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十足目甲壳动物顶体构架体及精子发生相关蛋白功能研究

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十足目甲壳动物顶体构架体及精子发生相关蛋白功能研究
论文目录
 
致谢第1-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-12页
缩略表第12-17页
第一章 文献综述第17-53页
  1.1 驱动蛋白KIFC1在精子发生过程中功能的研究概况第17-25页
    1.1.1 引言第17-18页
    1.1.2 精子发生第18-21页
      1.1.2.1 哺乳类精子发生第18-19页
      1.1.2.2 甲壳动物精子发生第19-21页
    1.1.3 精子发生中的细胞骨架结构第21-22页
    1.1.4 驱动蛋白在精子发生中的功能第22-25页
  1.2 泛素化与精子发生第25-37页
    1.2.1 泛素化第25-26页
    1.2.2 精子发生第26-27页
    1.2.3 精子发生过程中的泛素化第27-33页
    1.2.4 泛素化在顶体形成中的作用第33-34页
    1.2.5 精子在附睾中成熟过程中的泛素化第34-35页
    1.2.6 泛素化与睾丸癌的关系第35-36页
    1.2.7 结论与展望第36-37页
  1.3 参考文献第37-53页
第二章 十足目游泳亚目秀丽白虾精子形成中的细胞骨架结构及动力学机制第53-98页
  2.1 引言第53-55页
  2.2 实验材料第55-57页
    2.2.1 实验动物第55页
    2.2.2 主要试剂及仪器第55-57页
  2.3 实验方法第57-73页
    2.3.1 秀丽白虾KIFC1基因克隆第57-63页
    2.3.2 cDNA序列、多重比对、进化树构建以及蛋白结构分析第63-64页
    2.3.3 半定量PCR检测基因在各组织中的表达第64页
    2.3.4 原位杂交第64-67页
    2.3.5 原核表达第67-70页
    2.3.6 抗体制作及效价检验第70页
    2.3.7 免疫印迹第70-72页
    2.3.8 免疫荧光第72-73页
  2.4 实验结果第73-90页
    2.4.1 KIFC1序列分析第73-76页
    2.4.2 KIFC1蛋白序列比对和系统进化分析第76-77页
    2.4.3 KIFC1蛋白结构第77-78页
    2.4.4 Kifc1 mRNA在不同组织中的表达第78-79页
    2.4.5 精子形成中Kifc1基因的时空表达模式第79-81页
    2.4.6 秀丽白虾KIFC1蛋白体外表达和蛋白纯化结果第81-82页
    2.4.7 秀丽白虾KIFC1抗体效价检测结果第82页
    2.4.8 秀丽白虾KIFC1蛋白在各组织中的鉴定第82页
    2.4.9 秀丽白虾精子形成中KIFC1在细胞内的转运功能第82-85页
    2.4.10 大鼠精子形成中的微管套结构第85-86页
    2.4.11 KIFC1运输的“货物”第86-90页
  2.5 讨论第90-93页
    2.5.1 顶体构架体与微管套的比较第90-91页
    2.5.2 KIFC1可能参与顶体发生和变形第91-93页
  2.6 本章小结第93页
  2.7 参考文献第93-98页
第三章 中华绒螯蟹精子发生过程中p53基因功能探索第98-126页
  3.1 引言第98-99页
  3.2 实验材料第99-101页
    3.2.1 实验动物第99页
    3.2.2 主要试剂及仪器第99-101页
  3.3 实验方法第101-111页
    3.3.1 中华绒螯蟹精巢p53基因克隆第101-107页
    3.3.2 cDNA序列、多重比对、进化树构建以及蛋白结构分析第107-108页
    3.3.3 半定量PCR检测基因在各组织中的表达第108页
    3.3.4 原位杂交第108-111页
  3.4 结果第111-119页
    3.4.1 P53序列分析第111-112页
    3.4.2 P53蛋白结构第112-113页
    3.4.3 P53蛋白序列比对和进化分析第113-115页
    3.4.4 P53 mRNA在不同组织中的表达第115-116页
    3.4.5 精子发生过程中P53的时空表达第116-119页
  3.5 讨论第119-122页
    3.5.1 p53蛋白的特性描述第120页
    3.5.2 p53 mRNA的组织表达第120页
    3.5.3 P53在保护正常精子发生中的潜在功能,包括引发DNA修复和细胞凋亡第120-122页
    3.5.4 p53在成熟精子中的潜在功能第122页
  3.6 结论第122页
  3.7 参考文献第122-126页
第四章 中华绒螫蟹精子发生过程中PHB介导的线粒体泛素化研究第126-169页
  4.1 引言第126-129页
  4.2 实验材料第129-130页
    4.2.1 实验动物第129页
    4.2.2 主要试剂及仪器第129-130页
  4.3 实验方法第130-142页
    4.3.1 原核表达第130-133页
    4.3.2 抗体制作及效化检验第133-134页
    4.3.3 免疫印迹第134-136页
    4.3.4 免疫荧光第136-137页
    4.3.5 体外转染第137-142页
  4.4 结果第142-159页
    4.4.1 重组载体构建第142-143页
    4.4.2 Pet28a-PHB重组蛋白纯化第143页
    4.4.3 抗体制备-抗体效价以及特异性检测第143页
    4.4.4 中华绒螯蟹PHB蛋白在不同组织中的鉴定第143-144页
    4.4.5 精巢中FK2(多聚泛素标记物)鉴定第144-145页
    4.4.6 PHB在中华绒螯蟹精子形成不同时期的表达情况第145-146页
    4.4.7 PHB与FK2在中华绒螯蟹精子形成不同时期的表达情况第146-148页
    4.4.8 线粒体标记物与FK2在中华绒螯蟹精子发生不同时期的表达情况第148-151页
    4.4.9 线粒体标记物与PHB在细胞中的定位对照第151-152页
    4.4.10 shPHB体外干扰第152-154页
    4.4.11 es-phb基因体外过表达实验第154-155页
    4.4.12 shPHB138干扰后线粒体、PHB泛素化水平检测第155-158页
    4.4.13 ES-PHB蛋白体外过表达对多聚泛素化的影响第158-159页
  4.5 讨论第159-163页
    4.5.1 PHB在甲壳动物精子顶体形成和细胞核形变中的作用第160-161页
    4.5.2 在精子形成时期PHB介导了线粒体的泛素化第161-163页
  4.6 本章小结第163页
  4.7 参考文献第163-169页
第五章 总结与展望第169-171页
附件Ⅰ第171-172页
附件Ⅱ第172-180页
附件Ⅲ第180-185页

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