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泛素化与类泛素(SUMO)化在甲壳动物免疫反应中的功能

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泛素化与类泛素(SUMO)化在甲壳动物免疫反应中的功能
论文目录
 
摘要第1-9页
Abstract第9-11页
符号说明第11-13页
第一章 泛素化与类泛素(SUMO)化在甲壳动物免疫中的功能第13-37页
一、甲壳动物疾病第13-18页
  1. 研究意义第13-14页
  2. 侵染甲壳动物的主要病原体第14-16页
  3. 白斑综合征病毒研究概况第16-18页
二、泛素化与SUMO化第18-25页
  1. 泛素化与SUMO化途径的组分第18-19页
  2. 泛素化与SUMO化的反应过程第19-22页
  3. 泛素化与SUMO化的功能第22-25页
三、泛素化途径与免疫第25-30页
  1. 酵母中的泛素化第25-26页
  2. 植物中泛素化与免疫反应第26-27页
  3. 无脊椎动物的泛素化与发育和免疫第27-28页
  4. 高等动物泛素化与免疫反应第28-29页
  5. 病原微生物与宿主泛素化系统的相互作用第29-30页
四、病毒感染与宿主SUMO化修饰的关系第30-35页
  1. 病毒蛋白与宿主SUMO化相互作用第32-33页
  2. 病毒利用宿主SUMO化系统修饰自身蛋白第33-35页
五、研究目的和技术路线第35-37页
第二章 对虾泛素结合酶E2(FcUbc)介导的泛素化抑制白斑综合征病毒复制第37-74页
一、引言第37-38页
二、材料和方法第38-52页
  1. 试剂和仪器第38-39页
  2. 实验材料和免疫刺激第39-40页
  3. 菌株、载体和细胞系第40页
  4. RNA提取和DNA合成第40-41页
  5. FcUbc cDNA全长克隆第41-42页
  6. 序列分析第42-43页
  7. FcUbc mRNA水平表达模式第43页
  8. 重组蛋白表达和纯化第43-47页
  9. 多克隆抗体制备第47页
  10. Western blot第47-48页
11.免疫组织化学第48页
12.对虾攻毒死亡率试验第48-49页
13.重组蛋白抗病毒活性试验第49页
  14. 蛋白质pull-down实验第49页
  15. 免疫细胞化学第49-50页
  16. 体外泛素化实验第50页
17.果蝇S2细胞培养、传代、冻存和复苏第50-51页
18 果蝇S2细胞载体构建、转染和病毒感染第51-52页
19 免疫共沉淀检测蛋白相互作用第52页
三、结果第52-71页
  1. FcUbc的cDNA序列克隆与分析第52-55页
  2. FcUbc的组织分布和表达模式第55-56页
3 蛋白的重组表达与纯化第56-58页
  4. FcUbc抗体检测内源蛋白的细胞定位第58-60页
5.重组FcUbc具有抗病毒活性第60-62页
  6. pull-down实验证实FcUbc结合病毒RING结构域蛋白第62-63页
7.突变体mFcUbc丧失抗病毒能力,不能与WRD结合第63-65页
8 注射重组FcUbc能够进入血细胞第65-66页
9 FcUbc体外催化WSSV RING结构域蛋白泛素化第66-67页
  10. S2细胞FcUbc介导WSSV RING结构域蛋白泛素化第67-68页
11.果蝇S2细胞支持WSSV基因复制和蛋白表达第68-70页
  12. FcUbc介导感染S2的WSSV RING蛋白泛素化第70-71页
四、讨论第71-74页
第三章 克氏原螯虾SUMO结合酶E2(PcUbc)介导SUMO化促进白斑结合症病毒复制第74-99页
一、引言第74-75页
二、材料和方法第75-81页
1.试剂和仪器第75页
2.菌株载体第75-76页
  3. 实验材料和免疫刺激第76页
  4. RNA提取和DNA合成第76页
5 FcUbc cDNA全长克隆第76页
  6. 序列分析第76页
7 小龙虾UBC9和SUMO mRNA水平表达模式第76-77页
  8. 重组蛋白表达和纯化第77-78页
  9. 多克隆抗体制备第78页
  10. Western blot第78页
  1.1 注射重组蛋白与攻毒试验第78-79页
  12. 蛋白质pull-down实验第79页
  13. 体外SUMO化实验第79-80页
  14. RNA干扰与攻毒试验第80-81页
三、结果第81-95页
  1. 基因克隆与鉴定第81-83页
  2. 序列分析第83-86页
  3. 组织分布与病毒刺激后表达模式第86-87页
  4. 重组蛋白表达与纯化第87-89页
  5. 注射重组蛋白增强WSSV晚期基因表达第89-91页
6 克氏原螯虾UBC9体外结合WSSV IE蛋白第91-92页
  7. UBC9介导WSV051体外SUMO化修饰第92-93页
  8. 小龙虾UBC9和SUMO的RNA干扰第93页
  9. UBC9或SUMO被干扰的龙虾中WSSV表达被抑制第93-94页
  10. 干扰1}BO)或 SUMO 的小龙奸攻毒后再注射相应的被,干扰細的蛋白,WSSV 基因表达^导到恢M第94-95页
四、讨论第95-99页
总结与创新点第99-100页
参考文献第100-111页
致谢第111-112页
在读期间发表文章第112-113页
学位论文评阅及答辩情况表第113页

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