BbAC和MrAC失活对两种真菌生防潜能的影响 | 第105-107页 |
| 5.3 讨论 | 第107-110页 |
| 6 结语 | 第110-111页 |
| 参考文献 | 第111-126页 |
| Summary | 第126-130页 |
| 附件：攻读学位期间的主要成果 | 第130-131页 |
