论文目录 | |
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略语 | 第7-12页 |
| 第1章 前言 | 第12-26页 |
| 1.1 脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其研究进展 | 第12-17页 |
| 1.1.1 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 | 第12页 |
| 1.1.2 脱氧雪腐镰刀菌烯醇的理化性质 | 第12-13页 |
| 1.1.3 脱氧雪腐镰刀菌烯醇的毒性 | 第13-14页 |
| 1.1.4 脱氧雪腐镰刀菌烯醇的污染情况及限量标准 | 第14-15页 |
| 1.1.5 脱氧雪腐镰刀菌烯醇的主要检测方法 | 第15-17页 |
| 1.2 异源分析研究进展 | 第17-19页 |
| 1.2.1 半抗原结构类似物 | 第17-18页 |
| 1.2.2 多肽模拟物 | 第18页 |
| 1.2.3 抗独特型抗体 | 第18-19页 |
| 1.3 纳米抗体研究进展 | 第19-22页 |
| 1.3.1 纳米抗体的结构 | 第19-21页 |
| 1.3.2 纳米抗体的特性 | 第21-22页 |
| 1.3.3 纳米抗体的制备 | 第22页 |
| 1.4 分子模拟 | 第22-24页 |
| 1.4.1 同源建模 | 第22-23页 |
| 1.4.2 分子对接 | 第23-24页 |
| 1.5 主要研究内容和意义 | 第24-26页 |
| 1.5.1 主要研究内容 | 第24页 |
| 1.5.2 主要研究意义 | 第24-26页 |
| 第2章 基于纳米抗体的DON抗原模拟物的淘选与鉴定 | 第26-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 主要材料及试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-30页 |
| 2.2.1 基于纳米抗体的DON抗原模拟物的亲和淘选 | 第27-29页 |
| 2.2.2 基于纳米抗体的DON抗原模拟物的鉴定 | 第29-30页 |
| 2.2.3 序列测定与分析 | 第30页 |
| 2.3 实验结果 | 第30-34页 |
| 2.3.1 基于纳米抗体的DON抗原模拟物的淘选 | 第30-31页 |
| 2.3.2 基于纳米抗体的DON抗原模拟物的鉴定 | 第31-32页 |
| 2.3.3 基于纳米抗体的DON抗原模拟物的序列分析 | 第32-33页 |
| 2.3.4 以DON抗原模拟物建立Phage-ELISA标准曲线 | 第33-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34页 |
| 2.5 小结 | 第34-36页 |
| 第3章 纳米抗体的表达及其在免疫检测中的应用 | 第36-57页 |
| 3.1 实验材料 | 第36-37页 |
| 3.1.1 主要材料及试剂 | 第36-37页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-42页 |
| 3.2.1 质粒的提取 | 第37-38页 |
| 3.2.2 重组表达载体的构建 | 第38页 |
| 3.2.3 重组载体的转化 | 第38-39页 |
| 3.2.4 阳性克隆的鉴定 | 第39页 |
| 3.2.5 纳米抗体的表达 | 第39页 |
| 3.2.6 纳米抗体的纯化 | 第39-40页 |
| 3.2.7 纳米抗体的活性分析 | 第40页 |
| 3.2.8 基于纳米抗体的ELISA的建立 | 第40-42页 |
| 3.3 实验结果 | 第42-55页 |
| 3.3.1 重组表达载体的构建 | 第42-44页 |
| 3.3.2 纳米抗体的表达 | 第44-45页 |
| 3.3.3 纳米抗体活性分析 | 第45-46页 |
| 3.3.4 基于纳米抗体的ELISA的建立 | 第46-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-56页 |
| 3.5 小结 | 第56-57页 |
| 第4章 纳米抗体N-28的分子模拟与定点改造 | 第57-88页 |
| 4.1 实验材料 | 第57-58页 |
| 4.1.1 主要材料及试剂 | 第57页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第57-58页 |
| 4.2 实验方法 | 第58-64页 |
| 4.2.1 Anti-DON ScFv的制备 | 第58-60页 |
| 4.2.2 N-28和anti-DON ScFv的同源建模 | 第60页 |
| 4.2.3 N-28和DON分别与anti-DON ScFv的分子对接 | 第60-61页 |
| 4.2.4 丙氨酸扫描 | 第61-62页 |
| 4.2.5 定点饱和突变 | 第62-63页 |
| 4.2.6 标准曲线的建立 | 第63页 |
| 4.2.7 基于突变子Phage-ELISA的建立 | 第63-64页 |
| 4.3 实验结果 | 第64-84页 |
| 4.3.1 Anti-DON ScFv的制备 | 第64-68页 |
| 4.3.2 N-28和anti-DON ScFv的同源建模 | 第68-70页 |
| 4.3.3 N-28和DON分别与anti-DON ScFv的分子对接 | 第70-72页 |
| 4.3.4 丙氨酸扫描 | 第72-73页 |
| 4.3.5 定点饱和突变 | 第73-76页 |
| 4.3.6 Phage-ELISA标准曲线的建立 | 第76-77页 |
| 4.3.7 基于N-28-T102Y突变子Phage-ELISA的建立 | 第77-83页 |
| 4.3.8 突变子N-28-T102Y的分子模拟 | 第83-84页 |
| 4.4 讨论 | 第84-86页 |
| 4.5 小结 | 第86-88页 |
| 第5章 结论与展望 | 第88-90页 |
| 5.1 结论 | 第88页 |
| 5.2 展望 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-104页 |
| 攻读博士学位期间的研究成果 | 第104页 |
