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重组里氏木霉产高活力内切-β-葡聚糖酶的研究

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重组里氏木霉产高活力内切-β-葡聚糖酶的研究
论文目录
 
致谢第1-6页
摘要第6-9页
Abstract第9-13页
缩略词表第13-18页
第一章 综述第18-43页
  1.1 引言第18-19页
  1.2 纤维素酶概述第19-27页
    1.2.1 纤维素酶的组分和来源第19-20页
    1.2.2 纤维素酶的分子结构催化机制第20-22页
    1.2.3 纤维素酶的的应用第22-27页
      1.2.3.1 在纺织工业中的应用第22-25页
      1.2.3.2 在制浆造纸工业中的应用第25-26页
      1.2.3.3 在食品工业中的应用第26页
      1.2.3.4 在饲料工业中的应用第26-27页
  1.3 纤维素酶基因工程第27-36页
    1.3.1 根癌农杆菌介导转化法第27-31页
    1.3.2 遗传转化的选择标记第31页
    1.3.3 纤维素酶基因第31-33页
    1.3.4 里氏木霉产纤维素酶的基因调控第33-36页
  1.4 内切-β-葡聚糖酶基因的表达第36-41页
    1.4.1 内切-β-葡聚糖酶在大肠杆菌和酵母中的表达第36-39页
    1.4.2 内切-β-葡聚糖酶在里氏木霉中的表达第39-41页
  1.5 本课题的研究思路及拟研究内容第41-43页
第二章 里氏木霉内切-β-葡聚糖酶基因egl2的同源表达第43-68页
  2.1 引言第43-44页
  2.2 材料与方法第44-53页
    2.2.1 材料与试剂第44-45页
    2.2.2 培养基第45-46页
    2.2.3 实验仪器第46页
    2.2.4 实验方法第46-53页
  2.3 结果与讨论第53-66页
    2.3.1 内切-β-葡聚糖酶基因egl2的克隆第53-54页
    2.3.2 egl2基因表达盒的构建第54-55页
    2.3.3 PCR扩增潮霉素B磷酸转移酶基因序列第55-56页
    2.3.4 重组载体的构建第56-57页
    2.3.5 里氏木霉对抗生素的敏感性第57页
    2.3.6 介导转化菌浓的确定第57-59页
    2.3.7 共培养条件对农杆菌介导转化的影响第59-60页
    2.3.8 孢子预处理对转化效率的影响第60-61页
    2.3.9 里氏木霉转化子的筛选第61-62页
    2.3.10 摇瓶发酵产酶进程第62-63页
    2.3.11 重组里氏木霉内切-β-葡聚糖酶的酶学性质第63-65页
    2.3.12 重组里氏木霉纤维素酶的酶系组成第65-66页
  2.4 小结第66-68页
第三章 特异腐质霉内切-β-葡聚糖酶基因cel5A在里氏木霉中的表达第68-84页
  3.1 引言第68页
  3.2 材料与方法第68-76页
    3.2.1 材料和试剂第68-69页
    3.2.2 培养基第69-70页
    3.2.3 实验仪器第70页
    3.2.4 实验方法第70-76页
  3.3 结果与讨论第76-83页
    3.3.1 PCR获得特异腐质霉cel5A基因第76-77页
    3.3.2 克隆载体的验证分析第77-78页
    3.3.3 cel5A基因的序列分析第78页
    3.3.4 重组载体的构建第78-79页
    3.3.5 里氏木霉转化子的筛选第79-80页
    3.3.6 里氏木霉转化子的传代稳定性第80-81页
    3.3.7 发酵液蛋白电泳检测第81-82页
    3.3.8 重组里氏木霉内切-β-葡聚糖酶的pH适用范围第82-83页
  3.4 小结第83-84页
第四章 重组里氏木霉H3产纤维素酶的研究第84-94页
  4.1 引言第84页
  4.2 材料与方法第84-87页
    4.2.1 材料和试剂第84-85页
    4.2.2 培养基第85页
    4.2.3 实验仪器第85-86页
    4.2.4 实验方法第86-87页
  4.3 结果与讨论第87-92页
    4.3.1 碳源对产酶的影响第87-88页
    4.3.2 玉米浆浓度对产酶的影响第88页
    4.3.3 初始pH值对产酶的影响第88-89页
    4.3.4 摇瓶发酵的产酶进程第89-90页
    4.3.5 补料分批发酵第90-91页
    4.3.6 发酵罐产酶试验第91-92页
  4.4 小结第92-94页
第五章 里氏木霉egl2基因CBD序列与特异腐质霉cel5A基因的融合表达第94-108页
  5.1 引言第94页
  5.2 材料与方法第94-100页
    5.2.1 材料与试剂第94-95页
    5.2.2 实验仪器第95-96页
    5.2.3 培养基第96页
    5.2.4 实验方法第96-100页
  5.3 结果与讨论第100-106页
    5.3.1 cel5A基因与egl2 CBD序列的重组第100页
    5.3.2 重组载体pCB-CEG的构建第100-101页
    5.3.3 农杆菌介导转化及筛选第101-102页
    5.3.4 里氏木霉转化子的复筛第102-103页
    5.3.5 摇瓶发酵时间进程第103页
    5.3.6 重组里氏木霉HC4内切-β-葡聚糖酶的酶学性质第103-106页
  5.4 小结第106-108页
第六章 重组里氏木霉纤维素酶的应用基础研究第108-117页
  6.1 引言第108-109页
  6.2 材料与方法第109-112页
    6.2.1 材料和试剂第109页
    6.2.2 实验仪器第109页
    6.2.3 培养基第109-110页
    6.2.4 实验方法第110-112页
  6.3 结果与讨论第112-116页
    6.3.1 牛仔布水洗第112-115页
    6.3.2 纤维素酶解试验第115-116页
    6.3.3 纤维素酶稳定性试验第116页
  6.4 小结第116-117页
第七章 结论与展望第117-120页
  7.1 结论第117-119页
  7.2 展望第119-120页
参考文献第120-140页
作者简历第140页

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