论文目录 | |
摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-25页 |
1.1 丹参概述 | 第14页 |
1.1.1 丹参的形态特征 | 第14页 |
1.1.2 丹参的化学成分 | 第14页 |
1.1.3 丹参的药理作用研究 | 第14页 |
1.2 丹参酚酸类成分生源途径与调控研究 | 第14-18页 |
1.2.1 酚酸类成分生源途径研究进展 | 第14-16页 |
1.2.2 丹参酚酸类成分合成调控的研究进展 | 第16-18页 |
1.3 逆境对丹参生长发育及酚酸类物质积累的影响 | 第18-19页 |
1.4 ABA在生物胁迫中所起作用 | 第19-23页 |
1.4.1 SnRK2s蛋白激酶的研究进展 | 第20-22页 |
1.4.2 AREB/ABFs转录因子的研究进展 | 第22-23页 |
1.5 本研究的目的意义 | 第23-25页 |
第二章 丹参SmSnRK2.4 基因的克隆和分析 | 第25-46页 |
2.1 材料 | 第25-30页 |
2.1.1 植物材料 | 第25页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第25页 |
2.1.3 工具酶及主要试剂盒 | 第25页 |
2.1.4 主要仪器 | 第25-26页 |
2.1.5 主要试剂和培养基的配制 | 第26-29页 |
2.1.6 引物 | 第29-30页 |
2.2 方法 | 第30-36页 |
2.2.1 植物材料获得方法 | 第30页 |
2.2.2 核酸分子操作方法 | 第30-33页 |
2.2.3 生物信息学分析 | 第33页 |
2.2.4 原核表达分析 | 第33-36页 |
2.2.5 基因启动子序列分析 | 第36页 |
2.3 结果与分析 | 第36-44页 |
2.3.1 SmSnRK2.4 基因全长cDNA和基因组DNA序列的获得 | 第36-37页 |
2.3.2 SmSnRK2.4 基因的生物信息学分析 | 第37-42页 |
2.3.3 SmSnRK2.4 蛋白的原核表达 | 第42页 |
2.3.4 SmSnRK2.4 启动子分析 | 第42-43页 |
2.3.5 SmSnRK2.4 的表达分析 | 第43-44页 |
2.4 讨论和小结 | 第44-46页 |
第三章 丹参SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 基因的克隆和功能分析 | 第46-82页 |
3.1 材料 | 第46-50页 |
3.1.1 植物材料 | 第46页 |
3.1.2 菌株和载体 | 第46-47页 |
3.1.3 主要仪器 | 第47页 |
3.1.4 常用酶和试剂 | 第47-50页 |
3.1.5 引物 | 第50页 |
3.2 方法 | 第50-62页 |
3.2.1 植物材料获得方法 | 第50-51页 |
3.2.2 核酸分子操作方法 | 第51页 |
3.2.3 生物信息学分析 | 第51-52页 |
3.2.4 亚细胞定位分析 | 第52-54页 |
3.2.5 原核表达分析 | 第54-57页 |
3.2.6 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 蛋白的LC-MS/MS分析 | 第57页 |
3.2.7 基因启动子的克隆及分析 | 第57-60页 |
3.2.8 基因过表达分析 | 第60-62页 |
3.3 结果与分析 | 第62-79页 |
3.3.1 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 基因cDNA和DNA序列的获得 | 第62-63页 |
3.3.2 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 基因的生物信息学分析 | 第63-70页 |
3.3.3 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 基因在丹参中的表达特性 | 第70-72页 |
3.3.4 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 蛋白的亚细胞定位 | 第72页 |
3.3.5 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 基因的原核表达分析 | 第72-75页 |
3.3.6 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 蛋白的LC-MS/MS分析 | 第75页 |
3.3.7 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 基因的启动子分析 | 第75-77页 |
3.3.8 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 基因的过表达分析 | 第77-79页 |
3.4 讨论与小结 | 第79-82页 |
3.4.1 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 属于第III亚族SnRK2s蛋白激酶 | 第79-80页 |
3.4.2 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 的亚细胞定位分析 | 第80页 |
3.4.3 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 参与ABA和渗透胁迫响应 | 第80-81页 |
3.4.4 SmSnRK2.3 和SmSnRK2.6 对丹参酚酸类物质积累的影响 | 第81-82页 |
第四章 丹参SmAREB1基因的克隆和功能分析 | 第82-98页 |
4.1 材料 | 第82-83页 |
4.1.1 植物材料 | 第82页 |
4.1.2 菌株和载体 | 第82页 |
4.1.3 主要仪器 | 第82页 |
4.1.4 常用酶和试剂 | 第82-83页 |
4.1.5 引物 | 第83页 |
4.2 方法 | 第83-86页 |
4.2.1 植物材料获得方法 | 第83页 |
4.2.2 核酸分子操作方法 | 第83-84页 |
4.2.3 生物信息学分析 | 第84页 |
4.2.4 转录激活实验分析 | 第84-85页 |
4.2.5 亚细胞定位分析 | 第85-86页 |
4.2.6 原核表达分析 | 第86页 |
4.2.7 基因的启动子克隆及分析 | 第86页 |
4.2.8 基因过表达分析 | 第86页 |
4.3 结果与分析 | 第86-96页 |
4.3.1 SmAREB1基因的克隆和生物信息学分析 | 第86-90页 |
4.3.2 SmAREB1基因在丹参中的表达特性 | 第90-91页 |
4.3.3 SmAREB1基因的亚细胞定位分析 | 第91页 |
4.3.4 SmAREB1转录因子的转录激活活性验证 | 第91-92页 |
4.3.5 SmAREB1基因的原核表达分析 | 第92-93页 |
4.3.6 SmAREB1基因启动子的序列分析及活性分析 | 第93-95页 |
4.3.7 SmAREB1基因的过表达分析 | 第95-96页 |
4.4 讨论与小结 | 第96-98页 |
4.4.1 SmAREB1是典型的bZIP转录因子 | 第96-97页 |
4.4.2 SmAREB1可能参与对ABA和非生物胁迫响应 | 第97页 |
4.4.3 SmAREB1促进了丹参酚酸类物质合成的积累 | 第97-98页 |
第五章 丹参SmSnRK2.3/2.6 蛋白与SmAREB1蛋白互作关系的分析 | 第98-104页 |
5.1 材料 | 第98-99页 |
5.1.1 植物材料 | 第98页 |
5.1.2 菌株和载体 | 第98页 |
5.1.3 主要设备 | 第98页 |
5.1.4 常用酶和试剂 | 第98-99页 |
5.1.5 引物 | 第99页 |
5.2 实验方法 | 第99-101页 |
5.2.1 烟草植株的获得 | 第99页 |
5.2.2 酵母双杂交(Y2H)实验分析 | 第99-100页 |
5.2.3 双分子荧光互补(BiFC)分析 | 第100-101页 |
5.3 结果和分析 | 第101-102页 |
5.3.1 Y2H实验结果 | 第101页 |
5.3.2 BiFc实验 | 第101-102页 |
5.4 讨论与小结 | 第102-104页 |
第六章 结论与讨论 | 第104-107页 |
创新点 | 第107页 |
研究展望 | 第107-108页 |
参考文献 | 第108-118页 |
附录 | 第118-121页 |
致谢 | 第121-123页 |
作者简介 | 第123页 |