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苏云金芽孢杆菌LLP29菌株的分离及其对白纹伊蚊作用机理的研究

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苏云金芽孢杆菌LLP29菌株的分离及其对白纹伊蚊作用机理的研究
论文目录
 
中文摘要第10-11 页
英文摘要第11-13 页
前言第13-31 页
  1 Bt的分布第14-17 页
  2 Bt的分离第17-19 页
    · 样品的采集第17 页
      · 目标样品的选择第17 页
      · 采样方法第17 页
      · 样品保存第17 页
    · 分离方法第17-19 页
      · 无菌水法第18 页
      · 热处理法第18 页
      · 盖叶法第18-19 页
      · 擦试法第19 页
  3 Bt的杀蚊研究第19-27 页
    · 白纹伊蚊的研究概况第20-22 页
      · 白纹伊蚊的危害第20-21 页
      · 白纹伊蚊的孳生场所第21 页
      · 白纹伊蚊的孳生习性第21 页
      · 化学物质对蚊虫孳生的影响第21 页
      · 白纹伊蚊的生态习性第21-22 页
        · 栖息习性第21-22 页
        · 昼夜活动规律第22 页
        · 季节消长第22 页
        · 产卵习性第22 页
    · 白纹伊蚊传播的疾病第22-24 页
      · 登革热/登革出血热/登革休克综合症第22-23 页
      · 西尼罗第23-24 页
      · 流行性乙型脑炎第24 页
    · 防治策略第24-27 页
      · 化学防治第25 页
      · 环境防治第25 页
      · 生物防治第25-27 页
  4 主要杀蚊晶体蛋白结构第27-28 页
    · 杀虫晶体蛋白Cry2Aa的结构第27 页
    · 杀虫晶体蛋白Cyt的结构第27-28 页
  5 杀虫晶体蛋白引起昆虫个体细胞裂解的机制第28-29 页
    · 质子梯度模型第28 页
    · 渗透裂解模型第28-29 页
  6 昆虫对Bt的抗性研究第29-31 页
第1章 不同宿主Bt菌株的分离第31-41 页
  1 材料与方法第31-34 页
    · 材料第31-32 页
      · 培养基第31 页
      · 药剂第31 页
      · 对照菌株第31 页
      · 分离材料第31-32 页
    · 试验方法第32-34 页
      · 分离材料的采集第32-33 页
      · 分离培养基的选择第33 页
      · 分离方法的选择第33-34 页
      · 镜检第34 页
  2 结果与分析第34-39 页
    · 分离培养基的选择第34-36 页
    · 分离方法的选择第36 页
    · Bt的分布情况第36-39 页
  3 小结与讨论第39-41 页
第2章 Bt叶片分离株的生物学特性研究第41-54 页
  1 材料与方法第41-46 页
    · 试验材料第41-42 页
      · 试验菌株第41 页
      · 试验药剂第41 页
      · 试验仪器第41 页
      · 供试虫源第41 页
      · 酶类第41 页
      · 缓冲液第41-42 页
    · 试验方法第42-46 页
      · cry基因型鉴定第42-45 页
      · 对不同昆虫的杀虫活性测定第45 页
      · 蛋白测定第45-46 页
  2 结果与分析第46-51 页
    · cry基因的鉴定第46-48 页
    · 生物测定第48-51 页
    · 蛋白电泳鉴定第51 页
  3 小结与讨论第51-54 页
第3章 LLP29菌株生理生化指标的测定及cyt1Aa6基因的克隆与表达第54-69 页
  1 材料与方法第54-63 页
    · 试验材料第54-55 页
      · 培养基第54 页
      · 菌株第54 页
      · 供试虫源第54-55 页
      · 缓冲液第55 页
    · 试验方法第55-63 页
      · 主要生理生化指标的鉴定第55-57 页
      · cyt1基因的克隆第57-60 页
      · cyt1基因的表达第60-62 页
      · cyt1Aa6基因原核表达的生物测定第62-63 页
  2 结果与分析第63-67 页
    · 生理生化指标试验结果第63 页
    · PCR检测第63 页
    · 酶切分析第63-64 页
    · 序列测定第64-66 页
    · cyt1Aa6基因的表达第66-67 页
    · 表达菌液生物活性测定第67 页
  3 小结与讨论第67-69 页
第4章 cyt1Aa6对白纹伊蚊作用机理的研究第69-77 页
  1 材料与方法第69-72 页
    · 细胞株、蚊虫及菌株第69 页
      · 细胞株第69 页
      · 蚊虫第69 页
      · 供试菌株第69 页
    · Cyt1Aa6蛋白的纯化第69 页
    · 白纹伊蚊及C6/36细胞刷状缘膜(BBMV)蛋白的提取第69 页
    · Bradford法测定蛋白浓度第69-70 页
    · 主要试剂第70 页
    · 抗体的制备与纯化第70 页
    · Cyt1Aa6毒素蛋白对白纹伊蚊的毒力测定第70 页
    · Cyt1Aa6毒素蛋白对C6/36的毒力测定(MTT)第70-71 页
    · Cyt1Aa6毒素蛋白对C6/36的结合试验第71 页
    · 免疫组织化学第71-72 页
  2 结果与分析第72-75 页
    · 白纹伊蚊的形态特征第72-73 页
    · 对白纹伊蚊的毒力测定第73 页
    · 对C6/36细胞的毒力测定(MTT)第73-74 页
    · 对C6/36的荧光标记结合试验第74-75 页
    · 免疫组织化学第75 页
  3 小结与讨论第75-77 页
第5章 Cy1Aa6对白纹伊蚊C6/36抗性机制的研究第77-85 页
  1 材料与方法第77-79 页
    · 试验材料第77 页
      · 细胞株及菌种第77 页
      · 主要试剂及药品第77 页
    · 试验方法第77-79 页
      · 白纹伊蚊C6/36细胞的抗性诱导第77 页
      · 噻唑蓝比色法(MTT)测定细胞抗性比第77 页
      · 敏感与抗性细胞的形态学观察第77 页
      · 间接免疫荧光第77-78 页
      · 敏感与抗性C6/36细胞的刷状缘膜蛋白(BBMV)的提取第78 页
      · 酶联免疫结合实验第78 页
      · 敏感与抗性细胞毒素结合蛋白的配体印迹实验第78-79 页
  2 结果与分析第79-81 页
    · MTT细胞毒性试验第79 页
    · 敏感与抗性细胞形态学观察第79-80 页
    · 敏感与抗性细胞的间接免疫荧光显微观察第80 页
    · 敏感和抗性细胞与毒素结合的ELISA分析第80 页
    · 敏感和抗性细胞与蛋白毒素结合的配体印迹第80-81 页
  3 小结与讨论第81-85 页
第6章 总结第85-87 页
  1 主要研究结果第85 页
  2 创新点第85-86 页
  3 下一步研究内容第86-87 页
参考文献第87-96 页
附录1 本试验使用的试剂与溶液的配制第96-98 页
附录2 博士期间发表(或投稿)论文及参加课题第98-99 页
附录3 序列GenBank登录号第99-100 页
致谢第100页

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