论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-49页 |
| 1.1 链霉菌简介 | 第16-18页 |
| 1.2 氨基糖苷类抗生素的分子生物学 | 第18-31页 |
| 1.2.1 抗生素简介 | 第18页 |
| 1.2.2 氨基糖苷类抗生素的生物合成 | 第18-31页 |
| 1.2.2.1 链霉素 | 第19-23页 |
| 1.2.2.2 新霉素 | 第23-26页 |
| 1.2.2.3 卡那霉素 | 第26-27页 |
| 1.2.2.4 阿卡泊糖 | 第27-30页 |
| 1.2.2.5 井冈霉素/有效霉素 | 第30-31页 |
| 1.3 链霉菌次生代谢途径基因表达的调控 | 第31-46页 |
| 1.3.1 途径专一调控基因 | 第31-33页 |
| 1.3.2 双组分信号传导系统 | 第33-42页 |
| 1.3.2.1 AbsA1/A2 | 第36-37页 |
| 1.3.2.2 AfsQ2/Q1 | 第37页 |
| 1.3.2.3 ChiS/R | 第37-38页 |
| 1.3.2.4 CseC/B | 第38页 |
| 1.3.2.5 CutS/R | 第38页 |
| 1.3.2.6 EcrA1/A2 和EcrE1/E2 | 第38-39页 |
| 1.3.2.7 KdpD/E | 第39页 |
| 1.3.2.8 OseA/B | 第39-40页 |
| 1.3.2.9 PhoR/P | 第40页 |
| 1.3.2.10 VanR/S | 第40-42页 |
| 1.3.3 外源性调节因子 | 第42-44页 |
| 1.3.3.1 碳源的影响 | 第42页 |
| 1.3.3.2 氮源的影响 | 第42-43页 |
| 1.3.3.3 磷酸盐的影响 | 第43-44页 |
| 1.3.3.4 微量金属离子的影响 | 第44页 |
| 1.3.4 内源性调节因子 | 第44-46页 |
| 1.4 吸水链霉菌井冈变种5008 研究概况 | 第46-49页 |
| 1.4.1 吸水链霉菌井冈变种5008 简介 | 第46-48页 |
| 1.4.2 吸水链霉菌5008 产生的井冈霉素 | 第48-49页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第49-70页 |
| 2.1 菌株 | 第49-50页 |
| 2.2 质粒 | 第50-53页 |
| 2.3 培养基和化学试剂 | 第53-60页 |
| 2.4 实验方法 | 第60-70页 |
| 第三章 井冈霉素生物合成基因簇功能分析 | 第70-80页 |
| 3.1 前言 | 第70页 |
| 3.2 结果与分析 | 第70-80页 |
| 3.2.1 井冈霉素基因簇的基因及其所编码蛋白的功能 | 第70-76页 |
| 3.2.2 井冈霉素基因簇基因的同源分析 | 第76-80页 |
| 第四章 井冈霉素生物合成相关结构基因功能分析 | 第80-118页 |
| 4.1 前言 | 第80页 |
| 4.2 结果与分析 | 第80-118页 |
| 4.2.1 糖基转移酶基因的功能确定 | 第80-102页 |
| 4.2.1.1 基因置换结构的构建 | 第80-85页 |
| 4.2.1.2 基因置换菌株的获得及验证 | 第85-88页 |
| 4.2.1.3 基因置换菌株的生物学活性测定 | 第88-89页 |
| 4.2.1.4 基因置换菌株发酵产物的高效液相色谱分析 | 第89页 |
| 4.2.1.5 基因置换菌株发酵产物的质谱分析 | 第89-93页 |
| 4.2.1.6 基因置换菌株的回补实验及分析 | 第93-98页 |
| 4.2.1.7 糖基转移酶基因的异源表达 | 第98-102页 |
| 4.2.2 海藻糖合成酶基因的功能确定 | 第102-113页 |
| 4.2.2.1 基因置换结构的构建 | 第102-103页 |
| 4.2.2.2 通过PCR 靶向突变技术valL 基因置换突变株的获得及验证 | 第103-106页 |
| 4.2.2.3 基因置换菌株的生物学活性测定 | 第106页 |
| 4.2.2.4 基因置换菌株发酵产物的高效液相色谱分析 | 第106-107页 |
| 4.2.2.5 基因置换菌株的回补实验及分析 | 第107-113页 |
| 4.2.2.6 海藻糖合成酶基因的异源表达 | 第113页 |
| 4.2.3 转运蛋白基因的功能分析 | 第113-118页 |
| 4.2.3.1 基因置换结构的构建 | 第113页 |
| 4.2.3.2 通过PCR 靶向突变技术valH 基因置换突变株的获得及验证 | 第113-117页 |
| 4.2.3.3 基因置换菌株发酵产物的高效液相色谱分析 | 第117-118页 |
| 第五章 井冈霉素生物合成相关调节基因功能分析 | 第118-155页 |
| 5.1 前言 | 第118页 |
| 5.2 结果与分析 | 第118-155页 |
| 5.2.1 野生型菌株中温度对井冈霉素产量的影响 | 第118-123页 |
| 5.2.1.1 不同温度下发酵产物的高效液相色谱分析 | 第118-120页 |
| 5.2.1.2 转录水平上温度对井冈霉素生物合成影响的分析 | 第120-123页 |
| 5.2.2 双组分调节系统中组氨酸激酶基因valQ 的功能分析 | 第123-134页 |
| 5.2.2.1 基因置换结构的构建 | 第123-124页 |
| 5.2.2.2 通过PCR 靶向突变技术valQ 基因置换突变株的获得及验证 | 第124-127页 |
| 5.2.2.3 组氨酸激酶基因置换菌株发酵产物的高效液相色谱分析 | 第127-128页 |
| 5.2.2.4 valQ 基因置换菌株中温度在转录水平上对基因簇的影响 | 第128-130页 |
| 5.2.2.5 基因置换菌株的回补实验及分析 | 第130-134页 |
| 5.2.3 双组分调节系统中磷酸激酶基因valP 的功能分析 | 第134-144页 |
| 5.2.3.1 通过PCR 靶向突变技术valP 基因置换突变株的获得及验证 | 第134-137页 |
| 5.2.3.2 磷酸激酶基因置换菌株发酵产物的高效液相色谱分析 | 第137-138页 |
| 5.2.3.3 磷酸激酶基因置换菌株中温度在转录水平上对基因簇的影响 | 第138-140页 |
| 5.2.3.4 基因置换菌株的回补实验及分析 | 第140-144页 |
| 5.2.4 双组分调节系统中双基因突变及功能分析 | 第144-155页 |
| 5.2.4.1 通过PCR 靶向突变技术双基因置换突变株的获得及验证 | 第144-147页 |
| 5.2.4.2 双基因置换菌株发酵产物的高效液相色谱分析 | 第147-148页 |
| 5.2.4.3 双基因置换菌株中温度在转录水平上对基因簇的影响 | 第148-149页 |
| 5.2.4.4 双基因置换菌株的回补实验及分析 | 第149-155页 |
| 第六章 总结与展望 | 第155-158页 |
| 参考文献 | 第158-166页 |
| 致谢 | 第166-168页 |
| 攻读学位期间发表的研究论文目录 | 第168-169页 |
| 攻读学位期间所获奖励 | 第169-171页 |
