论文目录 | |
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-15页 |
| 前言 | 第15-16页 |
| 文献综述 | 第16-28页 |
| 第一章 非编码RNA研究进展 | 第16-28页 |
| 1.1 miRNAs的研究进展 | 第16-21页 |
| 1.1.1 miRNAs的来源与形成机制 | 第16-17页 |
| 1.1.2 miRNAs的作用机制 | 第17-18页 |
| 1.1.3 miRNAs靶基因的筛选与鉴定 | 第18-19页 |
| 1.1.4 miRNAs在肌肉发育中的作用 | 第19-20页 |
| 1.1.5 miRNAs在牛上的研究现状 | 第20-21页 |
| 1.1.6 miRNAs与环状RNA的调控关系 | 第21页 |
| 1.2 环状RNA的研究进展 | 第21-27页 |
| 1.2.1 环状RNA的发现 | 第21-22页 |
| 1.2.2 环状RNA的产生及分子特征 | 第22-23页 |
| 1.2.3 环状RNA的分类 | 第23页 |
| 1.2.4 环状RNA的功能与作用机制 | 第23-26页 |
| 1.2.5 环状RNA的研究现状 | 第26-27页 |
| 1.2.6 环状RNA在肌肉发育中的作用 | 第27页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 试验研究 | 第28-87页 |
| 第二章 牛肌肉发育相关miR-378a-3p通过靶基因HDAC4调控肌细胞增殖、分化及凋亡 | 第28-46页 |
| 2.1 材料与方法 | 第28-34页 |
| 2.1.1 样品采集 | 第28页 |
| 2.1.2 牛肌肉原代细胞分离培养 | 第28-29页 |
| 2.1.3 载体的构建 | 第29页 |
| 2.1.4 细胞增殖试验 | 第29-30页 |
| 2.1.5 细胞凋亡试验 | 第30-31页 |
| 2.1.6 细胞免疫荧光试验 | 第31页 |
| 2.1.7 靶基因预测及双荧光素酶活性分析 | 第31页 |
| 2.1.8 RNA提取、cDNA合成及qRT-PCR | 第31-33页 |
| 2.1.9 蛋白提取及免疫印记试验（Western blot） | 第33页 |
| 2.1.10 统计分析 | 第33-34页 |
| 2.2 结果与分析 | 第34-44页 |
| 2.2.1 miR-378a-3p筛选及其在不同组织中表达分析 | 第34-35页 |
| 2.2.2 miR-378a-3p抑制细胞增殖 | 第35-37页 |
| 2.2.3 miR-378a-3p促进细胞分化 | 第37-39页 |
| 2.2.4 miR-378a-3p促进细胞凋亡 | 第39-41页 |
| 2.2.5 双荧光素酶报告系统验证miR-378a-3p与HDAC4基因靶向关系 | 第41-42页 |
| 2.2.6 干扰HDAC4基因抑制细胞增殖，促进细胞分化及凋亡 | 第42-44页 |
| 2.3 讨论 | 第44-45页 |
| 2.4 小结 | 第45-46页 |
| 第三章 牛肌肉发育相关miR-107 通过靶基因Wnt3a调控肌细胞增殖、分化及凋亡 | 第46-59页 |
| 3.1 材料与方法 | 第46-48页 |
| 3.1.1 牛肌肉原代细胞分离培养 | 第46页 |
| 3.1.2 miR-107 相关载体的构建 | 第46-47页 |
| 3.1.3 细胞增殖、凋亡检测试验 | 第47页 |
| 3.1.4 细胞免疫荧光试验 | 第47页 |
| 3.1.5 靶基因预测及双荧光素酶活性分析 | 第47页 |
| 3.1.6 RNA提取、cDNA合成及qRT-PCR | 第47-48页 |
| 3.1.7 蛋白印记试验（Western blot） | 第48页 |
| 3.1.8 统计分析 | 第48页 |
| 3.2 结果与分析 | 第48-56页 |
| 3.2.1 miR-107 筛选及其在不同组织中表达分析 | 第48-49页 |
| 3.2.2 miR-107 抑制肌细胞分化 | 第49-51页 |
| 3.2.3 miR-107 抑制肌细胞增殖 | 第51-52页 |
| 3.2.4 miR-107 抑制肌细胞凋亡 | 第52-54页 |
| 3.2.5 miR-107 靶基因Wnt3a的鉴定 | 第54-55页 |
| 3.2.6 干扰Wnt3a基因抑制细胞增殖、分化及凋亡 | 第55-56页 |
| 3.3 讨论 | 第56-58页 |
| 3.4 小结 | 第58-59页 |
| 第四章 秦川牛肌肉发育相关circRNAs的鉴定 | 第59-75页 |
| 4.1 材料与方法 | 第59-62页 |
| 4.1.1 样品采集 | 第59页 |
| 4.1.2 测序文库构建及高通量测序 | 第59-60页 |
| 4.1.3 circRNA的鉴定及注释 | 第60-61页 |
| 4.1.4 circRNA差异表达分析 | 第61页 |
| 4.1.5 总RNA的提取、cDNA的合成及荧光定量PCR试验 | 第61-62页 |
| 4.2 结果与分析 | 第62-73页 |
| 4.2.1 秦川牛肌肉组织RNA提取和质检 | 第62页 |
| 4.2.2 肌肉组织circRNA高通量测序 | 第62-64页 |
| 4.2.3 circRNAs的特征分析 | 第64-67页 |
| 4.2.4 circRNA表达差异性分析 | 第67-70页 |
| 4.2.5 circRNA qRT-PCR验证 | 第70-73页 |
| 4.3 讨论 | 第73-74页 |
| 4.4 小结 | 第74-75页 |
| 第五章 circRNA调控牛肌肉原代细胞增殖、分化及凋亡的机理研究 | 第75-87页 |
| 5.1 材料与方法 | 第75-77页 |
| 5.1.1 牛肌肉原代细胞分离培养 | 第75页 |
| 5.1.2 circRNA相关载体的构建 | 第75-76页 |
| 5.1.3 细胞增殖、周期及细胞凋亡检测试验 | 第76页 |
| 5.1.4 细胞免疫荧光试验 | 第76页 |
| 5.1.5 双荧光素酶活性分析 | 第76页 |
| 5.1.6 RNA提取、cDNA合成及qRT-PCR | 第76-77页 |
| 5.1.7 蛋白印记试验（Western blot） | 第77页 |
| 5.1.8 统计分析 | 第77页 |
| 5.2 结果与分析 | 第77-85页 |
| 5.2.1 circLMO7在不同组织中表达水平分析 | 第77-78页 |
| 5.2.2 双荧光素酶报告试验 | 第78-79页 |
| 5.2.3 circLMO7促进细胞增殖 | 第79-81页 |
| 5.2.4 circLMO7抑制细胞分化 | 第81-82页 |
| 5.2.5 circLMO7影响细胞凋亡 | 第82-84页 |
| 5.2.6 circLMO7结合miR-378a-3p解除HDAC4抑制作用 | 第84-85页 |
| 5.3 讨论 | 第85-86页 |
| 5.4 小结 | 第86-87页 |
| 结论与创新点 | 第87-88页 |
| 结论 | 第87页 |
| 创新点 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-101页 |
| 附录 | 第101-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 作者简介 | 第114页 |
