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基于转录组和miRNAs分析中华绒螯蟹促雄腺的相关基因及其调控机制
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基于转录组和miRNAs分析中华绒螯蟹促雄腺的相关基因及其调控机制
论文目录
符号说明
第1-10页
中文摘要
第10-12页
Abstract
第12-15页
1 前言
第15-34页
1.1 甲壳类动物的性别决定
第16-20页
1.1.1 遗传型性别决定
第17-18页
1.1.2 多基因型性别决定
第18-19页
1.1.3 环境因素对性别决定的影响
第19-20页
1.1.4 胞质因子对性别决定的影响
第20页
1.2 甲壳类动物的性别分化
第20-22页
1.2.1 端足目的性别分化
第21页
1.2.2 十足目的性别分化
第21-22页
1.3 促雄腺在性别分化中的作用
第22-26页
1.3.1 促雄腺的发现
第22-23页
1.3.2 促雄腺在雄性性别分化中的作用
第23-24页
1.3.3 胰岛素样促雄腺激素
第24-25页
1.3.4 胰岛素样促雄腺激素的分离
第25页
1.3.5 Mr-IAG基因沉默
第25-26页
1.4 甲壳动物的生殖发育调控
第26-32页
1.4.1 甲壳动物的生殖系统
第26-27页
1.4.2 神经肽的对甲壳动物的生殖调控
第27-29页
1.4.3 促雄腺激素对雄性甲壳动物的生殖调控
第29-30页
1.4.4 神经递质对生殖的调控
第30-31页
1.4.5 阿片肽对甲壳动物的生殖调控
第31-32页
1.4.6 MF对甲壳动物的生殖调控
第32页
1.5 主要研究内容与技术路线
第32-33页
1.6 论文研究的目的和意义
第33-34页
2 材料与方法
第34-51页
2.1 试验材料
第34-37页
2.1.1 试验动物
第34页
2.1.2 试剂和仪器
第34-37页
2.2 试验方法
第37-51页
2.2.1 总RNA的提取及质量检测
第37页
2.2.2 cDNA文库制备与测序
第37页
2.2.3 表达量注释分析
第37-38页
2.2.4 差异表达分析
第38-39页
2.2.5 实时定量PCR验证
第39-40页
2.2.6 Es-IAG片段的3'RACE扩增
第40-41页
2.2.7 Es-IAG片段的5'RACE扩增
第41-42页
2.2.8 PCR产物胶回收
第42页
2.2.9 连接T载体
第42页
2.2.10 转化感受态细胞及阳性克隆筛选
第42-43页
2.2.11 Es-IAG基因的生物信息学分析
第43页
2.2.12 荧光定量PCR
第43-44页
2.2.13 不同发育时期Es-IAG表达分析
第44页
2.2.14 SiRNA体内干扰Es-IAG实验
第44-45页
2.2.15 干扰结果分析
第45页
2.2.16 总RNA的质量检测
第45页
2.2.17 small RNA cDNA文库构建及测序
第45-47页
2.2.18 smallRNA测序原始数据分析
第47-48页
2.2.19 鉴定miRNA
第48-49页
2.2.20 miRNA差异表达
第49页
2.2.21 miRNA靶基因预测
第49页
2.2.22 miRNA靶基因GO分析
第49-50页
2.2.23 miRNA靶基因KEGG Pathway分析
第50页
2.2.24 以Es-IAG为靶基因的miRNA分析
第50-51页
3 结果与分析
第51-76页
3.1 中华绒螯蟹比较转录组分析结果
第51-58页
3.1.1 序列聚类
第51页
3.1.2 序列功能注释
第51-53页
3.1.3 差异表达分析
第53-55页
3.1.4 性别发育相关基因筛选
第55页
3.1.5 调控通路分析
第55-58页
3.1.6 测序结果验证
第58页
3.2 Es-IAG基因的克隆、表达及干扰结果
第58-67页
3.2.1 Es-IAG基因特征分析
第58-60页
3.2.2 Es-IAG氨基酸序列分析
第60-62页
3.2.3 IAG氨基酸序列的系统进化分析
第62-64页
3.2.4 中华绒螯蟹不同发育阶段Es-IAG的表达分析
第64-65页
3.2.5 siRNA干扰结果
第65-67页
3.3 中华绒螯蟹small RNA分析结果
第67-76页
3.3.1 测序质量评估
第67-68页
3.3.2 数据质量及长度分布
第68-69页
3.3.3 基因组比对
第69-70页
3.3.4 已知miRNA比对
第70页
3.3.5 small RNA分类注释
第70-71页
3.3.6 新miRNA预测
第71页
3.3.7 已知miRNA和新miRNA的靶基因预测
第71-72页
3.3.8 miRNA差异表达分析
第72页
3.3.9 靶基因分析
第72-73页
3.3.10 靶基因GO分析与通路分析
第73-75页
3.3.11 miRNA筛选
第75-76页
4 讨论
第76-85页
4.1 差异表达基因及相关通路分析
第77-82页
4.1.1 核糖体通路分析
第77页
4.1.2 性别分化相关基因分析
第77-79页
4.1.3 精子发生相关差异表达基因
第79-80页
4.1.4 胰岛素信号通路分析
第80-81页
4.1.5 具神经活性配体受体相互作用
第81-82页
4.2 不同发育时期Es-IAG基因分析
第82-84页
4.2.1 Es-IAG基因进化的保守性
第82-83页
4.2.2 中华绒螯蟹性别分化期
第83页
4.2.3 RNAi效率及意义
第83-84页
4.3 性别发育相关miRNA
第84-85页
5 结论
第85-87页
参考文献
第87-99页
致谢
第99页
本篇论文共
99
页,
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。
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