论文目录 | |
摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
缩略语表 | 第12-13页 |
1 前言 | 第13-37页 |
1.1 赤霉菌毒素及其危害 | 第13-14页 |
1.2 植物抗赤霉病及赤霉菌毒素解毒相关基因研究进展 | 第14-17页 |
1.2.1 TRI101基因 | 第14-15页 |
1.2.2 UDP-糖基转移酶 | 第15页 |
1.2.3 核糖体L3蛋白 | 第15-16页 |
1.2.4 防御反应相关基因及其它基因的应用 | 第16-17页 |
1.3 甲硫氨酰-tRNA合成酶的功能及研究进展 | 第17-19页 |
1.4 多药输出蛋白的功能及研究进展 | 第19-22页 |
1.5 赤霉菌毒素及禾谷镰刀菌与小麦相互作用研究进展 | 第22-24页 |
1.6 植物与病原相互作用研究进展 | 第24-36页 |
1.6.1 植物与病原菌相互作用理论的发展 | 第25-28页 |
1.6.2 病原菌的PAMPs和植物的PRRs | 第28-31页 |
1.6.3 病原菌的效应蛋白和植物的R基因 | 第31-35页 |
1.6.4 病原菌与宿主植物的共进化 | 第35-36页 |
1.7 本研究的目的及意义 | 第36-37页 |
2 材料与方法 | 第37-66页 |
2.1 实验材料 | 第37-41页 |
2.1.1 植物材料和菌株 | 第37页 |
2.1.2 质粒载体 | 第37页 |
2.1.3 药品试剂 | 第37页 |
2.1.4 仪器设备 | 第37-38页 |
2.1.5 培养基及试剂配方 | 第38-41页 |
2.1.6 PCR扩增引物列表 | 第41页 |
2.2 实验方法 | 第41-66页 |
2.2.1 目的基因全长克隆及鉴定 | 第41-46页 |
2.2.2 Southern杂交 | 第46-49页 |
2.2.3 Nothern杂交 | 第49-51页 |
2.2.4 基因的启动子克隆 | 第51-52页 |
2.2.5 目的基因表达模式分析 | 第52-53页 |
2.2.6 亚细胞定位 | 第53-55页 |
2.2.7 拟南芥遗传转化及功能鉴定 | 第55-59页 |
2.2.8 RNA-seq分析样品准备及分析流程 | 第59-60页 |
2.2.9 Epo蛋白的表达及降解DON条件摸索 | 第60-65页 |
2.2.10 拟南芥中胼胝质积累的观察 | 第65页 |
2.2.11 拟南芥中HR反应 | 第65-66页 |
3 结果与分析 | 第66-132页 |
3.1 小麦TaAn基因的克隆与功能验证 | 第66-78页 |
3.1.1 小麦TaAn基因的cDNA及gDNA的全长克隆 | 第66-67页 |
3.1.2 小麦TaAn基因的Souhern和Northern分析 | 第67-68页 |
3.1.3 DON诱导不同小麦品种TaAn基因的表达分析 | 第68-70页 |
3.1.4 小麦TaAn基因启动子克隆及顺式作用元件分析 | 第70-71页 |
3.1.5 小麦TaAn蛋白的亚细胞定位 | 第71-73页 |
3.1.6 小麦TaAn基因在拟南芥中的表达及功能鉴定 | 第73-78页 |
3.2 小麦TaUn基因的克隆与功能验证 | 第78-90页 |
3.2.1 小麦TaUn基因的cDNA及gDNA的全长克隆 | 第78-79页 |
3.2.2 小麦TaUn基因的Southern和Northern分析 | 第79-80页 |
3.2.3 DON诱导不同小麦品种TaUn基因表达模式 | 第80-82页 |
3.2.4 小麦TaUn基因启动子克隆及顺式作用元件分析 | 第82-84页 |
3.2.5 小麦TaUn蛋白的亚细胞定位 | 第84-85页 |
3.2.6 小麦TaUn基因在拟南芥中的表达及功能鉴定 | 第85-90页 |
3.3 小麦TaMetRS基因的克隆与功能验证 | 第90-101页 |
3.3.1 小麦TaMetRS基因的克隆与生物信息学分析 | 第90-93页 |
3.3.2 DON诱导不同小麦品种TaMetRS基因表达模式 | 第93-94页 |
3.3.3 小麦TaMetRS蛋白的亚细胞定位 | 第94-96页 |
3.3.4 小麦TaMetRS基因在拟南芥中的表达及功能鉴定 | 第96-101页 |
3.4 小麦TaMATE基因的克隆与功能验证 | 第101-112页 |
3.4.1 小麦TaMATE基因的克隆与生物信息学分析 | 第101-103页 |
3.4.2 DON诱导不同小麦品种TaMATE基因表达模式 | 第103-105页 |
3.4.3 小麦TaMATE蛋白的亚细胞定位 | 第105-106页 |
3.4.4 小麦TaMATE基因在拟南芥中的表达及功能鉴定 | 第106-112页 |
3.5 RNA-seq分析DON与小麦的互作的基因网络 | 第112-132页 |
3.5.1 不同毒素处理小麦后的转录水平差异 | 第113-115页 |
3.5.2 DON处理小麦后差异基因的GO分析和KEGG分析 | 第115-118页 |
3.5.3 DON作为真菌毒素能够引起小麦的免疫反应 | 第118-119页 |
3.5.4 DON能够引起植物激素的信号传导路径的变化 | 第119-120页 |
3.5.5 DON能够诱导苯丙烷类的生物合成路径,加强木质素的生物合成 | 第120-122页 |
3.5.6 DON能够诱导腐胺途径从而促进禾谷镰刀菌在小麦上的扩展 | 第122页 |
3.5.7 DON作为真菌毒素对植物细胞造成损伤 | 第122-123页 |
3.5.8 植物细胞可以通过修饰蛋白及转运蛋白对DON进行脱毒 | 第123-125页 |
3.5.9 蛋白酶抑制剂 | 第125页 |
3.5.10 DON引起小麦转录因子的表达变化 | 第125页 |
3.5.11 q-PCR验证RNA-seq结果 | 第125-126页 |
3.5.12 DON引起拟南芥的PTI信号途径 | 第126-128页 |
3.5.13 DON引起拟南芥的ETI信号途径 | 第128-129页 |
3.5.14 DON的环氧结构在引发拟南芥的ETI和PTI信号通路中至关重要 | 第129-132页 |
4 讨论 | 第132-141页 |
4.1 小麦TaAn基因的克隆与功能验证 | 第132页 |
4.2 小麦TaUn基因的克隆与功能验证 | 第132-133页 |
4.3 小麦TaMetRS基因的克隆与功能验证 | 第133-135页 |
4.4 小麦TaMATE基因的克隆与功能验证 | 第135-136页 |
4.5 DON与植物互作的基因网络分析 | 第136-140页 |
4.6 全文结论及展望 | 第140-141页 |
参考文献 | 第141-161页 |
致谢 | 第161-162页 |
附录 | 第162-166页 |