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乙酸盐对家兔脂肪细胞代谢的调控机制研究

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乙酸盐对家兔脂肪细胞代谢的调控机制研究
论文目录
 
中文摘要第11-13页
Abstract第13-17页
1 前言第17-30页
  1.1 短链脂肪酸和短链脂肪酸受体第17-20页
    1.1.1 短链脂肪酸第17-19页
    1.1.2 短链脂肪酸受体GPR41和GPR43研究进展第19-20页
  1.2 脂肪间充质干细胞第20-21页
  1.3 影响脂肪沉积的调控因子第21-24页
    1.3.1 脂肪的沉积第21页
    1.3.2 细胞成脂分化的关键调控因子第21-23页
    1.3.3 脂肪合成代谢和分解代谢的关键调控因子第23-24页
  1.4 脂肪代谢调控机理第24-29页
    1.4.1 乙酸盐对脂肪代谢的影响第24-25页
    1.4.2 AMPK信号通路第25-26页
    1.4.3 MAPKs信号通路第26-27页
    1.4.4 mTOR信号通路第27-29页
  1.5 选题目的及意义第29-30页
2 材料与方法第30-48页
  2.1 试验对象第30页
  2.2 动物日粮第30页
  2.3 试验试剂与主要仪器第30-33页
  2.4 试验设计第33-36页
    2.4.1 家兔GPR41和GPR43基因克隆测序第33页
    2.4.2 家兔不同发育时期GPR41、GPR43基因在各组织的表达水平变化第33-34页
    2.4.3 乙酸盐注射对家兔脂肪代谢的影响第34页
    2.4.4 体外兔脂肪干细胞成脂分化模型的建立第34页
    2.4.5 乙酸盐调控兔脂肪干细胞脂肪代谢模型的建立第34-35页
    2.4.6 乙酸盐对家兔脂肪细胞代谢的调控机制初探第35-36页
  2.5 试验方法第36-46页
    2.5.1 mRNA提取及反转录第36-38页
    2.5.2 巢式PCR第38-40页
    2.5.3 基因RACE扩增第40-41页
    2.5.4 荧光定量PCR第41-43页
    2.5.5 蛋白提取和WesternBlotting第43-44页
    2.5.6 细胞培养第44-46页
  2.6 数据处理第46-48页
3 结果与分析第48-72页
  3.1 家兔GPR41和GPR43基因克隆测序及序列分析第48-53页
    3.1.1 家兔GPR41、GPR43基因克隆测序第48-49页
    3.1.2 家兔GPR41、GPR43基因同源性分析第49-50页
    3.1.3 90 d家兔各组织间GPR41、GPR43 mRNA表达量分析第50-51页
    3.1.4 各组织内GPR41和GPR43 mRNA表达量随日龄的变化第51-53页
  3.2 乙酸盐注射对家兔脂肪代谢的影响第53-56页
    3.2.1 乙酸盐处理对家兔皮下脂肪沉积的影响第53-54页
    3.2.2 乙酸盐对家兔血浆物质代谢的影响第54-55页
    3.2.3 乙酸盐对家兔脂肪组织基因表达的影响第55页
    3.2.4 乙酸盐对家兔脂肪组织中AMPK、MAPK、mTOR等蛋白表达的影响第55-56页
  3.3 兔脂肪间质干细胞的体外成脂分化模型的建立第56-58页
  3.4 乙酸盐诱导兔脂肪细胞代谢模型的建立第58-63页
    3.4.1 乙酸盐处理对兔脂肪细胞代谢相关基因表达的影响第58-60页
    3.4.2 乙酸盐处理对脂滴沉积的影响第60-61页
    3.4.3 乙酸盐处理对AMPKα、MAPK、mTOR信号蛋白的调控作用第61-63页
  3.5 乙酸盐调控家兔脂肪细胞代谢的作用机制研究第63-72页
    3.5.1 抑制AMPK对乙酸盐调控脂肪细胞代谢的影响第63-65页
    3.5.2 抑制p38MAPK对乙酸盐调控脂肪细胞代谢的影响第65-67页
    3.5.3 激活mTOR对乙酸盐调控脂肪细胞代谢的影响第67-69页
    3.5.4 激活ERK对乙酸盐调控脂肪细胞代谢的影响第69-72页
4 讨论第72-84页
  4.1 家兔GPR41和GPR43基因的克隆测序及组织表达模式分析第72-74页
    4.1.1 家兔基因组含GPR41和GPR43基因第72页
    4.1.2 90 日龄家兔各组织GPR41和GPR43基因表达分析第72-73页
    4.1.3 家兔不同发育阶段的同一组织中GPR41和GPR43基因表达模式分析第73-74页
  4.2 乙酸盐注射对家兔脂肪代谢的影响第74-78页
    4.2.1 乙酸盐促进家兔皮下脂肪分解代谢第74-75页
    4.2.2 乙酸盐加强家兔脂肪细胞成脂分化能力第75页
    4.2.3 乙酸盐处理促进家兔脂肪组织中GPR41、GPR43的表达第75-76页
    4.2.4 乙酸盐处理促进家兔脂肪组织中AMPK、MAPK信号磷酸化水平的表达第76-78页
  4.3 体外兔ADSCs成脂分化潜力的探究第78-79页
  4.4 体外验证乙酸对家兔脂肪细胞代谢的调控机制第79-84页
    4.4.1 乙酸盐促进兔ADSCs体外成脂分化第79-80页
    4.4.2 乙酸通过激活AMPK促进家兔脂肪分化与脂质沉积第80-81页
    4.4.3 p38MAPK参与乙酸盐对家兔脂肪细胞代谢的调控第81-82页
    4.4.4 乙酸盐通过抑制mTOR促进家兔成脂分化和脂肪分解第82页
    4.4.5 乙酸盐通过抑制ERK促进家兔成脂分化和脂肪分解第82-84页
5 结论第84-85页
参考文献第85-100页
致谢第100-101页
基金资助第101-102页
攻读学位期间发表论文第102页

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