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pH/温度双重敏感性微球的制备、固定化酶及其在蛋白质组学中的应用研究

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pH/温度双重敏感性微球的制备、固定化酶及其在蛋白质组学中的应用研究
论文目录
 
摘要第1-7页
ABSTRACT第7-14页
第一章 绪论第14-37页
  1.1 蛋白质组学研究技术与分析策略第15-18页
    1.1.1 蛋白质组学研究的关键技术第15-16页
    1.1.2 基于质谱的蛋白质组学研究策略第16-18页
  1.2 蛋白质组学酶解技术的发展第18-25页
    1.2.1 固定化酶反应器第18-23页
    1.2.2 酶解辅助技术第23-25页
  1.3 智能敏感性聚合物固定化酶载体第25-31页
    1.3.1 温度响应性智能聚合物载体第25-28页
    1.3.2 pH响应性智能聚合物载体第28-31页
  1.4 基于NIPAM的温度和pH响应性凝胶颗粒的制备第31-35页
    1.4.1 无规共聚型第31-32页
    1.4.2 接枝共聚型第32-33页
    1.4.3 互穿网络型第33-35页
  1.5 本课题的工作意义和研究内容第35-37页
    1.5.1 工作意义第35页
    1.5.2 研究内容第35-37页
第二章 尺寸均一的pH/温度双重敏感性智能微球的制备及性能表征第37-54页
  2.1 引言第37-38页
  2.2 实验部分第38-42页
    2.2.1 实验材料第38页
    2.2.2 实验设备第38-39页
    2.2.3 聚丙烯酸(PAAc)均聚物的制备第39页
    2.2.4 智能敏感性微球的制备第39-40页
    2.2.5 微球的粒径及粒径分布测试第40页
    2.2.6 微球的形貌观察第40-41页
    2.2.7 微球的红外光谱分析第41页
    2.2.8 微球的刺激响应性测定第41-42页
    2.2.9 微球的热分析测试第42页
  2.3 结果与讨论第42-53页
    2.3.1 尺寸均一智能微球制备过程的参数优化第42-44页
    2.3.2 智能微球的化学结构分析第44页
    2.3.3 智能微球的形貌和粒径尺寸第44-46页
    2.3.4 智能微球的热分析第46-47页
    2.3.5 智能微球的刺激响应行为第47-51页
    2.3.6 微球储存稳定性第51-53页
  2.4 本章小结第53-54页
第三章 pH/温度敏感性智能微球制备过程中的结构调控第54-75页
  3.1 引言第54页
  3.2 实验材料与实验设备第54-57页
    3.2.1 实验材料第54-55页
    3.2.2 实验设备第55页
    3.2.3 聚丙烯酸 (PAAc) 均聚物的制备第55页
    3.2.4 Semi-IPN微球的制备第55页
    3.2.5 微球的粒径及粒径分布测试第55页
    3.2.6 微球的形貌观察第55-56页
    3.2.7 微球的红外光谱分析第56页
    3.2.8 微球的Zeta电位测定第56页
    3.2.9 微球的羧基含量的分析第56-57页
    3.2.10 微球的刺激响应性测试第57页
    3.2.11 相分离过程表征第57页
  3.3 结果与讨论第57-73页
    3.3.1 亲水组分对半互穿网络结构智能微球的孔洞结构调控第57-63页
    3.3.2 交联剂用量对智能微球的结构调控第63-73页
  3.4 本章小结第73-75页
第四章 智能载酶微球系统的构建及其性能评价第75-95页
  4.1 引言第75-76页
  4.2 实验部分第76-80页
    4.2.1 实验材料第76页
    4.2.2 实验设备第76页
    4.2.3 智能载酶微球系统的构建第76-77页
    4.2.4 微球的性能表征第77页
    4.2.5 胰蛋白酶固载量和酶活性的测定第77-78页
    4.2.6 动力学参数的计算第78-79页
    4.2.7 FITC标记的载酶微球的考察第79页
    4.2.8 酶的热稳定性和存储稳定性分析第79-80页
  4.3 结果与讨论第80-93页
    4.3.1 智能载酶微球系统制备过程的参数优化第80-83页
    4.3.2 智能载酶微球系统的化学结构分析第83-84页
    4.3.3 智能载酶微球系统的形貌和粒径第84-85页
    4.3.4 智能载酶微球系统的温度响应行为第85-87页
    4.3.5 智能载酶微球系统的pH响应行为第87-88页
    4.3.6 智能载酶微球系统的催化活性第88-90页
    4.3.7 智能载酶微球系统的动力学常数第90-92页
    4.3.8 智能载酶微球系统的热稳定性和存储稳定性第92-93页
  4.4 本章小结第93-95页
第五章 基于智能载酶微球系统的蛋白质组学研究第95-119页
  5.1 引言第95-96页
  5.2 实验部分第96-100页
    5.2.1 实验材料第96页
    5.2.2 实验设备第96-97页
    5.2.3 模型蛋白吸附实验第97页
    5.2.4 蛋白质样品的前处理第97-98页
    5.2.5 蛋白质样品的酶解第98-99页
    5.2.6 质谱分析第99页
    5.2.7 数据处理第99页
    5.2.8 酶解产物的生物信息学分析第99-100页
  5.3 结果与讨论第100-117页
    5.3.1 智能载酶微球对标准蛋白样品的酶解研究第100-106页
    5.3.2 酶解HepG2肝癌细胞提取蛋白混合物第106-111页
    5.3.3 红外辅助技术下复杂蛋白样本的酶解和鉴定以及生物信息学分析第111-117页
  5.4 本章小结第117-119页
第六章 总结与展望第119-122页
  6.1 主要结论第119-120页
  6.2 主要创新点第120-121页
  6.3 今后工作建议第121-122页
附录第122-132页
参考文献第132-145页
攻读博士学位期间发表的学术论文和专利第145-147页
致谢第147-148页

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