论文目录 | |
中文摘要 | 第11-13
页 |
英文摘要 | 第13-15
页 |
第一章 植物体细胞杂交研究现状 | 第15-56
页 |
1.1 植物体细胞杂交的意义 | 第15
页 |
1.2 植物原生质体融合技术 | 第15-17
页 |
1.2.1 离子诱导融合技术 | 第16
页 |
1.2.2 聚乙二醇(PEG)法 | 第16-17
页 |
1.2.3 电融合 | 第17
页 |
1.3 植物体细胞杂交方式 | 第17-20
页 |
1.3.1 对称融合与不对称体细胞融合 | 第17-19
页 |
1.3.2 配子—体细胞杂交 | 第19-20
页 |
1.4 植物体细胞杂种的细胞学研究(融合体的发育) | 第20-22
页 |
1.4.1 异核体的核融合和染色体行为 | 第20-21
页 |
1.4.2 亲缘关系对融合体发育的影响 | 第21-22
页 |
1.5 植物体细胞杂种细胞的筛选技术的研究 | 第22-25
页 |
1.5.1 利用对外源激素的要求不同进行选择 | 第22
页 |
1.5.2 利用生长习性和愈伤组织颜色不同进行选择 | 第22-23
页 |
1.5.3 利用突变细胞系互补进行选择 | 第23-24
页 |
1.5.4 根据原生质体形态机械分离杂种原生质体 | 第24-25
页 |
1.5.5 外源抗性标记基因的应用 | 第25
页 |
1.5.6 钝化系统的应用 | 第25
页 |
1.6 植物体细胞杂种的鉴定技术研究 | 第25-31
页 |
1.6.1 形态学观察 | 第25-26
页 |
1.6.2 染色体数目和核型的检查 | 第26
页 |
1.6.3 生物化学检测 | 第26-27
页 |
1.6.4 DNA分子标记鉴定 | 第27-31
页 |
1.7 植物体细胞杂种的类型及其细胞学特征 | 第31-34
页 |
1.7.1 对称杂种(symmetric somatic hybrids) | 第31-32
页 |
1.7.2 不对称杂种(asymmetric somatic hybrids) | 第32-33
页 |
1.7.3 胞质杂种(cytoplasmic hybrid,cybrid) | 第33-34
页 |
1.8 植物体细胞杂种细胞质基因组的遗传 | 第34-37
页 |
1.8.1 叶绿体基因组的遗传 | 第34-36
页 |
1.8.2 线粒体基因组的遗传 | 第36-37
页 |
1.9 植物体细胞杂种后代性状遗传特点与改良利用 | 第37-40
页 |
1.9.1 植物体细胞杂种后代性状遗传特征 | 第37-39
页 |
1.9.2 植物体细胞杂种的改良利用 | 第39-40
页 |
1.10 烟草种间体细胞杂交研究及应用现状 | 第40-46
页 |
1.10.1 已获得的烟草体细胞杂种 | 第41-42
页 |
1.10.2 烟草种间体细胞杂种的改良和利用 | 第42-44
页 |
1.10.2.1 抗病性转移 | 第43
页 |
1.10.2.2 抗虫性转移 | 第43-44
页 |
1.10.2.3 高尼古丁含量的转移 | 第44
页 |
1.10.2.4 烟草新胞质雄性不育系的创造 | 第44
页 |
1.10.3 烟草种间体细胞杂交存在的问题 | 第44-46
页 |
参考文献 | 第46-56
页 |
第二章 应用种间体细胞杂交快速创造烟草胞质雄性不育系 | 第56-80
页 |
2.1 材料与方法 | 第58-65
页 |
2.1.1 材料 | 第58
页 |
2.1.2 烟草叶片原生质体的制备 | 第58
页 |
2.1.3 Rhodamine 6G钝化处理 | 第58-59
页 |
2.1.4 诱导融合及培养 | 第59
页 |
2.1.5 再生植株形态学观察 | 第59
页 |
2.1.6 染色体数目检测 | 第59-60
页 |
2.1.7 同功酶检测 | 第60-62
页 |
2.1.7.1 脂酶同工酶分析 | 第60-62
页 |
2.1.7.2 过氧化物同工酶分析 | 第62
页 |
2.1.8 基因组DNA的RAPD分析 | 第62-64
页 |
2.1.8.1 烟草叶片基因组DNA的提取 | 第62-63
页 |
2.1.8.2 随机引物扩增的反应条件及电泳 | 第63-64
页 |
2.1.9 线粒体atpA基因特异片段的PCR扩增和检测 | 第64-65
页 |
2.1.9.1 烟草线粒体DNA的提取 | 第64-65
页 |
2.1.9.2 PCR扩增 | 第65
页 |
2.1.10 回交与配制F_1杂交一代 | 第65
页 |
2.1.11 抗病性鉴定 | 第65
页 |
2.2 结果与分析 | 第65-75
页 |
2.2.1 烟草叶片原生质体的分离 | 第65-66
页 |
2.2.2 Rhodamine 6G处理对烟草原生质体活性的影响 | 第66-67
页 |
2.2.3 原生质体融合与培养 | 第67
页 |
2.2.4 再生植株的生物学特征 | 第67-70
页 |
2.2.4.1 再生植株形态 | 第67-69
页 |
2.2.4.2 再生植株的育性 | 第69-70
页 |
2.2.5 再生植株体细胞染色体数目 | 第70
页 |
2.2.6 再生植株脂酶同工酶和过氧化物同功酶检测 | 第70
页 |
2.2.7 RAPD多态性检测结果 | 第70-73
页 |
2.2.8 线粒体基因组atpA基因的分析 | 第73
页 |
2.2.9 回交F_1代及杂交F_1代的田间表现 | 第73
页 |
2.2.10 抗病性 | 第73-75
页 |
2.3 结论与讨论 | 第75-78
页 |
2.3.1 Rhodamine 6G对烟草原生质体的钝化作用 | 第75-76
页 |
2.3.2 胞质杂种的获得 | 第76-77
页 |
2.3.3 新胞质雄性不育系的意义 | 第77-78
页 |
参考文献 | 第78-80
页 |
第三章 普通烟草(N.TABACUM)与粉蓝烟草(N.GLAUCA)种间对称体细胞杂种的形态学、细胞学和分子标记技术分析 | 第80-100
页 |
3.1 材料与方法 | 第80-85
页 |
3.1.1 植物材料 | 第80-81
页 |
3.1.2 原生质体分离纯化,融合与植株再生 | 第81
页 |
3.1.3 体细胞染色体数目分析 | 第81
页 |
3.1.4 核基因组DNA分析(RAPD and SCAR) | 第81-85
页 |
3.1.4.1 烟叶样品DNA提取 | 第81
页 |
3.1.4.2 随计引物扩增的PCR反应及电泳 | 第81-82
页 |
3.1.4.3 扩增产物的纯化 | 第82
页 |
3.1.4.4 多态性扩增产物克隆 | 第82-83
页 |
3.1.4.5 大肠杆菌DH5 α感受态细胞制备和转化 | 第83-84
页 |
3.1.4.6 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第84-85
页 |
3.1.4.7 克隆片段的测序 | 第85
页 |
3.1.5 特异引物的设计及PCR反应 | 第85
页 |
3.2 结果与分析 | 第85-94
页 |
3.2.1 原生质体培养与体细胞杂种植株的再生 | 第85-86
页 |
3.2.2 对称体细胞杂种的形态学和育性表现 | 第86
页 |
3.2.3 杂种的体细胞染色体数目及其核基因组成分分析 | 第86-94
页 |
3.3 讨论 | 第94-97
页 |
参考文献 | 第97-100
页 |
第四章 烟草种间体细胞杂种高世代材料主要农艺性状观察分析和抗病性鉴定 | 第100-111
页 |
4.1 材料与方法 | 第101-103
页 |
4.1.1 烟草体细胞杂种高世代材料及其来源。 | 第101
页 |
4.1.2 田间实验设计 | 第101
页 |
4.1.3 田间管理 | 第101-102
页 |
4.1.4 抗病性试验 | 第102-103
页 |
4.2 结果与分析 | 第103-106
页 |
4.2.1 主要生物学性状调查 | 第103
页 |
4.2.2 主要农艺性状分析 | 第103-106
页 |
4.2.2.1 亩产量 | 第103-104
页 |
4.2.2.2 亩产值 | 第104-105
页 |
4.2.2.3 均价 | 第105
页 |
4.2.2.4 级指 | 第105-106
页 |
4.2.3 抗病性鉴定 | 第106
页 |
4.3 讨论 | 第106-109
页 |
参考文献 | 第109-111
页 |
附录A SHANGHAI SHANGON随机引物序列 | 第111-112
页 |
附录B 表目录 | 第112-113
页 |
附录C 图目录 | 第113
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