论文目录 | |
中文摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-17页 |
1 前言 | 第17-30页 |
1.1 短链脂肪酸和短链脂肪酸受体 | 第17-20页 |
1.1.1 短链脂肪酸 | 第17-19页 |
1.1.2 短链脂肪酸受体GPR41和GPR43研究进展 | 第19-20页 |
1.2 脂肪间充质干细胞 | 第20-21页 |
1.3 影响脂肪沉积的调控因子 | 第21-24页 |
1.3.1 脂肪的沉积 | 第21页 |
1.3.2 细胞成脂分化的关键调控因子 | 第21-23页 |
1.3.3 脂肪合成代谢和分解代谢的关键调控因子 | 第23-24页 |
1.4 脂肪代谢调控机理 | 第24-29页 |
1.4.1 乙酸盐对脂肪代谢的影响 | 第24-25页 |
1.4.2 AMPK信号通路 | 第25-26页 |
1.4.3 MAPKs信号通路 | 第26-27页 |
1.4.4 mTOR信号通路 | 第27-29页 |
1.5 选题目的及意义 | 第29-30页 |
2 材料与方法 | 第30-48页 |
2.1 试验对象 | 第30页 |
2.2 动物日粮 | 第30页 |
2.3 试验试剂与主要仪器 | 第30-33页 |
2.4 试验设计 | 第33-36页 |
2.4.1 家兔GPR41和GPR43基因克隆测序 | 第33页 |
2.4.2 家兔不同发育时期GPR41、GPR43基因在各组织的表达水平变化 | 第33-34页 |
2.4.3 乙酸盐注射对家兔脂肪代谢的影响 | 第34页 |
2.4.4 体外兔脂肪干细胞成脂分化模型的建立 | 第34页 |
2.4.5 乙酸盐调控兔脂肪干细胞脂肪代谢模型的建立 | 第34-35页 |
2.4.6 乙酸盐对家兔脂肪细胞代谢的调控机制初探 | 第35-36页 |
2.5 试验方法 | 第36-46页 |
2.5.1 mRNA提取及反转录 | 第36-38页 |
2.5.2 巢式PCR | 第38-40页 |
2.5.3 基因RACE扩增 | 第40-41页 |
2.5.4 荧光定量PCR | 第41-43页 |
2.5.5 蛋白提取和WesternBlotting | 第43-44页 |
2.5.6 细胞培养 | 第44-46页 |
2.6 数据处理 | 第46-48页 |
3 结果与分析 | 第48-72页 |
3.1 家兔GPR41和GPR43基因克隆测序及序列分析 | 第48-53页 |
3.1.1 家兔GPR41、GPR43基因克隆测序 | 第48-49页 |
3.1.2 家兔GPR41、GPR43基因同源性分析 | 第49-50页 |
3.1.3 90 d家兔各组织间GPR41、GPR43 mRNA表达量分析 | 第50-51页 |
3.1.4 各组织内GPR41和GPR43 mRNA表达量随日龄的变化 | 第51-53页 |
3.2 乙酸盐注射对家兔脂肪代谢的影响 | 第53-56页 |
3.2.1 乙酸盐处理对家兔皮下脂肪沉积的影响 | 第53-54页 |
3.2.2 乙酸盐对家兔血浆物质代谢的影响 | 第54-55页 |
3.2.3 乙酸盐对家兔脂肪组织基因表达的影响 | 第55页 |
3.2.4 乙酸盐对家兔脂肪组织中AMPK、MAPK、mTOR等蛋白表达的影响 | 第55-56页 |
3.3 兔脂肪间质干细胞的体外成脂分化模型的建立 | 第56-58页 |
3.4 乙酸盐诱导兔脂肪细胞代谢模型的建立 | 第58-63页 |
3.4.1 乙酸盐处理对兔脂肪细胞代谢相关基因表达的影响 | 第58-60页 |
3.4.2 乙酸盐处理对脂滴沉积的影响 | 第60-61页 |
3.4.3 乙酸盐处理对AMPKα、MAPK、mTOR信号蛋白的调控作用 | 第61-63页 |
3.5 乙酸盐调控家兔脂肪细胞代谢的作用机制研究 | 第63-72页 |
3.5.1 抑制AMPK对乙酸盐调控脂肪细胞代谢的影响 | 第63-65页 |
3.5.2 抑制p38MAPK对乙酸盐调控脂肪细胞代谢的影响 | 第65-67页 |
3.5.3 激活mTOR对乙酸盐调控脂肪细胞代谢的影响 | 第67-69页 |
3.5.4 激活ERK对乙酸盐调控脂肪细胞代谢的影响 | 第69-72页 |
4 讨论 | 第72-84页 |
4.1 家兔GPR41和GPR43基因的克隆测序及组织表达模式分析 | 第72-74页 |
4.1.1 家兔基因组含GPR41和GPR43基因 | 第72页 |
4.1.2 90 日龄家兔各组织GPR41和GPR43基因表达分析 | 第72-73页 |
4.1.3 家兔不同发育阶段的同一组织中GPR41和GPR43基因表达模式分析 | 第73-74页 |
4.2 乙酸盐注射对家兔脂肪代谢的影响 | 第74-78页 |
4.2.1 乙酸盐促进家兔皮下脂肪分解代谢 | 第74-75页 |
4.2.2 乙酸盐加强家兔脂肪细胞成脂分化能力 | 第75页 |
4.2.3 乙酸盐处理促进家兔脂肪组织中GPR41、GPR43的表达 | 第75-76页 |
4.2.4 乙酸盐处理促进家兔脂肪组织中AMPK、MAPK信号磷酸化水平的表达 | 第76-78页 |
4.3 体外兔ADSCs成脂分化潜力的探究 | 第78-79页 |
4.4 体外验证乙酸对家兔脂肪细胞代谢的调控机制 | 第79-84页 |
4.4.1 乙酸盐促进兔ADSCs体外成脂分化 | 第79-80页 |
4.4.2 乙酸通过激活AMPK促进家兔脂肪分化与脂质沉积 | 第80-81页 |
4.4.3 p38MAPK参与乙酸盐对家兔脂肪细胞代谢的调控 | 第81-82页 |
4.4.4 乙酸盐通过抑制mTOR促进家兔成脂分化和脂肪分解 | 第82页 |
4.4.5 乙酸盐通过抑制ERK促进家兔成脂分化和脂肪分解 | 第82-84页 |
5 结论 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-100页 |
致谢 | 第100-101页 |
基金资助 | 第101-102页 |
攻读学位期间发表论文 | 第102页 |