论文目录 | |
摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第一章 绪论 | 第14-38页 |
1.1 前言 | 第14页 |
1.2 荧光生物传感器的设计机理 | 第14-18页 |
1.2.1 光诱导电子转移(Photoinduced Electron Transfer, PET) | 第14-15页 |
1.2.2 分子内电荷转移(Intramolecular Charge Transfer, ICT) | 第15-16页 |
1.2.3 荧光共振能量转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer, FRET) | 第16页 |
1.2.4 激发态分子内质子转移(Excited-state Intramolecular Proton Transfer, ESIPT) | 第16-17页 |
1.2.5 激发单体-激基缔合物(Monomer-Excimer) | 第17-18页 |
1.2.6 聚集诱导发光(Aggregation-Induced Emission, AIE) | 第18页 |
1.3 荧光传感器在生物检测中的应用 | 第18-35页 |
1.3.1 荧光传感器在生物酶检测中的应用 | 第18-26页 |
1.3.1.1 乙酰胆碱酯酶(AChE)的检测 | 第19-21页 |
1.3.1.2 γ-谷氨酰转肽酶(GGT)的检测 | 第21-23页 |
1.3.1.3 醌氧化还原酶 1(NQO1)的检测 | 第23-25页 |
1.3.1.4 单胺氧化酶(MAO)的检测 | 第25-26页 |
1.3.2 荧光传感器在生物硫醇检测中的应用 | 第26-35页 |
1.3.2.1 选择性识别半胱氨酸(Cys)的荧光传感器 | 第27-28页 |
1.3.2.2 选择性识别高半胱氨酸(Hcy)的荧光传感器 | 第28-30页 |
1.3.2.3 选择性识别还原型谷胱甘肽(GSH)的荧光传感器 | 第30-32页 |
1.3.2.4 同时区分两种或三种硫醇的荧光传感器 | 第32-35页 |
1.4 本课题的研究背景、意义、内容及创新之处 | 第35-38页 |
第二章 基于ESIPT机理的荧光传感器的制备及其在碱性磷酸酶(ALP)检测中的应用 | 第38-67页 |
2.1 引言 | 第38-39页 |
2.2 实验部分 | 第39-43页 |
2.2.1 原料与试剂 | 第39页 |
2.2.2 传感器合成与制备 | 第39-41页 |
2.2.2.13-羟基黄酮衍生物荧光团(化合物HT-OH)的合成 | 第39-40页 |
2.2.2.23-磷酸二乙酯黄酮衍生物(化合物HT-P)的合成 | 第40页 |
2.2.2.33-磷酸黄酮衍生物(化合物HT-P-OH,探针)的合成 | 第40-41页 |
2.2.3 光谱测试液的配制 | 第41页 |
2.2.4 细胞培养及荧光成像实验 | 第41-42页 |
2.2.5 仪器与表征 | 第42-43页 |
2.3 结果与讨论 | 第43-66页 |
2.3.1 目标化合物的表征 | 第43-47页 |
2.3.1.1 目标化合物HT-OH的1H NMR表征 | 第43页 |
2.3.1.2 目标化合物HT-P的1H NMR、31P NMR和ESI-MS表征 | 第43-45页 |
2.3.1.3 目标化合物HT-P-OH(探针分子)的1H NMR、31P NMR和ESI-MS表征 | 第45-47页 |
2.3.2 探针对碱性磷酸酶(ALP)的光谱测试 | 第47-56页 |
2.3.2.1 检测碱性磷酸酶(ALP)的机理 | 第47-48页 |
2.3.2.2 探针检测ALP的紫外-可见吸收光谱 | 第48页 |
2.3.2.3 探针检测ALP的最佳激发波长的选择 | 第48-50页 |
2.3.2.4 检测体系反应前后的量子产率 | 第50页 |
2.3.2.5 检测体系对碱性磷酸酶的时间响应 | 第50-52页 |
2.3.2.6 检测体系对碱性磷酸酶的定量检测 | 第52-54页 |
2.3.2.7 ALP检测体系的选择性实验 | 第54-56页 |
2.3.3 ALP酶促反应动力学和动力学参数 | 第56-57页 |
2.3.4 检测体系对ALP检测机理的探究 | 第57-58页 |
2.3.5 检测体系对血清中ALP的检测 | 第58页 |
2.3.6 探针对内源性ALP的细胞成像 | 第58-66页 |
2.3.6.1 探针细胞毒性测试实验 | 第58-60页 |
2.3.6.2 探针对细胞内源性ALP荧光成像 | 第60-66页 |
2.4 本章小结 | 第66-67页 |
第三章 基于激发单体-激基缔合物荧光传感体系的设计及其在透明质酸酶检测中的应用 | 第67-96页 |
3.1 引言 | 第67-69页 |
3.2 实验部分 | 第69-73页 |
3.2.1 原料与试剂 | 第69-70页 |
3.2.2 探针分子及其中间产物的合成 | 第70-72页 |
3.2.2.1 中间产物1的合成 | 第70-71页 |
3.2.2.2 中间产物2的合成 | 第71页 |
3.2.2.3 中间产物3的合成 | 第71页 |
3.2.2.4 探针分子N-Py的合成 | 第71-72页 |
3.2.3 测试液的配制 | 第72页 |
3.2.4 实际生物流体中HAase活性的测试 | 第72页 |
3.2.5 仪器与表征 | 第72-73页 |
3.3 结果与讨论 | 第73-95页 |
3.3.1 探针分子N-Py及其中间产物的表征 | 第73-78页 |
3.3.1.1 中间产物1的表征 | 第73-74页 |
3.3.1.2 中间产物2的表征 | 第74-76页 |
3.3.1.3 中间产物3的表征 | 第76-77页 |
3.3.1.4 探针分子N-Py的表征 | 第77-78页 |
3.3.2 检测体系对透明质酸酶的荧光检测 | 第78-88页 |
3.3.2.1 HAase检测体系的配制与优化 | 第78-80页 |
3.3.2.2 HAase检测体系的光稳定性 | 第80-82页 |
3.3.2.3 检测体系对透明质酸酶(HAase)的检测原理 | 第82-83页 |
3.3.2.4 检测体系对透明质酸酶(HAase)的时间响应 | 第83-84页 |
3.3.2.5 检测体系对HAase的定量检测 | 第84-86页 |
3.3.2.6 HAase检测体系的抗干扰性实验 | 第86-87页 |
3.3.2.7 HAase酶促反应动力学和动力学参数测试 | 第87-88页 |
3.3.3 检测体系对HAase检测机理的探究 | 第88-92页 |
3.3.3.1 荧光光谱法对HAase检测机理的探究 | 第88-89页 |
3.3.3.2 红外光谱法对HAase检测机理的探究 | 第89-90页 |
3.3.3.3 红外光谱法对HAase检测机理的探究 | 第90-92页 |
3.3.4 检测体系对尿液中HAase的检测 | 第92-95页 |
3.4 本章小结 | 第95-96页 |
第四章 基于ICT机理的荧光传感体系的设计及其在生物硫醇检测中的应用 | 第96-130页 |
4.1 引言 | 第96-97页 |
4.2 实验部分 | 第97-101页 |
4.2.1 原料与试剂 | 第97-98页 |
4.2.2 探针分子的合成与制备 | 第98-100页 |
4.2.2.1 中间体1的合成 | 第98-99页 |
4.2.2.2 探针前驱体Cy-Cl的合成 | 第99页 |
4.2.2.3 近红外染料NR-OH的合成 | 第99页 |
4.2.2.4 探针分子NR-NBD的合成 | 第99-100页 |
4.2.3 探针测试液的配制 | 第100页 |
4.2.4 细胞培养及荧光成像实验 | 第100页 |
4.2.5 测试仪器与表征手段 | 第100-101页 |
4.3 结果与讨论 | 第101-128页 |
4.3.1 中间产物及探针分子的表征 | 第101-105页 |
4.3.1.1 探针前驱体Cy-Cl的表征 | 第101-102页 |
4.3.1.2 近红外染料NR-OH的表征 | 第102-104页 |
4.3.1.3 探针分子NR-NBD的表征 | 第104-105页 |
4.3.2 探针体系对硫醇检测的光谱测试 | 第105-115页 |
4.3.2.1 探针体系对硫醇检测的示意图 | 第105-106页 |
4.3.2.2 紫外吸收光谱测试 | 第106-108页 |
4.3.2.3 探针体系的荧光响应时间测试 | 第108-109页 |
4.3.2.4 探针体系对GSH和Cys/Hcy检测的荧光光谱 | 第109-112页 |
4.3.2.5 探针体系的选择性和抗干扰性 | 第112-115页 |
4.3.2.6 探针体系的pH适用范围 | 第115页 |
4.3.3 探针体系对GSH和Cys/Hcy检测机理验证 | 第115-122页 |
4.3.4 探针体系的细胞成像测试 | 第122-124页 |
4.3.4.1 探针体系的细胞毒性 | 第122页 |
4.3.4.2 探针体系对细胞内源性生物硫醇的荧光成像 | 第122-124页 |
4.3.5 探针体系在血清中硫醇检测中的应用 | 第124-128页 |
4.4 本章小结 | 第128-130页 |
结论 | 第130-131页 |
参考文献 | 第131-148页 |
攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第148-149页 |
致谢 | 第149-150页 |
附件 | 第150页 |