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酵母系统超量生产代谢中间物和外源基因产物的应用基础研究

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酵母系统超量生产代谢中间物和外源基因产物的应用基础研究
论文目录
 
中文摘要第1-11页
英文摘要第11-15页
前言第15-18页
第一章 文献综述第18-33页
1.1 酵母发酵获得的新产品研究开发第18-19页
1.1.1 食品添加剂第18-19页
1.1.2 香料及风味物质第19页
1.1.3 其他第19页
1.2 利用酵母细胞酶系生产产品第19-21页
1.2.1 生物催化不对称合成第20页
1.2.2 磷酸转移反应第20-21页
1.2.3 其他酶反应第21页
1.3 代谢工程开发酵母产品生产新功能第21-24页
1.3.1 代谢工程原理第21-23页
1.3.2 酵母代谢工程研究及应用第23-24页
1.4 酵母代谢调节生产代谢中间物FDP研究进展第24-28页
1.4.1 FDP药效学和临床药理学第25页
1.4.2 FDP的用途研究第25-26页
1.4.3 FDP生产技术研究第26-28页
1.5 酵母作为外源基因表达系统的研究进展第28-31页
1.5.1 酿酒酵母表达系统第29-30页
1.5.2 非常规酵母表达系统第30-31页
1.5.3 重组酵母发酵第31页
1.6 本论文研究的基本思路第31页
1.7 小结第31-33页
第二章 材料和方法第33-43页
2.1 生物转化合成FDP第33-38页
2.1.1 酵母源及保存第33页
2.1.2 细胞透性化方法第33页
2.1.3 磷酸化反应第33-34页
2.1.4 分析方法第34-38页
2.2 重组酿酒酵母高密度发酵第38-40页
2.2.1 菌种第38-39页
2.2.2 培养基第39页
2.2.3 培养方法第39-40页
2.2.4 测定方法第40页
2.3 重组产朊假丝酵母高密度发酵第40-43页
2.3.1 菌种第40页
2.3.2 培养基第40-41页
2.3.3 培养方法第41-42页
2.3.4 测定方法第42-43页
第三章 游离细胞酶促转化生产FDP反应条件研究第43-54页
3.1 细胞透性化方法选择第43-45页
3.2 酵母种类比较第45-46页
3.3 反应温度对FDP积累的影响第46页
3.4 pH对FDP积累的影响第46页
3.5 糖及碳水化合物对FDP积累的影响第46-49页
3.6 无机磷种类及浓度对FDP积累的影响第49-51页
3.7 影响FDP积累的其它因素第51-53页
3.7.1 FDP积累中对氧的需求第51-52页
3.7.2 金属离子对FDP积累的影响第52-53页
3.8 小结第53-54页
第四章 生物转化合成FDP补料分批操作方式的研究第54-63页
4.1 材料和方法第54-55页
4.1.1 实验材料第54-55页
4.1.2 实验装置第55页
4.1.3 补料分批操作第55页
4.2 结果和讨论第55-62页
4.2.1 FDP的生成第56-57页
4.2.2 代谢中间物的生成第57-58页
4.2.3 辅因子的生成第58-59页
4.2.4 最优反应时间第59-60页
4.2.5 与固定化细胞法的比较第60-62页
4.3 小结第62-63页
第五章 透性酵母细胞糖代谢及FDP积累动力学分析第63-72页
5.1 材料和方法第63-64页
5.1.1 实验方法第63页
5.1.2 代谢途径模型第63-64页
5.2 结果和讨论第64-69页
5.2.1 代谢通量分布分析第64-68页
5.2.2 环境条件对代谢通量分布的影响第68-69页
5.3 小结第69-70页
本章符号说明第70-72页
第六章 FDP分离提纯技术的研究第72-80页
6.1 材料和方法第72-73页
6.1.1 材料和试剂第72页
6.1.2 仪器第72页
6.1.3 分析方法第72-73页
6.1.4 FDP的分离提纯过程第73页
6.2 FDP分离纯化条件研究第73-79页
6.2.1 FDP的稳定性与灭酶条件第73-74页
6.2.2 除无机磷及回收FDP第74-76页
6.2.3 FDPZn_2的洗涤第76页
6.2.4 FDPZn_2的解离第76-77页
6.2.5 FDPHNa_3的结晶及干燥第77-78页
6.2.6 分离产物分析第78-79页
6.3 小结第79-80页
第七章 重组酿酒酵母生产外源α-淀粉酶培养条件研究第80-86页
7.1 材料和方法第80页
7.2 结果与讨论第80-84页
7.2.1 分泌表达的基本条件第80-81页
7.2.2 分段培养及诱导时刻第81-82页
7.2.3 天然氮源的选择第82页
7.2.4 碳氮比第82-84页
7.2.5 溶解氧第84页
7.3 小结第84-86页
第八章 提高重组酵母外源蛋白质产量的替代碳源流加培养方案第86-93页
8.1 材料和方法第86页
8.2 结果与讨论第86-90页
8.2.1 诱导期碳源第86-89页
8.2.2 流加乳酸培养工艺第89-90页
8.3 重组酵母培养的动力学模拟第90-92页
8.4 小结第92页
本章符号说明第92-93页
第九章 营养物震荡高密度培养提高重组酵母质粒稳定性和外源蛋白质产量第93-100页
9.1 材料和方法第93页
9.2 结果与讨论第93-98页
9.2.1 培养过程中质粒不稳定性分析第94-96页
9.2.2 营养物震荡稳定质粒的效果第96-97页
9.2.3 营养物震荡高密度培养第97-98页
9.3 小结第98-100页
第十章 重组酵母Candida utilis高密度培养生产甜味蛋白质莫内林的研究第100-108页
10.1 材料和方法第100页
10.2 结果与讨论第100-107页
10.2.1 菌体得率第100-102页
10.2.2 高密度增殖的抑制因子第102-104页
10.2.3 钠、钾离子对氧摄取的影响第104-106页
10.2.4 改进流加培养基组成第106-107页
10.3 小结第107-108页
结论第108-111页
参考文献第111-123页
致谢第123-124页
附录 攻读学位期间发表论文一览第124-125页

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