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褐飞虱几丁质降解酶系基因家族分析

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褐飞虱几丁质降解酶系基因家族分析
论文目录
 
致谢第1-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-11页
目次第11-15页
第一章 前言第15-25页
  1.1 几丁质与壳聚糖第15-16页
  1.2 几丁质代谢途径第16-19页
    1.2.1 几丁质合成酶第18-19页
    1.2.2 几丁质降解酶系第19页
  1.3 昆虫几丁质降解酶系基因研究进展第19-23页
    1.3.1 昆虫几丁质酶基因研究进展第19-21页
    1.3.2 昆虫β-N-乙酰已糖胺酶基因研究进展第21-22页
    1.3.3 昆虫几丁质脱乙酰酶基因研究进展第22-23页
  1.4 褐飞虱概况第23-24页
  1.5 本研究的目的意义第24-25页
第二章 常用仪器、试剂与方法第25-29页
  2.1 常用仪器及主要试剂第25页
    2.1.1 常用仪器第25页
    2.1.2 主要试剂第25页
  2.2 常规实验方法第25-28页
    2.2.1 CaCl_2法制备TG1感受态细胞第25-26页
    2.2.2 载体pMD-19T的连接第26页
    2.2.3 热击转化第26-27页
    2.2.4 质粒DNA提取第27页
    2.2.5 酶切反应第27页
    2.2.6 琼脂糖凝胶回收纯化第27-28页
  2.3 常规试剂配制第28-29页
    2.3.1 LB培养基第28页
    2.3.2 琼脂糖凝胶电泳第28页
    2.3.3 磷酸缓冲液(1×PBS)配制第28页
    2.3.4 抗生素的配制第28-29页
第三章 褐飞虱几丁质酶的基因分析及生物学功能第29-57页
引言第29-30页
  3.1 实验材料第30-31页
    3.1.1 昆虫饲养第30页
    3.1.2 材料与试剂第30-31页
  3.2 实验方法第31-36页
    3.2.1 褐飞虱基因组及转录组搜索及序列分析第31-32页
    3.2.2 总RNA提取与cDNA第一链合成第32页
    3.2.3 实时荧光定量PCR检测第32-34页
    3.2.4 原位杂交(In Situ Hybridazation,ISH)定位NlCht4基因第34-35页
    3.2.5 双链RNA(dsRNA)合成及RNA干扰第35页
    3.2.6 透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,TEM)检测组织内部干扰效果第35-36页
  3.3 结果与分析第36-55页
    3.3.1 褐飞虱几丁质酶基因的确定与分类第36-41页
    3.3.2 褐飞虱几丁质酶基因的基因结构分析第41页
    3.3.3 褐飞虱几丁质酶的结构域分析第41-46页
    3.3.4 褐飞虱几丁质酶基因不同发育阶段的表达模式第46页
    3.3.5 褐飞虱几丁质酶基因的组织特异性表达模式第46-50页
    3.3.6 褐飞虱几丁质酶基因RNA干扰及效果检测第50-55页
  3.4 总结与讨论第55-57页
第四章 褐飞虱β-N-乙酰己糖胺酶的基因分析及生物学功能第57-73页
引言第57页
  4.1 实验材料第57-58页
    4.1.1 昆虫第57-58页
    4.1.2 材料与试剂第58页
  4.2 实验方法第58-61页
    4.2.1 褐飞虱β-N-乙酰己糖胺酶基因搜索与序列分析第58页
    4.2.2 总RNA提取与cDNA第一链合成第58页
    4.2.3 实时荧光定量PCR检测基因表达模式第58-59页
    4.2.4 RNA干扰及干扰效果的定量PCR检测第59-61页
  4.3 结果与分析第61-71页
    4.3.1 NlHex基因的确定与结构分析第61-62页
    4.3.2 NlHex的保守结构域分析第62-63页
    4.3.3 Hex基因的系统发育分析第63-65页
    4.3.4 NlHex基因不同发育阶段的表达模式分析第65页
    4.3.5 NlHex基因不同组织的表达模式分析第65-70页
    4.3.6 NlHex基因的RNA干扰与功能分析第70-71页
  4.4 总结与讨论第71-73页
第五章 褐飞虱几丁质脱乙酰酶的基因分析及生物学功能第73-91页
引言第73-74页
  5.1 实验材料第74页
    5.1.1 昆虫第74页
    5.1.2 材料与试剂第74页
  5.2 实验方法第74-76页
    5.2.1 褐飞虱CDA基因的鉴定和分析第74-75页
    5.2.3 15种昆虫的CDA基因家族系统发育分析第75页
    5.2.4 总RNA提取与cDNA第一链合成第75页
    5.2.5 实时荧光定量PCR检测NlCDA基因表达模式第75-76页
    5.2.6 RNA干扰及干扰效果的定量PCR检测第76页
  5.3 结果与分析第76-87页
    5.3.1 褐飞虱CDA基因的确定与基因结构分析第76-79页
    5.3.2 预测褐飞虱CDA蛋白的结构域分析第79-81页
    5.3.3 几丁质脱乙酰酶的系统发育分析第81-83页
    5.3.4 褐飞虱CDA基因不同发育阶段表达模式第83页
    5.3.5 褐飞虱CDA基因的组织特异性表达第83页
    5.3.6 褐飞虱CDA的RNA干扰及检测第83-87页
  5.4 总结与讨论第87-91页
第六章 总结与展望第91-95页
  6.1 总结与讨论第91-94页
    6.1.1 褐飞虱几丁质降解酶系三家族基因的确定与分析第91-92页
    6.1.2 褐飞虱几丁质降解酶系三家族基因的表达模式分析第92页
    6.1.3 褐飞虱几丁质降解酶系三家族基因的生物学功能探索第92页
    6.1.4 褐飞虱几丁质代谢参与酶的“1+5+1+3”模式(图6-1)第92-94页
  6.2 进一步研究方向第94页
  6.3 本研究创新点第94-95页
参考文献第95-104页
作者简介第104页

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