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脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒素诱导的小麦基因克隆及功能鉴定

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脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒素诱导的小麦基因克隆及功能鉴定
论文目录
 
摘要第1-9页
Abstract第9-12页
缩略语表第12-13页
1 前言第13-37页
  1.1 赤霉菌毒素及其危害第13-14页
  1.2 植物抗赤霉病及赤霉菌毒素解毒相关基因研究进展第14-17页
    1.2.1 TRI101基因第14-15页
    1.2.2 UDP-糖基转移酶第15页
    1.2.3 核糖体L3蛋白第15-16页
    1.2.4 防御反应相关基因及其它基因的应用第16-17页
  1.3 甲硫氨酰-tRNA合成酶的功能及研究进展第17-19页
  1.4 多药输出蛋白的功能及研究进展第19-22页
  1.5 赤霉菌毒素及禾谷镰刀菌与小麦相互作用研究进展第22-24页
  1.6 植物与病原相互作用研究进展第24-36页
    1.6.1 植物与病原菌相互作用理论的发展第25-28页
    1.6.2 病原菌的PAMPs和植物的PRRs第28-31页
    1.6.3 病原菌的效应蛋白和植物的R基因第31-35页
    1.6.4 病原菌与宿主植物的共进化第35-36页
  1.7 本研究的目的及意义第36-37页
2 材料与方法第37-66页
  2.1 实验材料第37-41页
    2.1.1 植物材料和菌株第37页
    2.1.2 质粒载体第37页
    2.1.3 药品试剂第37页
    2.1.4 仪器设备第37-38页
    2.1.5 培养基及试剂配方第38-41页
    2.1.6 PCR扩增引物列表第41页
  2.2 实验方法第41-66页
    2.2.1 目的基因全长克隆及鉴定第41-46页
    2.2.2 Southern杂交第46-49页
    2.2.3 Nothern杂交第49-51页
    2.2.4 基因的启动子克隆第51-52页
    2.2.5 目的基因表达模式分析第52-53页
    2.2.6 亚细胞定位第53-55页
    2.2.7 拟南芥遗传转化及功能鉴定第55-59页
    2.2.8 RNA-seq分析样品准备及分析流程第59-60页
    2.2.9 Epo蛋白的表达及降解DON条件摸索第60-65页
    2.2.10 拟南芥中胼胝质积累的观察第65页
    2.2.11 拟南芥中HR反应第65-66页
3 结果与分析第66-132页
  3.1 小麦TaAn基因的克隆与功能验证第66-78页
    3.1.1 小麦TaAn基因的cDNA及gDNA的全长克隆第66-67页
    3.1.2 小麦TaAn基因的Souhern和Northern分析第67-68页
    3.1.3 DON诱导不同小麦品种TaAn基因的表达分析第68-70页
    3.1.4 小麦TaAn基因启动子克隆及顺式作用元件分析第70-71页
    3.1.5 小麦TaAn蛋白的亚细胞定位第71-73页
    3.1.6 小麦TaAn基因在拟南芥中的表达及功能鉴定第73-78页
  3.2 小麦TaUn基因的克隆与功能验证第78-90页
    3.2.1 小麦TaUn基因的cDNA及gDNA的全长克隆第78-79页
    3.2.2 小麦TaUn基因的Southern和Northern分析第79-80页
    3.2.3 DON诱导不同小麦品种TaUn基因表达模式第80-82页
    3.2.4 小麦TaUn基因启动子克隆及顺式作用元件分析第82-84页
    3.2.5 小麦TaUn蛋白的亚细胞定位第84-85页
    3.2.6 小麦TaUn基因在拟南芥中的表达及功能鉴定第85-90页
  3.3 小麦TaMetRS基因的克隆与功能验证第90-101页
    3.3.1 小麦TaMetRS基因的克隆与生物信息学分析第90-93页
    3.3.2 DON诱导不同小麦品种TaMetRS基因表达模式第93-94页
    3.3.3 小麦TaMetRS蛋白的亚细胞定位第94-96页
    3.3.4 小麦TaMetRS基因在拟南芥中的表达及功能鉴定第96-101页
  3.4 小麦TaMATE基因的克隆与功能验证第101-112页
    3.4.1 小麦TaMATE基因的克隆与生物信息学分析第101-103页
    3.4.2 DON诱导不同小麦品种TaMATE基因表达模式第103-105页
    3.4.3 小麦TaMATE蛋白的亚细胞定位第105-106页
    3.4.4 小麦TaMATE基因在拟南芥中的表达及功能鉴定第106-112页
  3.5 RNA-seq分析DON与小麦的互作的基因网络第112-132页
    3.5.1 不同毒素处理小麦后的转录水平差异第113-115页
    3.5.2 DON处理小麦后差异基因的GO分析和KEGG分析第115-118页
    3.5.3 DON作为真菌毒素能够引起小麦的免疫反应第118-119页
    3.5.4 DON能够引起植物激素的信号传导路径的变化第119-120页
    3.5.5 DON能够诱导苯丙烷类的生物合成路径,加强木质素的生物合成第120-122页
    3.5.6 DON能够诱导腐胺途径从而促进禾谷镰刀菌在小麦上的扩展第122页
    3.5.7 DON作为真菌毒素对植物细胞造成损伤第122-123页
    3.5.8 植物细胞可以通过修饰蛋白及转运蛋白对DON进行脱毒第123-125页
    3.5.9 蛋白酶抑制剂第125页
    3.5.10 DON引起小麦转录因子的表达变化第125页
    3.5.11 q-PCR验证RNA-seq结果第125-126页
    3.5.12 DON引起拟南芥的PTI信号途径第126-128页
    3.5.13 DON引起拟南芥的ETI信号途径第128-129页
    3.5.14 DON的环氧结构在引发拟南芥的ETI和PTI信号通路中至关重要第129-132页
4 讨论第132-141页
  4.1 小麦TaAn基因的克隆与功能验证第132页
  4.2 小麦TaUn基因的克隆与功能验证第132-133页
  4.3 小麦TaMetRS基因的克隆与功能验证第133-135页
  4.4 小麦TaMATE基因的克隆与功能验证第135-136页
  4.5 DON与植物互作的基因网络分析第136-140页
  4.6 全文结论及展望第140-141页
参考文献第141-161页
致谢第161-162页
附录第162-166页

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