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发酵乳和豆豉中微生物菌群DGGE分析及益生作用研究

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发酵乳和豆豉中微生物菌群DGGE分析及益生作用研究
论文目录
 
摘要第1-5页
ABSTRACT第5-7页
缩略语索引第7-8页
目录第8-13页
第1章 DGGE技术的发展及在食品领域的应用第13-18页
摘要第13页
  1.1 前言第13-14页
  1.2 DGGE技术的发展和原理第14页
  1.3 DGGE技术条件的选择第14-15页
  1.4 DGGE技术的局限性第15-16页
  1.5 DGGE技术在食品微生物中的应用第16-17页
    1.5.1 DGGE技术在发酵乳制品中的应用第16页
    1.5.2 DGGE技术在发酵肉制品中的应用第16页
    1.5.3 DGGE技术在发酵谷类制品中的应用第16-17页
    1.5.4 DGGE技术在发酵酸蔬菜中的应用第17页
    1.5.5 DGGE技术在其它发酵食品中的应用第17页
  1.6 展望第17-18页
第二章 DGGE MARKER的制备及其在食品微生物监测中的应用第18-35页
摘要第18页
  2.1 前言第18-19页
  2.2 材料与方法第19-27页
    2.2.1 材料第19页
    2.2.2 主要试剂与仪器设备第19页
    2.2.3 相关试剂与培养基的配制第19-21页
      2.2.3.2 培养基成分及制备方法第20-21页
    2.2.4 实验方法第21-27页
      2.2.4.1 菌株的纯培养第21页
      2.2.4.2 Marker的制备第21页
      2.2.4.3 生面团的制备第21-22页
      2.2.4.4 总基因组DNA的提取第22页
      2.2.4.5 总基因组DNA的PCR扩增第22-23页
      2.2.4.6 DGGE分析第23-24页
      2.2.4.7 DGGE胶染色第24页
      2.2.4.8 PCR产物的纯化第24-25页
      2.2.4.9 目的基因与载体pMD18-T的连接第25页
      2.2.4.10 大肠杆菌TOP10感受态细胞的制备第25-26页
      2.2.4.11 转化第26页
      2.2.4.12 菌落PCR验证阳性克隆子第26-27页
      2.2.4.13 测序第27页
      2.2.4.14 16S 或 26S rDNA 序列分析第27页
  2.3 结果与讨论第27-35页
    2.3.1 DGGE marker的制备和验证第27-31页
      2.3.1.1 乳杆菌及双歧杆菌特异性引物和通用引物PCR扩增结果第27-29页
      2.3.1.2 乳杆菌及双歧杆菌特异性引物和通用引物DGGE结果第29-31页
    2.3.2 DGGE marker在酸面团中的应用第31-34页
      2.3.2.1 细菌通用引物DGGE和真菌通用引物DGGE结果第31-33页
      2.3.2.2 酸面团分离菌株测序结果第33-34页
    2.3.3 讨论第34-35页
第三章 VIILI中益生菌的分离鉴定及其益生效果评价第35-53页
摘要第35页
  3.1 前言第35-36页
  3.2 材料与方法第36-38页
    3.2.1 材料第36页
    3.2.2 主要试剂与仪器设备第36页
    3.2.3 相关试剂与培养基的配制第36页
      3.2.3.1 主要试剂的配制第36页
      3.2.3.2 培养基成分及制备方法第36页
    3.2.4 实验方法第36-38页
      3.2.4.1 Viili中细菌的分离纯化第36-37页
      3.2.4.2 分离株的菌落、菌体形态鉴定第37页
      3.2.4.3 分离株的凝乳时间测定第37页
      3.2.4.4 发酵脱脂乳中EPS的提取及浓度测定第37页
      3.2.4.5 小鼠的灌胃第37页
      3.2.4.6 活菌计数第37页
      3.2.4.7 总基因组DNA的提取第37页
      3.2.4.8 总基因组DNA的PCR扩增第37页
      3.2.4.9 DGGE分析第37-38页
      3.2.4.10 测序第38页
  3.3 结果与讨论第38-51页
    3.3.1 Viili中益生菌的分离和鉴定第38-43页
      3.3.1.1 菌落、菌体形态观察第38-39页
      3.3.1.2 乳杆菌特异性引物和通用引物PCR扩增结果第39-40页
      3.3.1.3 乳杆菌特异性引物和通用引物DGGE结果第40-42页
      3.3.1.4 Viili分离菌株测序结果第42页
      3.3.1.5 凝乳时间和发酵脱脂乳中EPS的含量第42-43页
    3.3.2 分离菌株对小鼠肠道菌群的影响第43-46页
      3.3.2.1 活菌计数第43-45页
      3.3.2.2 DGGE第45-46页
    3.3.3 Viili中益生菌对人体肠道微生物菌群影响第46-51页
      3.3.3.1 活菌计数第46-48页
      3.3.3.2 DGGE第48-51页
  3.4 讨论第51-53页
第四章 豆豉中微生物的分离及其益生效果评价第53-80页
摘要第53页
  4.1 前言第53-54页
  4.2 材料与方法第54-59页
    4.2.1 材料第54页
    4.2.2 主要试剂与仪器设备第54页
    4.2.3 相关试剂与培养基的配制第54-55页
      4.2.3.1 主要试剂的配制第54-55页
      4.2.3.2 培养基成分及制备方法第55页
    4.2.4 实验方法第55-59页
      4.2.4.1 样品采集第55页
      4.2.4.4 总基因组DNA的提取第55页
      4.2.4.5 革兰氏染色第55-56页
      4.2.4.6 稻香园豆豉与黑豆样品的预处理第56页
      4.2.4.7 豆豉与黑豆水提取液的制备第56页
      4.2.4.8 豆豉与黑豆中多糖粗品的制备第56-57页
      4.2.4.9 豆豉与黑豆中大豆异黄酮粗品的制备第57页
      4.2.4.10 豆豉与黑豆中大豆皂苷粗品的制备第57页
      4.2.4.11 豆豉与黑豆不同提取物粗品对α-葡萄糖苷酶的抑制作用第57-58页
      4.2.4.12 总基因组DNA的PCR扩增第58-59页
      4.2.4.13 DGGE分析第59页
      4.2.4.14 测序第59页
  4.3 结果与讨论第59-75页
    4.3.0 生产阶段活菌计数结果第59-60页
    4.3.1 生产阶段豆豉菌群多样性变化第60-62页
      4.3.1.1 生产阶段豆豉细菌多样性变化第60-61页
      4.3.1.2 生产阶段豆豉杆菌多样性变化第61-62页
      4.3.1.3 生产阶段豆豉真菌多样性变化第62页
    4.3.2 生产阶段豆豉发酵罐上下层菌群多样性变化第62-67页
      4.3.2.1 生产阶段豆豉发酵罐上下层活菌计数结果第62-63页
      4.3.2.2 生产阶段豆豉发酵罐上下层细菌多样性变化第63-65页
      4.3.2.3 生产阶段豆豉发酵罐上下层杆菌多样性变化第65-66页
      4.3.2.4 生产阶段豆豉发酵罐上下层杆菌多样性变化第66-67页
    4.3.3 商品化豆豉中微生物的检测第67-70页
      4.3.3.1 商品化豆豉中细菌的多样性检测第67-69页
      4.3.3.2 商品化豆豉中杆菌的多样性检测第69页
      4.3.3.3 商品化豆豉中真菌的多样性检测第69-70页
    4.3.4 不同产地豆豉中微生物多样性的比较第70-75页
      4.3.4.1 不同产地豆豉中细菌、杆菌和真菌数量比较第70-72页
      4.3.4.2 不同产地豆豉中细菌多样性比较第72-74页
      4.3.4.3 不同产地豆豉中杆菌多样性比较第74页
      4.3.4.4 不同产地豆豉中真菌多样性比较第74-75页
  4.4 黑豆和豆豉中功能性成分的分析和比较第75-80页
    4.4.1 黑豆、制曲阶段曲种、豆豉及豆豉中主要微生物第75-77页
    4.4.2 黑豆和豆豉中功能性成分对α-葡萄糖苷酶的抑制作用第77-79页
    4.4.5 讨论第79-80页
第五章 结论与建议第80-82页
  5.1 结论第80-81页
    5.1.1 DGGE marker的制备和验证第80页
    5.1.2 DGGE与活菌计数相结合监测各种发酵乳对小鼠肠道中微生物的动态变化第80页
    5.1.3 DGGE与活菌计数相结合监测各种发酵乳对人体肠道中微生物菌群的影响及动态变化第80-81页
    5.1.4 DGGE与活菌计数相结合监测稻香园豆豉在生产阶段中微生物的变化第81页
    5.1.5 DGGE与活菌计数相结合监测国内不同豆豉中微生物的变化第81页
    5.1.6 大豆和豆豉功能性成分对糖尿病的治疗效果第81页
  5.2 建议第81-82页
致谢第82-83页
附录A1 试剂第83-84页
附录A2 仪器设备第84-86页
参考文献第86-93页
陈廷涛简历第93-98页
受教育经历第93页
研究工作经历第93页
参加课题第93-94页
获得奖励和荣誉第94页
留学经历第94页
主要论著第94-97页
专利第97页
会议论文第97-98页

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