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烟草种间胞质杂种、对称体细胞杂种的获得及其分子标记鉴定

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烟草种间胞质杂种、对称体细胞杂种的获得及其分子标记鉴定
论文目录
 
中文摘要第11-13 页
英文摘要第13-15 页
第一章 植物体细胞杂交研究现状第15-56 页
  1.1 植物体细胞杂交的意义第15 页
  1.2 植物原生质体融合技术第15-17 页
    1.2.1 离子诱导融合技术第16 页
    1.2.2 聚乙二醇(PEG)法第16-17 页
    1.2.3 电融合第17 页
  1.3 植物体细胞杂交方式第17-20 页
    1.3.1 对称融合与不对称体细胞融合第17-19 页
    1.3.2 配子—体细胞杂交第19-20 页
  1.4 植物体细胞杂种的细胞学研究(融合体的发育)第20-22 页
    1.4.1 异核体的核融合和染色体行为第20-21 页
    1.4.2 亲缘关系对融合体发育的影响第21-22 页
  1.5 植物体细胞杂种细胞的筛选技术的研究第22-25 页
    1.5.1 利用对外源激素的要求不同进行选择第22 页
    1.5.2 利用生长习性和愈伤组织颜色不同进行选择第22-23 页
    1.5.3 利用突变细胞系互补进行选择第23-24 页
    1.5.4 根据原生质体形态机械分离杂种原生质体第24-25 页
    1.5.5 外源抗性标记基因的应用第25 页
    1.5.6 钝化系统的应用第25 页
  1.6 植物体细胞杂种的鉴定技术研究第25-31 页
    1.6.1 形态学观察第25-26 页
    1.6.2 染色体数目和核型的检查第26 页
    1.6.3 生物化学检测第26-27 页
    1.6.4 DNA分子标记鉴定第27-31 页
  1.7 植物体细胞杂种的类型及其细胞学特征第31-34 页
    1.7.1 对称杂种(symmetric somatic hybrids)第31-32 页
    1.7.2 不对称杂种(asymmetric somatic hybrids)第32-33 页
    1.7.3 胞质杂种(cytoplasmic hybrid,cybrid)第33-34 页
  1.8 植物体细胞杂种细胞质基因组的遗传第34-37 页
    1.8.1 叶绿体基因组的遗传第34-36 页
    1.8.2 线粒体基因组的遗传第36-37 页
  1.9 植物体细胞杂种后代性状遗传特点与改良利用第37-40 页
    1.9.1 植物体细胞杂种后代性状遗传特征第37-39 页
    1.9.2 植物体细胞杂种的改良利用第39-40 页
  1.10 烟草种间体细胞杂交研究及应用现状第40-46 页
    1.10.1 已获得的烟草体细胞杂种第41-42 页
    1.10.2 烟草种间体细胞杂种的改良和利用第42-44 页
      1.10.2.1 抗病性转移第43 页
      1.10.2.2 抗虫性转移第43-44 页
      1.10.2.3 高尼古丁含量的转移第44 页
      1.10.2.4 烟草新胞质雄性不育系的创造第44 页
    1.10.3 烟草种间体细胞杂交存在的问题第44-46 页
  参考文献第46-56 页
第二章 应用种间体细胞杂交快速创造烟草胞质雄性不育系第56-80 页
  2.1 材料与方法第58-65 页
    2.1.1 材料第58 页
    2.1.2 烟草叶片原生质体的制备第58 页
    2.1.3 Rhodamine 6G钝化处理第58-59 页
    2.1.4 诱导融合及培养第59 页
    2.1.5 再生植株形态学观察第59 页
    2.1.6 染色体数目检测第59-60 页
    2.1.7 同功酶检测第60-62 页
      2.1.7.1 脂酶同工酶分析第60-62 页
      2.1.7.2 过氧化物同工酶分析第62 页
    2.1.8 基因组DNA的RAPD分析第62-64 页
      2.1.8.1 烟草叶片基因组DNA的提取第62-63 页
      2.1.8.2 随机引物扩增的反应条件及电泳第63-64 页
    2.1.9 线粒体atpA基因特异片段的PCR扩增和检测第64-65 页
      2.1.9.1 烟草线粒体DNA的提取第64-65 页
      2.1.9.2 PCR扩增第65 页
    2.1.10 回交与配制F_1杂交一代第65 页
    2.1.11 抗病性鉴定第65 页
  2.2 结果与分析第65-75 页
    2.2.1 烟草叶片原生质体的分离第65-66 页
    2.2.2 Rhodamine 6G处理对烟草原生质体活性的影响第66-67 页
    2.2.3 原生质体融合与培养第67 页
    2.2.4 再生植株的生物学特征第67-70 页
      2.2.4.1 再生植株形态第67-69 页
      2.2.4.2 再生植株的育性第69-70 页
    2.2.5 再生植株体细胞染色体数目第70 页
    2.2.6 再生植株脂酶同工酶和过氧化物同功酶检测第70 页
    2.2.7 RAPD多态性检测结果第70-73 页
    2.2.8 线粒体基因组atpA基因的分析第73 页
    2.2.9 回交F_1代及杂交F_1代的田间表现第73 页
    2.2.10 抗病性第73-75 页
  2.3 结论与讨论第75-78 页
    2.3.1 Rhodamine 6G对烟草原生质体的钝化作用第75-76 页
    2.3.2 胞质杂种的获得第76-77 页
    2.3.3 新胞质雄性不育系的意义第77-78 页
  参考文献第78-80 页
第三章 普通烟草(N.TABACUM)与粉蓝烟草(N.GLAUCA)种间对称体细胞杂种的形态学、细胞学和分子标记技术分析第80-100 页
  3.1 材料与方法第80-85 页
    3.1.1 植物材料第80-81 页
    3.1.2 原生质体分离纯化,融合与植株再生第81 页
    3.1.3 体细胞染色体数目分析第81 页
    3.1.4 核基因组DNA分析(RAPD and SCAR)第81-85 页
      3.1.4.1 烟叶样品DNA提取第81 页
      3.1.4.2 随计引物扩增的PCR反应及电泳第81-82 页
      3.1.4.3 扩增产物的纯化第82 页
      3.1.4.4 多态性扩增产物克隆第82-83 页
      3.1.4.5 大肠杆菌DH5 α感受态细胞制备和转化第83-84 页
      3.1.4.6 大肠杆菌质粒DNA的提取第84-85 页
      3.1.4.7 克隆片段的测序第85 页
    3.1.5 特异引物的设计及PCR反应第85 页
  3.2 结果与分析第85-94 页
    3.2.1 原生质体培养与体细胞杂种植株的再生第85-86 页
    3.2.2 对称体细胞杂种的形态学和育性表现第86 页
    3.2.3 杂种的体细胞染色体数目及其核基因组成分分析第86-94 页
  3.3 讨论第94-97 页
  参考文献第97-100 页
第四章 烟草种间体细胞杂种高世代材料主要农艺性状观察分析和抗病性鉴定第100-111 页
  4.1 材料与方法第101-103 页
    4.1.1 烟草体细胞杂种高世代材料及其来源。第101 页
    4.1.2 田间实验设计第101 页
    4.1.3 田间管理第101-102 页
    4.1.4 抗病性试验第102-103 页
  4.2 结果与分析第103-106 页
    4.2.1 主要生物学性状调查第103 页
    4.2.2 主要农艺性状分析第103-106 页
      4.2.2.1 亩产量第103-104 页
      4.2.2.2 亩产值第104-105 页
      4.2.2.3 均价第105 页
      4.2.2.4 级指第105-106 页
    4.2.3 抗病性鉴定第106 页
  4.3 讨论第106-109 页
  参考文献第109-111 页
附录A SHANGHAI SHANGON随机引物序列第111-112 页
附录B 表目录第112-113 页
附录C 图目录第113 页

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