论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-26页 |
| 1.1 BPA简介 | 第14页 |
| 1.2 BPA的污染现状 | 第14-16页 |
| 1.2.1 BPA在水体中污染 | 第15页 |
| 1.2.2 BPA的其他污染情况 | 第15-16页 |
| 1.3 BPA的生殖危害 | 第16-21页 |
| 1.3.1 BPA对人类及其他哺乳动物的生殖危害 | 第16-18页 |
| 1.3.2 BPA对鱼类及其他非哺乳动物的生殖危害 | 第18-21页 |
| 1.4 BPA的作用机制 | 第21-22页 |
| 1.4.1 BPA与雌激素受体及其他受体的相互作用 | 第21页 |
| 1.4.2 通过表观遗传学修饰发挥作用 | 第21-22页 |
| 1.4.3 其他作用机制 | 第22页 |
| 1.5 硬骨鱼类的精子发生 | 第22-24页 |
| 1.5.1 精巢结构 | 第22页 |
| 1.5.2 精巢的生精细胞及非生殖细胞 | 第22-23页 |
| 1.5.3 性激素 | 第23页 |
| 1.5.4 精子形态与运动 | 第23-24页 |
| 1.6 选题目的与意义 | 第24-26页 |
| 第二章 BPA对稀有鮈鲫精巢转录组的影响 | 第26-46页 |
| 2.1 材料方法 | 第26-31页 |
| 2.1.1 实验鱼与BPA暴露 | 第26-27页 |
| 2.1.2 样品采集、生物学指标测定、性腺指数（GSI）及组织学检测 | 第27页 |
| 2.1.3 总RNA提取及定量 | 第27页 |
| 2.1.4 cDNA文库的构建、质量检测及高通量测序 | 第27-28页 |
| 2.1.5 RNA-seq数据的生物信息学分析 | 第28-29页 |
| 2.1.6 实时荧光定量PCR（qPCR）验证RNA-Seq数据的可靠性 | 第29-31页 |
| 2.1.7 性激素水平检测 | 第31页 |
| 2.1.8 生物素示踪血睾屏障 | 第31页 |
| 2.1.9 数据分析 | 第31页 |
| 2.2 实验结果 | 第31-42页 |
| 2.2.1 BPA对雄性稀有鮈鲫各项生物学指标、GSI以及组织学影响 | 第31-32页 |
| 2.2.2 总RNA质量检测 | 第32-33页 |
| 2.2.3 转录组数据统计 | 第33页 |
| 2.2.4 BPA处理后差异表达基因（DEG） | 第33-34页 |
| 2.2.5 qPCR验证结果 | 第34页 |
| 2.2.6 GO富集分析结果 | 第34-36页 |
| 2.2.7 KEGG富集分析结果 | 第36-37页 |
| 2.2.8 基因表达聚类分析结果 | 第37-40页 |
| 2.2.9 基因共表达网络分析结果 | 第40页 |
| 2.2.10 BPA对性激素水平的影响 | 第40-41页 |
| 2.2.11 BPA对精巢血睾屏障的影响 | 第41-42页 |
| 2.3 讨论 | 第42-45页 |
| 2.3.1 不同浓度BPA对稀有鮈鲫精巢转录影响的共性 | 第42-44页 |
| 2.3.2 不同浓度BPA对稀有鮈鲫精巢转录影响的特性 | 第44-45页 |
| 2.4 小结 | 第45-46页 |
| 第三章 BPA对稀有鮈鲫精巢性激素合成基因表达的影响及机制 | 第46-67页 |
| 3.1 材料方法 | 第47-51页 |
| 3.1.1 启动子、cDNA克隆及序列分析 | 第47页 |
| 3.1.2 实验鱼与BPA暴露 | 第47-48页 |
| 3.1.3 样品采集、生物学指标、GSI以及精巢组织切片 | 第48-49页 |
| 3.1.4 总RNA提取和反转录 | 第49页 |
| 3.1.5 内参筛选与qPCR | 第49页 |
| 3.1.6 数据分析 | 第49-51页 |
| 3.2 实验结果 | 第51-64页 |
| 3.2.1 性激素合成相关基因启动子克隆分析结果 | 第51-57页 |
| 3.2.2 nr5as全长cDNA的克隆及序列分析 | 第57-59页 |
| 3.2.3 nr5as在稀有鮈鲫各个组织的分布 | 第59页 |
| 3.2.4 BPA对稀有鮈鲫生物学指标、GSI以及精巢组织学的影响 | 第59-60页 |
| 3.2.5 BPA对稀有鮈鲫精巢vtg基因的影响 | 第60-61页 |
| 3.2.6 BPA对精巢性激素合成相关基因及性激素受体基因表达影响 | 第61-64页 |
| 3.2.7 精巢表达基因的相关性 | 第64页 |
| 3.3 讨论 | 第64-66页 |
| 3.4 小结 | 第66-67页 |
| 第四章 BPA诱导稀有鮈鲫精母细胞凋亡及机制 | 第67-77页 |
| 4.1 材料方法 | 第67-69页 |
| 4.1.1 实验动物及BPA暴露 | 第67页 |
| 4.1.2 样品采集、生物学指标以及性腺指数 | 第67-68页 |
| 4.1.3 组织切片和凋亡TUNEL染色 | 第68页 |
| 4.1.4 透射电镜（TEM） | 第68页 |
| 4.1.5 总RNA提取、反转录及qPCR | 第68页 |
| 4.1.6 蛋白质免疫印记（WB） | 第68页 |
| 4.1.7 数据分析 | 第68-69页 |
| 4.2 实验结果 | 第69-74页 |
| 4.2.1 BPA对稀有鮈鲫生物学指标、GSI以及精巢组织学的影响 | 第69页 |
| 4.2.2 TUNEL检测精巢凋亡结果 | 第69-71页 |
| 4.2.3 精巢生殖细胞凋亡超微结构的观察 | 第71-72页 |
| 4.2.4 BPA对bcl2/bax基因以及Bcl2/Bax蛋白的比值的影响 | 第72页 |
| 4.2.5 BPA对凋亡相关基因表达的影响 | 第72-73页 |
| 4.2.6 BPA对细胞周期相关基因表达的影响 | 第73-74页 |
| 4.3 讨论 | 第74-76页 |
| 4.4 小结 | 第76-77页 |
| 第五章 BPA对稀有鮈鲫精子功能的影响及分子机制 | 第77-94页 |
| 5.1 材料方法 | 第77-81页 |
| 5.1.1 实验动物及BPA暴露 | 第77页 |
| 5.1.2 样品采集、生物学指标以及性腺指数 | 第77-78页 |
| 5.1.3 血清性激素水平检测 | 第78页 |
| 5.1.4 精子密度、活力以及受精能力的检测 | 第78页 |
| 5.1.5 透射电镜与透射电镜 | 第78-79页 |
| 5.1.6 流式细胞 | 第79页 |
| 5.1.7 总RNA提取、反转录及qPCR | 第79页 |
| 5.1.8 WB | 第79页 |
| 5.1.9 免疫组化（IHC） | 第79-80页 |
| 5.1.10 染色质免疫共沉淀（ChIP） | 第80-81页 |
| 5.1.11 数据分析 | 第81页 |
| 5.2 实验结果 | 第81-91页 |
| 5.2.1 BPA对稀有鮈鲫生物学指标、GSI以及精巢组织学的影响 | 第81页 |
| 5.2.2 BPA对血清性激素水平的影响 | 第81-82页 |
| 5.2.3 BPA对精子密度、活力以及受精能力的影响 | 第82-83页 |
| 5.2.4 BPA对精子超微结构的影响 | 第83-85页 |
| 5.2.5 BPA对精子渗透压适应能力的影响 | 第85-87页 |
| 5.2.6 aqps基因的组织分布 | 第87页 |
| 5.2.7 BPA对aqps mRNA及蛋白表达的影响 | 第87-88页 |
| 5.2.8 Aqps蛋白在精巢中的定位以及其在BPA处理下的表达变化 | 第88-90页 |
| 5.2.9 aqps 5’侧翼序列ERE验证以及BPA对其Esr募集的影响 | 第90-91页 |
| 5.3 讨论 | 第91-93页 |
| 5.4 小结 | 第93-94页 |
| 第六章 稀有鮈鲫精巢vtg对BPA的应答机制 | 第94-104页 |
| 6.1 材料方法 | 第94-96页 |
| 6.1.1 实验动物及BPA暴露 | 第94页 |
| 6.1.2 样品采集、生物学指标以及性腺指数 | 第94-95页 |
| 6.1.3 总RNA提取、反转录及qPCR | 第95页 |
| 6.1.4 WB | 第95页 |
| 6.1.5 免疫组化 | 第95页 |
| 6.1.6 ChIP | 第95-96页 |
| 6.1.7 蛋白质免疫共沉淀（CoIP） | 第96页 |
| 6.1.8 血清E2水平检测 | 第96页 |
| 6.1.9 数据分析 | 第96页 |
| 6.2 实验结果 | 第96-102页 |
| 6.2.1 BPA对稀有鮈鲫生物学指标、GSI以及精巢组织学的影响 | 第96页 |
| 6.2.2 vtg mRNA的编码信息及组织分布 | 第96-97页 |
| 6.2.3 精巢Vtg蛋白带型以及分布 | 第97-98页 |
| 6.2.4 BPA对精巢vtg基因表达的影响 | 第98-99页 |
| 6.2.5 Esr在vtg1基因启动子区募集 | 第99页 |
| 6.2.6 BPA对Esr、Hsp90以及Esr-Hsp90复合体的影响 | 第99-100页 |
| 6.2.7 BPA对血清E2水平的影响 | 第100-101页 |
| 6.2.8 BPA对精巢Vtg蛋白水平的影响 | 第101-102页 |
| 6.3 讨论 | 第102-103页 |
| 6.4 小结 | 第103-104页 |
| 结论及创新点 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-125页 |
| 缩略词 | 第125-129页 |
| 附录 | 第129-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
| 作者简介 | 第137-139页 |
