论文目录 | |
| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-27页 |
| 1.1 细胞色素bd氧化还原酶概述 | 第14-20页 |
| 1.1.1 细胞色素bd氧化还原酶的生理功能 | 第14-15页 |
| 1.1.2 细胞色素bd氧化还原酶的分子生物学 | 第15-19页 |
| 1.1.3 细胞色素bd氧化还原酶的反应机制研究现状 | 第19-20页 |
| 1.2 Shewanella oneidensis MR-1中末端氧化酶的功能分工 | 第20-21页 |
| 1.3 S. oneidensis MR-1对亚硝酸盐的反应 | 第21-24页 |
| 1.3.1 S. oneidensis MR-1对亚硝酸的代谢过程 | 第21-22页 |
| 1.3.2 亚硝酸对S.oneidensis MR-1的生长抑制效应 | 第22-23页 |
| 1.3.3 细胞色素bd氧化还原酶使S. oneidensis MR-1获得对亚硝酸的耐受性 | 第23-24页 |
| 1.4 本研究课题的立项依据、研究目标及意义 | 第24-27页 |
| 第二章 ybgT(cydX)是保证S. oneidensis MR-1细胞色素bd氧化还原酶功能完整性的必需基因 | 第27-38页 |
| 2.1 材料与方法 | 第27-29页 |
| 2.1.1 菌株、质粒及细胞培养条件 | 第27页 |
| 2.1.2 突变体的构建及基因的异位回补 | 第27-28页 |
| 2.1.3 细胞对亚硝酸的耐受性测试 | 第28页 |
| 2.1.4 Western杂交 | 第28-29页 |
| 2.2 结果与分析 | 第29-37页 |
| 2.2.1 △Pcyd对亚硝酸的敏感性 | 第29-30页 |
| 2.2.2 Parc-cydAB不能恢复△Pcyd对亚硝酸的耐受性 | 第30-31页 |
| 2.2.3 Parc-cydAB-ybgT能够恢复APcyd对亚硝酸的耐受性 | 第31-32页 |
| 2.2.4 △cydX对亚硝酸的敏感性 | 第32-34页 |
| 2.2.5 CydAB具有少量残存活性,但CydABX才是完整的功能复合体 | 第34-37页 |
| 2.3 小结 | 第37-38页 |
| 第三章 CydX是细胞色素bd氧化还原酶的另一个亚基 | 第38-45页 |
| 3.1 材料与方法 | 第38-39页 |
| 3.1.1 菌株、质粒、引物与培养条件 | 第38页 |
| 3.1.2 RT-PCR | 第38页 |
| 3.1.3 氨苄青霉素抗性测试 | 第38页 |
| 3.1.4 BiFC实验 | 第38-39页 |
| 3.2 结果与分析 | 第39-44页 |
| 3.2.1 cydX与cydAB共转录 | 第39-41页 |
| 3.2.2 CydX的膜定位 | 第41-42页 |
| 3.2.3 CydX与CydAB共定位 | 第42-44页 |
| 3.3 小结 | 第44-45页 |
| 第四章 CydX在细胞色素bd氧化还原酶复合体中的功能探索和分析 | 第45-52页 |
| 4.1 材料与方法 | 第46-47页 |
| 4.1.1 菌株、质粒、引物与培养条件 | 第46页 |
| 4.1.2 GFP荧光的表达、检测和量化 | 第46页 |
| 4.1.3 BiFC实验 | 第46页 |
| 4.1.4 点突变及嵌合体构建 | 第46-47页 |
| 4.1.5 亚硝酸耐受性测试 | 第47页 |
| 4.2 结果与分析 | 第47-51页 |
| 4.2.1 CydAB复合体的形成不需要CydX | 第47-48页 |
| 4.2.2 CydX的N端对其功能不可或缺 | 第48-51页 |
| 4.3 小结 | 第51-52页 |
| 第五章 论文总结 | 第52-55页 |
| 5.1 主要研究结论 | 第52页 |
| 5.2 创新之处 | 第52页 |
| 5.3 不足之处 | 第52-53页 |
| 5.4 展望 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 附表1 本研究中所使用的菌株、质粒列表 | 第63页 |
