论文目录 | |
| 摘要 | 第11-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-28页 |
| 第一章 猪链球菌的病原生物学和黏附相关毒力因子 | 第15-22页 |
| 1 生物学特征 | 第15-16页 |
| 2 流行情况 | 第16页 |
| 3 黏附相关毒力因子研究 | 第16-22页 |
| 3.1 DnaK家族蛋白 | 第17-19页 |
| 3.2 其他黏附相关毒力因子 | 第19-22页 |
| 第二章 猪链球菌对宿主细胞的致病机理 | 第22-28页 |
| 1 对上皮细胞的作用 | 第22-23页 |
| 2 对吞噬细胞的作用 | 第23-24页 |
| 3 对树突细胞的作用 | 第24页 |
| 4 对神经组织相关细胞的作用 | 第24-28页 |
| 4.1 对脑血管内皮细胞的作用 | 第24-25页 |
| 4.2 对脉络丛上皮细胞的作用 | 第25-26页 |
| 4.3 对小胶质细胞的作用 | 第26-27页 |
| 4.4 对星型胶质细胞的作用 | 第27-28页 |
| 第二部分 试验研究 | 第28-85页 |
| 第三章 猪链球菌2型分离菌株JX0811生物学特性分析 | 第29-45页 |
| 摘要 | 第29-30页 |
| 1 材料 | 第30页 |
| 1.1 菌株、细胞和培养条件 | 第30页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第30页 |
| 2 方法 | 第30-35页 |
| 2.1 生长试验 | 第30页 |
| 2.2 抗氧化应激试验 | 第30-31页 |
| 2.3 生物被膜试验 | 第31页 |
| 2.4 全菌多抗制备 | 第31-32页 |
| 2.5 细菌在宿主细胞内的存活试验 | 第32-33页 |
| 2.6 细胞黏附试验 | 第33-34页 |
| 2.7 HEp-2细胞细胞因子RT-qPCR | 第34-35页 |
| 2.8 HEp-2细胞NF-KB入核间接免疫荧光 | 第35页 |
| 3 结果 | 第35-43页 |
| 3.1 体外生长特性 | 第35-36页 |
| 3.2 抗氧化应激能力 | 第36-37页 |
| 3.3 生物被膜形成能力 | 第37页 |
| 3.4 抗细胞吞噬能力 | 第37-39页 |
| 3.5 对上皮细胞的黏附能力 | 第39页 |
| 3.6 HEp-2细胞细胞因子表达 | 第39-43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| 第四章 猪链球菌2型DnaK家族蛋白表达与黏附特性比较 | 第45-65页 |
| 摘要 | 第45页 |
| 1 材料 | 第45-46页 |
| 1.1 菌株、细胞和培养条件 | 第45页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第45-46页 |
| 2 方法 | 第46-54页 |
| 2.1 DnaK家族蛋白氨基酸序列分析 | 第46页 |
| 2.2 原核表达 | 第46-50页 |
| 2.3 多克隆抗体的制备 | 第50-51页 |
| 2.4 细菌表面蛋白丰度检测 | 第51-53页 |
| 2.5 黏附拮抗试验 | 第53-54页 |
| 3 结果 | 第54-63页 |
| 3.1 猪链球菌2型黏附相关因子分析 | 第54-55页 |
| 3.2 DnaK家族蛋白的序列分析 | 第55-57页 |
| 3.3 原核表达及抗体制备 | 第57-59页 |
| 3.4 细菌表面DnaK家族蛋白丰度比较 | 第59-62页 |
| 3.5 DnaK家族蛋白多克隆抗体对HA9801菌株的黏附拮抗作用 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-65页 |
| 第五章 猪链球菌2型DnaK家族基因缺失菌株构建及功能分析 | 第65-85页 |
| 搞要 | 第65-66页 |
| 1 材料 | 第66页 |
| 1.1 菌株、细胞、载体和培养条件 | 第66页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第66页 |
| 2 方法 | 第66-72页 |
| 2.1 重组质粒构建及电转 | 第67-68页 |
| 2.2 基因缺失菌株筛选及鉴定 | 第68-71页 |
| 2.3 不同温度下的生长试验 | 第71页 |
| 2.4 对HEp-2细胞黏附试验 | 第71-72页 |
| 2.5 HEp-2细胞细胞因子RT-qPCR | 第72页 |
| 2.6 DnaJ蛋白表面丰度分析 | 第72页 |
| 3 结果 | 第72-81页 |
| 3.1 dnaK基因簇缺失菌株的鉴定 | 第72-76页 |
| 3.2 dnaJ基因突变株生长能力受损 | 第76-77页 |
| 3.3 dnaK基因簇突变株对HEp-2细胞的黏附能力下调 | 第77-79页 |
| 3.4 hrcA-dnaJ基因突变株下调HEp-2细胞IL-8的转录水平 | 第79页 |
| 3.5 热激条件下HA9801菌株DnaJ蛋白表面丰度变化 | 第79-80页 |
| 3.6 热应激提高HA9801菌株的黏附能力 | 第80-81页 |
| 4 讨论 | 第81-85页 |
| 结论 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-95页 |
| 作者简介 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
