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以四肽为配基的仿生层析和抗体的分离纯化
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以四肽为配基的仿生层析和抗体的分离纯化
论文目录
 
致谢第1-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-17页
缩略语表第17-19页
第一章 文献综述第19-43页
　　1.1 引言第19-20页
　　1.2 抗体第20-22页
　　1.3 单克隆抗体的分离纯化第22-28页
　　　　1.3.1 层析法第22-26页
　　　　1.3.2 非层析法第26-28页
　　1.4 蛋白A替代配基第28-32页
　　　　1.4.1 亲硫配基第28页
　　　　1.4.2 疏水电荷诱导配基第28-29页
　　　　1.4.3 混合模式配基第29-30页
　　　　1.4.4 仿生配基第30-32页
　　1.5 短肽仿生配基的设计和筛选第32-40页
　　　　1.5.1 组合化学技术第32-34页
　　　　1.5.2 噬菌体展示技术第34-35页
　　　　1.5.3 mRNA展示技术第35-36页
　　　　1.5.4 计算模拟辅助技术第36-40页
　　1.6 本文研究思路第40-43页
第二章 混合模式层析分离抗体第43-71页
　　2.1 引言第43页
　　2.2 材料和方法第43-47页
　　　　2.2.1 试剂与仪器第43-44页
　　　　2.2.2 静态吸附容量测定第44页
　　　　2.2.3 pH梯度洗脱层析第44-45页
　　　　2.2.4 pH阶跃洗脱层析第45页
　　　　2.2.5 盐梯度洗脱层析第45-46页
　　　　2.2.6 高盐上样淋洗层析第46页
　　　　2.2.7 SEC-HPLC分析第46页
　　　　2.2.8 非还原SDS-PAGE分析第46-47页
　　　　2.2.9 ζ电位测定第47页
　　2.3 结果与讨论第47-68页
　　　　2.3.1 pH调控第47-61页
　　　　2.3.2 盐浓度调控第61-68页
　　2.4 本章小结第68-71页
第三章 DAAG配基-抗体相互作用的机制分析第71-97页
　　3.1 引言第71页
　　3.2 计算模拟方法第71-75页
　　　　3.2.1 分子建模第71-73页
　　　　3.2.2 分子对接第73-74页
　　　　3.2.3 分子动力学模拟第74-75页
　　　　3.2.4 相互作用能计算第75页
　　3.3 结果与讨论第75-96页
　　　　3.3.1 混合模式配基与短肽配基的比较分析第75-80页
　　　　3.3.2 DAAG结合位点的确定第80-82页
　　　　3.3.3 DAAG结合机制分析第82-90页
　　　　3.3.4 DAAG解离机制分析第90-94页
　　　　3.3.5 配基作用模式分析第94-96页
　　3.4 本章小结第96-97页
第四章 四肽配基的理性设计与初步评价第97-121页
　　4.1 引言第97-98页
　　4.2 四肽配基库建立与筛选方法第98-99页
　　　　4.2.1 四肽配基库建立第98页
　　　　4.2.2 初步筛选第98-99页
　　　　4.2.3 二次筛选第99页
　　　　4.2.4 相互作用能分析第99页
　　4.3 材料与方法第99-104页
　　　　4.3.1 试剂与仪器第99-100页
　　　　4.3.2 Bestarose 4FF氨基活化和氨基密度测定第100-101页
　　　　4.3.3 短肽偶联和短肽密度测定第101-103页
　　　　4.3.4 吸附等温线测定第103页
　　　　4.3.5 蛋白混合物中分离IgG第103页
　　　　4.3.6 SEC-HPLC分析第103页
　　　　4.3.7 非还原SDS-PAGE分析第103-104页
　　4.4 结果与讨论第104-120页
　　　　4.4.1 四肽配基库的建立第104-106页
　　　　4.4.2 初步筛选——柔性对接第106-107页
　　　　4.4.3 二次筛选——分子动力学模拟第107-109页
　　　　4.4.4 Fc片段与四肽配基的相互作用分析第109-110页
　　　　4.4.5 四肽介质制备第110-115页
　　　　4.4.6 吸附等温线第115-118页
　　　　4.4.7 蛋白混合液中分离hIgG第118-120页
　　4.5 本章小结第120-121页
第五章 新型四肽介质的抗体吸附和分离性能第121-143页
　　5.1 引言第121页
　　5.2 材料与方法第121-125页
　　　　5.2.1 试剂与仪器第121-122页
　　　　5.2.2 Bestarose 4FF氨基活化和氨基密度测定第122页
　　　　5.2.3 四肽偶联和四肽密度测定第122页
　　　　5.2.4 吸附等温线测定第122-123页
　　　　5.2.5 吸附动力学测定第123页
　　　　5.2.6 动态载量测定第123-124页
　　　　5.2.7 牛乳清中分离IgG第124页
　　　　5.2.8 细胞培养上清液中分离单抗第124页
　　　　5.2.9 抗体纯度和收率分析第124-125页
　　　　5.2.10 非还原SDS-PAGE与还原SDS-PAGE分析第125页
　　5.3 结果与讨论第125-140页
　　　　5.3.1 吸附等温线第125-127页
　　　　5.3.2 吸附动力学第127-130页
　　　　5.3.3 10%穿透的动态载量第130-134页
　　　　5.3.4 牛乳清中分离IgG第134-137页
　　　　5.3.5 CHO细胞培养上清液中分离单抗第137-140页
　　5.4 本章小结第140-143页
第六章 总结和展望第143-147页
　　6.1 总结第143-145页
　　6.2 展望第145-147页
参考文献第147-161页
攻读博士学位期间的研究成果第161-162页
作者简介第162页

本篇论文共162页，点击这进入下载页面。
 
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