论文目录 | |
致谢 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
第一章 文献综述和研究背景 | 第15-33页 |
1.1 植物与Botrytis cinerea互作机制研究进展 | 第15-19页 |
1.1.1 B.cinerea的侵染机制简介 | 第15页 |
1.1.2 植物细胞壁和角质层对B.cinerea的抗性研究 | 第15-16页 |
1.1.3 植物中ETI和PTI对B.cinerea的抗性研究 | 第16-17页 |
1.1.4 植物细胞坏死调节机制对B.cinerea的抗性研究 | 第17-18页 |
1.1.5 植物中激素调节作用对B.cinerea的抗性研究 | 第18-19页 |
1.2 RING家族E3泛素连接酶研究进展 | 第19-23页 |
1.2.1 泛素化途径简介 | 第19-20页 |
1.2.2 RING家族E3泛素连接酶的结构和特点 | 第20页 |
1.2.3 RING家族E3连接酶在非生物逆境中的作用 | 第20-21页 |
1.2.4 RING家族E3连接酶在抗病性中的作用 | 第21-23页 |
1.3 组蛋白单泛素化途径 | 第23-26页 |
1.3.1 组蛋白泛素化 | 第23页 |
1.3.2 组蛋白单泛素化产生的机制 | 第23-24页 |
1.3.3 组蛋白H2B单泛素化及脱泛素化相关的酶 | 第24-25页 |
1.3.4 组蛋白H2B单泛素化的作用 | 第25页 |
1.3.5 组蛋白H2B单泛素化的调控机制 | 第25-26页 |
1.4 Mediator complex在拟南芥中的研究进展 | 第26-30页 |
1.4.1 Mediator complex结构及特点 | 第26-27页 |
1.4.2 Mediator complex参与植物生长发育过程 | 第27页 |
1.4.3 Mediator complex参与植物对非生物逆境的响应 | 第27-28页 |
1.4.4 Mediator complex参与植物对生物逆境胁迫的响应 | 第28-29页 |
1.4.5 Mediator complex参与植物细胞内的其他生命活动 | 第29-30页 |
1.5 维生素B6研究进展 | 第30-32页 |
1.5.1 维生素B6简介 | 第30页 |
1.5.2 维生素B6合成途径 | 第30页 |
1.5.3 植物中维生素B6合成途径的相关基因 | 第30-31页 |
1.5.4 维生素B6在植物中的作用 | 第31-32页 |
1.6 本研究的目的意义及主要内容 | 第32-33页 |
第二章 材料与方法 | 第33-40页 |
2.1 植物材料和生长条件 | 第33页 |
2.2 植物总RNA的提取 | 第33页 |
2.3 基因克隆鉴定 | 第33-34页 |
2.4 qRT-PCR表达分析 | 第34页 |
2.5 B.cinerea接种处理及病菌生长量测定 | 第34页 |
2.6 B.cinerea接种处理后基因表达分析 | 第34页 |
2.7 外源信号分子诱导处理 | 第34-35页 |
2.8 VIGS试验 | 第35页 |
2.9 活性氧检测 | 第35页 |
2.10 维生素B6含量测定 | 第35-36页 |
2.11 酵母转化试验 | 第36页 |
2.12 酵母互补试验 | 第36页 |
2.13 抗氧化物质检测 | 第36-37页 |
2.14 酵母双杂交试验 | 第37页 |
2.15 原核表达试验 | 第37页 |
2.16 蛋白复性试验 | 第37页 |
2.17 Western blot | 第37-38页 |
2.18 组蛋白单泛素化活性体外测定试验 | 第38页 |
2.19 胼胝体染色试验 | 第38-39页 |
2.20 电镜观察细胞壁 | 第39页 |
2.21 失水率测定 | 第39-40页 |
第三章 组蛋白单泛素化E3连接酶SIHUB1/SIHUB2在番茄对B.cinerea抗性反应中的功能研究 | 第40-57页 |
摘要 | 第40-41页 |
3.1 结果 | 第41-54页 |
3.1.1 番茄组蛋白单泛素化E3连接酶的克隆鉴定 | 第41-42页 |
3.1.2 S1HUB1和S1HUB2具有E3连接酶活性参与组蛋白单泛素化 | 第42-43页 |
3.1.3 SlHUB1和SlHUB2沉默后增加了番茄植株对B.cinerea的敏感性 | 第43-44页 |
3.1.4 SlHUB1和SlHUB2在激素处理或病害接种后的表达谱分析 | 第44-45页 |
3.1.5 S1MED21不参与S1HUB1对B.cinerea的抗性作用 | 第45-47页 |
3.1.6 SlHUB1和SlHUB2沉默后减弱了细胞壁对B.cinerea的抗性作用 | 第47-48页 |
3.1.7 SlHUB1和SlHUB2沉默植株接种B.cinerea后活性氧和胼胝体积累增加 | 第48-51页 |
3.1.8 SlHUB1和SlHUB2沉默后改变了B.cinerea诱导的多种途径基因的表达 | 第51-54页 |
3.2 讨论 | 第54-57页 |
第四章 Mediator complex亚基在番茄对B.cinerea抗性反应中的功能研究 | 第57-71页 |
摘要 | 第57-58页 |
4.1 结果 | 第58-68页 |
4.1.1 番茄mediator complex亚基基因的组分鉴定及其在染色体上的定位 | 第58-59页 |
4.1.2 SlMED基因的表达模式分析 | 第59-61页 |
4.1.3 SlMED基因沉默后导致了番茄植株生长缺陷 | 第61-63页 |
4.1.4 SlMED基因沉默后改变了番茄对B.cinerea的抗性 | 第63-68页 |
4.2 总结讨论 | 第68-71页 |
第五章 维生素B6合成途径在番茄对B.cinerea抗性反应中的功能研究 | 第71-83页 |
摘要 | 第71-72页 |
5.1 结果 | 第72-80页 |
5.1.1 维生素B6合成途径基因的克隆鉴定 | 第72-73页 |
5.1.2 SlPDX1.2和SlPDX1.3基因沉默植株对B.cinerea的抗性下降 | 第73-76页 |
5.1.3 B.cinerea侵染后维生素B6合成基因的表达分析 | 第76页 |
5.1.4 SlPDX1.2和SlPDX1.3沉默后降低了B.cinerea诱导的维生素B6的合成 | 第76-77页 |
5.1.5 SlPDX1.2和SlPDX1.3基因沉默植株在B.cinerea侵染后活性氧增加 | 第77-79页 |
5.1.6 SlPDX1.2和SlPDX1.3基因沉默后减弱了植株中超氧阴离子的清除能力 | 第79页 |
5.1.7 SlPDX1.2和SlPDX1.3沉默植株在B.cinerea侵染后其它抗氧化物质变化 | 第79-80页 |
5.2 讨论 | 第80-83页 |
第六章 全文小结 | 第83-86页 |
6.1 主要结论 | 第83页 |
6.2 创新点 | 第83-84页 |
6.3 展望 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-112页 |
附表 | 第112-118页 |
附表1 第三章实验所用引物列表 | 第112-114页 |
附表2 第四章实验所用引物列表 | 第114-117页 |
附表3 第五章实验所用引物列表 | 第117-118页 |