论文目录 | |
摘要 | 第1-13页 |
ABSTRACT | 第13-18页 |
缩略语(Abbreviation) | 第18-20页 |
第一篇 文献综述 | 第20-56页 |
第一章 脂肪细胞起源与组织差异 | 第20-32页 |
1 脂肪细胞的起源 | 第21-24页 |
2 成熟脂肪细胞去分化 | 第24-25页 |
3 脂肪的组织差异性 | 第25-27页 |
参考文献 | 第27-32页 |
第二章 糖皮质激素与脂肪调控 | 第32-40页 |
1 糖皮质激素促进脂肪沉积 | 第33-34页 |
2 糖皮质激素影响脂肪分解 | 第34-35页 |
3 糖皮质激素影响脂肪细胞葡萄糖代谢 | 第35页 |
4 糖皮质激素影响脂肪分布 | 第35-37页 |
参考文献 | 第37-40页 |
第三章 糖皮质激素受体的结构与组织特异性 | 第40-46页 |
1 GR的基因结构 | 第40-42页 |
2 GR的组织特异性 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-46页 |
第四章 肌肉与肌肉因子 | 第46-56页 |
1 常见肌肉因子 | 第47-50页 |
2 肌肉因子对脂肪的调控 | 第50-53页 |
参考文献 | 第53-56页 |
第二篇 试验研究 | 第56-126页 |
第一章 猪皮下、肌内脂肪的糖皮质激素反应性分析 | 第56-70页 |
1 材料与方法 | 第56-59页 |
1.1 样品采集 | 第56页 |
1.2 脂肪细胞的获取 | 第56-57页 |
1.3 CCK8法检测细胞增殖 | 第57页 |
1.4 去分化前体脂肪细胞的成脂诱导 | 第57页 |
1.5 脂肪沉积和分解能力的测定 | 第57页 |
1.6 ACTH在体处理 | 第57-58页 |
1.7 RNA的提取 | 第58页 |
1.8 反转录与qRT-PCR | 第58-59页 |
1.9 皮质醇含量测定 | 第59页 |
1.10 数据分析 | 第59页 |
2 结果与分析 | 第59-66页 |
2.1 前体脂肪细胞的分离、培养 | 第59-60页 |
2.2 DEX对前体脂肪细胞增殖的影响 | 第60-61页 |
2.3 DEX对前体脂肪细胞分化的影响 | 第61-63页 |
2.4 DEX对成熟脂肪细胞的影响 | 第63-65页 |
2.5 ACTH在体处理对脂肪组织的影响 | 第65-66页 |
3 讨论 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-70页 |
第二章 猪皮下、肌内脂肪的糖皮质激素受体分析 | 第70-82页 |
1 材料与方法 | 第71-74页 |
1.1 样品采集 | 第71页 |
1.2 Western blot | 第71-72页 |
1.3 RNA的提取 | 第72页 |
1.4 cDNA的合成 | 第72-73页 |
1.5 拷贝数定量PCR | 第73-74页 |
1.6 数据分析 | 第74页 |
2 结果与分析 | 第74-78页 |
2.1 GR与IMF和BFT的相关性分析 | 第74-75页 |
2.2 GR在皮下、肌内脂肪组织中的表达模式 | 第75-76页 |
2.3 Exon 1变体在皮下、肌内脂肪组织中的表达模式 | 第76-77页 |
2.4 Exon 1变体在GRα和GRβ中的表达模式 | 第77-78页 |
3 讨论 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-82页 |
第三章 猪肌肉组织培养液抑制糖皮质激素受体影响脂肪细胞 | 第82-94页 |
1 材料与方法 | 第82-84页 |
1.1 肌肉组织培养液的获取 | 第82页 |
1.2 细胞毒性检测 | 第82页 |
1.3 qRT-PCR | 第82页 |
1.4 细胞计数 | 第82-83页 |
1.5 细胞周期检测 | 第83页 |
1.6 细胞凋亡检测 | 第83页 |
1.7 数据分析 | 第83-84页 |
2 结果与分析 | 第84-90页 |
2.1 猪肌肉组织培养液的毒性检测 | 第84-85页 |
2.2 猪肌肉组织培养液对GR变体的影响 | 第85页 |
2.3 猪肌肉组织培养液对脂肪细胞增殖的影响 | 第85-87页 |
2.4 猪肌肉组织培养液对脂肪细胞分化的影响 | 第87-88页 |
2.5 猪肌肉组织培养液对脂肪细胞周期的影响 | 第88-89页 |
2.6 猪肌肉组织培养液对脂肪细胞凋亡的影响 | 第89-90页 |
3 讨论 | 第90-92页 |
参考文献 | 第92-94页 |
第四章 C2C12肌管抑制糖皮质激素受体影响3T3-L1脂肪细胞 | 第94-108页 |
1 材料与方法 | 第94-95页 |
1.1 C2C12与3T3-L1的共培养 | 第94页 |
1.2 EdU染色 | 第94页 |
1.3 油红O染色 | 第94页 |
1.4 qRT-PCR | 第94-95页 |
1.5 Western blot | 第95页 |
1.6 流式细胞仪分析 | 第95页 |
1.7 Caspase 3活性检测 | 第95页 |
1.8 数据分析 | 第95页 |
2 结果与分析 | 第95-104页 |
2.1 C2C12的诱导分化 | 第95-96页 |
2.2 C2C12肌管对3T3-L1中GR表达的影响 | 第96页 |
2.3 C2C12肌管对3T3-L1前体脂肪细胞增殖的影响 | 第96-98页 |
2.4 C2C12肌管对3T3-L1前体脂肪细胞周期的影响 | 第98-99页 |
2.5 C2C12肌管对3T3-L1前体脂肪细胞凋亡的影响 | 第99-101页 |
2.6 C2C12肌管对3T3-L1前体脂肪细胞分化的影响 | 第101-102页 |
2.7 C2C12肌管对3T3-L1前体脂肪细胞GCs敏感性的影响 | 第102-104页 |
3 讨论 | 第104-106页 |
参考文献 | 第106-108页 |
第五章 MSTN对脂肪细胞GR启动子甲基化水平的影响 | 第108-126页 |
1 材料与方法 | 第108-112页 |
1.1 试验动物 | 第108-109页 |
1.2 MSTN检测 | 第109页 |
1.3 CCK8法检测细胞增殖 | 第109页 |
1.4 流式细胞仪分析 | 第109页 |
1.5 qRT-PCR | 第109页 |
1.6 Western blot | 第109页 |
1.7 基因组DNA的提取 | 第109-110页 |
1.8 甲基化测序分析 | 第110-111页 |
1.9 甲基免疫沉淀 | 第111-112页 |
2 结果与分析 | 第112-121页 |
2.1 MSTN浓度测定 | 第112页 |
2.2 MSTN对皮下脂肪细胞增殖的影响 | 第112-113页 |
2.3 MSTN对皮下脂肪细胞分化的影响 | 第113-114页 |
2.4 MSTN对皮下脂肪细胞周期的影响 | 第114页 |
2.5 MSTN对皮下脂肪细胞凋亡的影响 | 第114-115页 |
2.6 MSTN对脂肪细胞中GR表达的影响 | 第115-116页 |
2.7 Promoter 1C和1H在脂肪中的甲基化分析 | 第116-119页 |
2.8 MSTN对脂肪细胞中GR甲基化程度的影响 | 第119-121页 |
3 讨论 | 第121-123页 |
参考文献 | 第123-126页 |
全文结论 | 第126-128页 |
创新点 | 第128-130页 |
致谢 | 第130-132页 |
攻读博士期间发表的论文 | 第132页 |