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酿酒酵母细胞中CdSe量子点合成机理研究

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酿酒酵母细胞中CdSe量子点合成机理研究
论文目录
 
论文创新点第1-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-13页
第1章 绪论第13-53页
  1.1 引言第13-14页
  1.2 纳米材料的生物合成第14-35页
    1.2.1 自然界进化产生的纳米材料生物合成体系第14-19页
      1.2.1.1 硅藻中的生物硅化第15-17页
      1.2.1.2 趋磁细菌中的磁小体第17-19页
    1.2.2 基于噬菌体展示技术的纳米材料合成及自组装体系第19-22页
    1.2.3 利用单一代谢途径实现的活细胞合成纳米材料第22-28页
      1.2.3.1 单一代谢途径实现的贵金属纳米颗粒生物合成第22-25页
      1.2.3.2 单一代谢途径实现的半导体纳米颗粒生物合成第25-28页
    1.2.4 以“时-空耦合策略”为指导的活细胞合成CdSe量子点第28-31页
    1.2.5 不同纳米材料生物合成体系的优势和问题第31-35页
      1.2.5.1 生物矿化的优势和问题第32-33页
      1.2.5.2 基于噬菌体展示技术的纳米材料合成及自组装体系的优势和问题第33-34页
      1.2.5.3 单一代谢途径实现的纳米材料合成体系的优势和问题第34-35页
      1.2.5.4 酿酒酵母细胞合成荧光CdSe量子点的优势和问题第35页
  1.3 酵母细胞合成CdSe量子点机理研究的意义第35-38页
  1.4 酿酒酵母的研究技术第38-42页
    1.4.1 酿酒酵母研究中的基因敲除和修饰技术第38-40页
    1.4.2 酿酒酵母研究中的高通量技术第40-41页
    1.4.3 为酿酒酵母研究服务的生物信息学方法第41-42页
  1.5 本论文的出发点和主要工作第42-43页
参考文献第43-53页
第2章 CdSe量子点生物合成机理研究方法的建立第53-69页
  2.1 引言第53-54页
  2.2 实验部分第54-57页
    2.2.1 实验菌株和培养基第54页
    2.2.2 试剂与仪器第54-55页
    2.2.3 生长曲线的测定第55页
    2.2.4 CdSe量子点的生物合成第55页
    2.2.5 酵母原生质体的制备第55-56页
    2.2.6 细胞内CdSe量子点荧光强度的测定和荧光显微镜观察第56页
    2.2.7 总蛋白含量的测定第56页
    2.2.8 透射电子显微镜和动态光散射表征第56-57页
  2.3 结果和讨论第57-66页
    2.3.1 培养基对CdSe量子点生物合成的影响第57-58页
    2.3.2 酵母生长时期对CdSe量子点生物合成的影响第58-60页
    2.3.3 生物合成合成CdSe量子点的提取和纯化方法第60-66页
      2.3.3.1 细胞裂解方法的优化第60-63页
      2.3.3.2 细胞裂解液中CdSe量子点的分散和稳定第63-65页
      2.3.3.3 优化后的生物合成CdSe量子点的提取和纯化方法第65-66页
  2.4 结论第66-67页
参考文献第67-69页
第3章 细胞内CdSe量子点的稳定化及其生物合成的能量基础第69-94页
  3.1 引言第69页
  3.2 实验部分第69-75页
    3.2.1 实验菌株和培养基第69-70页
    3.2.2 质粒DNA和引物序列第70-71页
    3.2.3 试剂与仪器第71页
    3.2.4 菌株构建第71-72页
    3.2.5 CdSe量子点的生物合成第72-73页
    3.2.6 生物合成CdSe量子点的提取、纯化和表征第73页
    3.2.7 生物合成CdSe量子点的酶处理第73页
    3.2.8 细胞内CdSe量子点荧光强度的测定和荧光显微镜观察第73页
    3.2.9 蛋白质电泳,Western blot和免疫共沉淀实验第73-74页
    3.2.10 硒代氨基酸的检测第74-75页
    3.2.11 细胞内ATP含量的检测第75页
    3.2.12 质谱实验及其生物信息学分析第75页
  3.3 结果和讨论第75-90页
    3.3.1 生物合成CdSe量子点的表征第75-79页
    3.3.2 生物合成CdSe量子点的表面蛋白质组成第79-80页
    3.3.3 核糖体蛋白在CdSe量子点生物合成中的作用第80-84页
    3.3.4 CdSe量子点生物合成中的能量基础第84-85页
    3.3.5 生物能在“时-空耦合策略”中的作用机制第85-90页
  3.4 结论第90页
参考文献第90-94页
第4章 机理导向的细胞内CdSe量子点合成的调控第94-128页
  4.1 引言第94-95页
  4.2 实验部分第95-106页
    4.2.1 实验菌株和培养基第95-96页
    4.2.2 质粒DNA和引物序列第96-98页
    4.2.3 试剂与仪器第98-99页
    4.2.4 菌株构建第99-102页
      4.2.4.1 △gsh1gsh2双敲除菌株的构建第99-101页
      4.2.4.2 过表达菌株的构建第101-102页
    4.2.5 CdSe量子点的生物合成第102页
    4.2.6 细胞内CdSe量子点荧光强度的测定和荧光显微镜观察第102页
    4.2.7 细胞内CdSe量子点的提取和纯化第102页
    4.2.8 酵母细胞CdSe量子点合成产量的测定第102-103页
    4.2.9 酵母总RNA的提取,反转录和芯片实验第103-104页
    4.2.10 荧光定量PCR(qRT-PCR)第104-105页
    4.2.11 谷胱甘肽的检测第105-106页
    4.2.12 硒代氨基酸的检测第106页
    4.2.13 透射电子显微镜、高分辨透射电子显微镜和动态光散射表征第106页
    4.2.14 流式细胞检测第106页
    4.2.15 实验数据分析第106页
  4.3 结果和讨论第106-124页
    4.3.1 CdSe量子点生物合成过程中的基因表达变化第106-107页
    4.3.2 CdSe量子点生物合成产率的代谢基础第107-114页
    4.3.3 谷胱甘肽代谢与“时-空耦合策略”的联系第114-117页
    4.3.4 谷胱甘肽代谢在“时-空耦合策略”中的调控机制第117-118页
    4.3.5 机理导向的胞内CdSe量子点合成的调控第118-124页
  4.4 结论第124页
参考文献第124-128页
研究总结与展望第128-133页
一 研究总结第128-130页
二 展望第130-131页
参考文献第131-133页
附录 攻读博士学位期间的研究成果第133-134页
致谢第134-135页

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