论文目录 | |
| 致谢 | 第1-11页 |
| 摘要 | 第11-14页 |
| 1 真菌组氨酸激酶家族与细胞周期调控因子的研究现状 | 第14-24页 |
| 1.1 真菌的组氨酸激酶家族 | 第14-20页 |
| 1.1.1 双组分信号传导系统 | 第14-15页 |
| 1.1.2 酵母类真菌组氨酸激酶的类型、结构及功能 | 第15-18页 |
| 1.1.3 丝状真菌组裁酸激酵的类型、结构及功能 | 第18-20页 |
| 1.2 真菌核激酶Wee1和磷酸化酶Cdc25与细胞周期 | 第20-23页 |
| 1.2.1 细胞周期概述 | 第20页 |
| 1.2.2 驱动细胞周期的关键分子 | 第20-22页 |
| 1.2.3 Wee1和Cdc25对Cdk1活性的平衡作用 | 第22-23页 |
| 1.3 展望 | 第23-24页 |
| 2 球孢白僵菌组氨酸激酶家族的功能解析 | 第24-47页 |
| 2.1 材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 菌株及培养条件 | 第25页 |
| 2.1.2 试剂及试剂盒 | 第25-26页 |
| 2.2 方法 | 第26-34页 |
| 2.2.1 真菌核酸提取 | 第26-27页 |
| 2.2.2 球孢白僵菌HK的鉴定及分类 | 第27页 |
| 2.2.3 球孢白僵菌HK的转录动态分析 | 第27-28页 |
| 2.2.4 球孢白僵菌HK基因的敲除/回补菌株的构建与鉴定 | 第28-31页 |
| 2.2.5 表型分析 | 第31-33页 |
| 2.2.6 抗逆相关基因的转录分析 | 第33页 |
| 2.2.7 Hog1和Slt2磷酸化水平的检测 | 第33-34页 |
| 2.2.8 数据处理与分析 | 第34页 |
| 2.3 结果与分析 | 第34-44页 |
| 2.3.1 球孢白僵菌HK家族的结构、分类与转录表达特征 | 第34-36页 |
| 2.3.2 球孢白僵菌8个HK基因突变株的鉴定 | 第36-37页 |
| 2.3.3 HK基因缺失对生长和产孢的影响 | 第37-38页 |
| 2.3.4 HK基因缺失影响细胞对化学胁迫的敏感性 | 第38-40页 |
| 2.3.5 HK基因缺失影响分生孢子对高温和紫外辐射的耐受力 | 第40-41页 |
| 2.3.6 HK3失活改变Hog1和Slt2的磷酸化水平 | 第41页 |
| 2.3.7 HK3失活影响抗氧化酶系基因和转运蛋白基因的转录表达 | 第41页 |
| 2.3.8 HK8失活对表型相关基因的转录表达及HOG信号通路的影响 | 第41-44页 |
| 2.4 讨论 | 第44-47页 |
| 3 球孢白僵菌光敏蛋白Bbphy通过光周期、红光及红外光感应控制生长和无性发育 | 第47-56页 |
| 3.1 材料和方法 | 第47-49页 |
| 3.1.1 菌株、培养基和试剂 | 第48页 |
| 3.1.2 不同营养基质上菌落生长速率测定 | 第48页 |
| 3.1.3 不同光周期下生长速率与分生孢子产量测定 | 第48页 |
| 3.1.4 光敏反应调控无性发育的测定 | 第48页 |
| 3.1.5 产孢相关基因和相关光感受器基因的转录水平测定 | 第48-49页 |
| 3.2 结果与分析 | 第49-55页 |
| 3.2.1 球孢白僵菌Phy(Bbphy)的蛋白序列结构分析 | 第49页 |
| 3.2.2 敲除Bbphy影响营养利用和菌落生长 | 第49-51页 |
| 3.2.3 Bbphy通过感应光周期和光质变化调控分生孢子产量 | 第51-53页 |
| 3.2.4 表型相关基因转录水平的变化 | 第53-55页 |
| 3.3 讨论 | 第55-56页 |
| 4 球孢白僵菌核激酶Wee1和磷酸化酶Cdc25的功能分析 | 第56-76页 |
| 4.1 材料 | 第57页 |
| 4.1.1 菌株及其培养条件 | 第57页 |
| 4.1.2 试剂及试剂盒 | 第57页 |
| 4.2 方法 | 第57-63页 |
| 4.2.1 球孢白僵菌cdk1、wee1和cdc25基因的克隆与鉴定 | 第57页 |
| 4.2.2 球孢白僵菌Cdk1基因的超表达和点突变 | 第57-60页 |
| 4.2.3 wee1和cdc25单基因缺失菌株和回补菌株的构建 | 第60页 |
| 4.2.4 wee1和cdc25的双基因敲除株构建 | 第60页 |
| 4.2.5 Western杂交 | 第60-61页 |
| 4.2.6 表型分析 | 第61-63页 |
| 4.3 实验结果 | 第63-73页 |
| 4.3.1 Cdk1的The~(14)/Tyr~(15)磷酸化改变细胞周期和菌丝隔膜密度 | 第63-64页 |
| 4.3.2 wee1和cdc25的单基因和双基因敲除影响Cdk1的活性 | 第64-66页 |
| 4.3.3 Wee1和Cdc25的基因缺失改变菌丝隔膜形态、细胞大小和周期 | 第66-69页 |
| 4.3.4 Wee1和Cdc25的基因缺失对球孢白僵菌生长和无性发育的影响 | 第69-70页 |
| 4.3.5 Wee1和Cdc25的基因缺失对球孢白僵菌抗逆性状及毒力的影响 | 第70-73页 |
| 4.4 讨论 | 第73-76页 |
| 5 结语 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-85页 |
| Summary | 第85-88页 |
| 附录：博士期间的主要成果 | 第88页 |
