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钛表面噬菌体基质膜的制备及其生物学性能评价

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钛表面噬菌体基质膜的制备及其生物学性能评价
论文目录
 
摘要第1-7页
abstract第7-19页
第1章 绪论第19-51页
  1.1 种植体植入后的组织时序性响应第19-22页
    1.1.1 危险信号的释放及蛋白吸附第19-20页
    1.1.2 急性及慢性炎症响应第20-22页
    1.1.3 组织愈合第22页
  1.2 巨噬细胞与生物材料的相互作用第22-35页
    1.2.1 生物材料对巨噬细胞极化的调控第22-33页
    1.2.2 生物材料引起的炎性响应对骨愈合的影响第33-35页
    1.2.3 免疫调节生物材料的设计第35页
  1.3 转化生长因子β第35-43页
    1.3.1 TGF-β1简介第35-37页
    1.3.2 TGF-β1信号通路第37-38页
    1.3.3 TGF-β1的免疫调控第38-40页
    1.3.4 TGF-β1的骨愈合调控第40-43页
  1.4 M13噬菌体展示技术及应用第43-49页
    1.4.1 M13噬菌体及其免疫原性第43-44页
    1.4.2 M13噬菌体展示技术第44-45页
    1.4.3 M13噬菌体展示技术的应用第45-48页
    1.4.4 M13噬菌体生物基质的构建第48-49页
  1.5 本文研究的目的和内容第49-50页
  1.6 技术路线第50-51页
第2章 钛结合肽-噬菌体的淘选及与钛表面作用机制探究第51-73页
  2.1 引言第51页
  2.2 材料与方法第51-55页
    2.2.1 样品制备第51-52页
    2.2.2 钛结合肽-噬菌体的淘选第52-53页
    2.2.3 噬菌体的扩增和纯化第53页
    2.2.4 噬菌体DNA的提取及测序第53-54页
    2.2.5 钛结合肽-噬菌体的亲和性评价第54页
    2.2.6 钛结合肽的蛋白结构预测第54-55页
    2.2.7 钛基底表面表征第55页
    2.2.8 统计学分析第55页
  2.3 实验结果第55-68页
    2.3.1 钛结合肽-噬菌体的淘选结果第55-57页
    2.3.2 钛结合肽的分析第57-58页
    2.3.3 钛结合肽-噬菌体的亲和性评价第58-60页
    2.3.4 TBP54的蛋白结构分析第60页
    2.3.5 M13噬菌体红外表征第60-61页
    2.3.6 钛基底表面表征第61-62页
    2.3.7 TBP54-phage与钛基底作用表征第62-66页
    2.3.8 钛表面羟基基团作用的探索第66-68页
  2.4 讨论第68-71页
  2.5 结论第71-73页
第3章 钛表面噬菌体薄膜的制备第73-85页
  3.1 引言第73页
  3.2 材料与方法第73-75页
    3.2.1 噬菌体薄膜的制备第73-74页
    3.2.2 壳聚糖/噬菌体复合膜的制备第74页
    3.2.3 噬菌体活性测定第74-75页
    3.2.4 噬菌体薄膜的表征第75页
  3.3 结果与讨论第75-84页
    3.3.1 纯噬菌体膜的表征第75-76页
    3.3.2 噬菌体/PVP膜的表征第76-82页
    3.3.3 噬菌体/壳聚糖复合膜的表征第82-84页
    3.3.4 小结第84页
  3.4 结论第84-85页
第4章 钛表面噬菌体膜对成骨分化及体外矿化的影响第85-101页
  4.1 引言第85页
  4.2 材料与方法第85-89页
    4.2.1 样品制备及表征第85页
    4.2.2 蛋白吸附评价第85-86页
    4.2.3 成骨细胞培养第86页
    4.2.4 荧光染色观察第86页
    4.2.5 SEM形态观察第86-87页
    4.2.6 ALP活性测定第87页
    4.2.7 RT-PCR检测第87-88页
    4.2.8 体外矿化第88-89页
    4.2.9 统计学分析第89页
  4.3 实验结果第89-98页
    4.3.1 材料表面表征第89-90页
    4.3.2 蛋白吸附评价第90-91页
    4.3.3 成骨细胞粘附与铺展第91-95页
    4.3.4 成骨细胞增殖与分化第95-96页
    4.3.5 矿化实验第96-98页
  4.4 讨论第98-99页
  4.5 结论第99-101页
第5章 钛表面噬菌体膜对巨噬细胞功能的调控第101-113页
  5.1 引言第101页
  5.2 材料与方法第101-104页
    5.2.1 样品制备第101-102页
    5.2.2 巨噬细胞培养第102页
    5.2.3 荧光染色观察第102页
    5.2.4 凋亡染色观察第102页
    5.2.5 SEM形态观察第102-103页
    5.2.6 流式细胞仪分析第103页
    5.2.7 ELISA检测第103页
    5.2.8 统计学分析第103-104页
  5.3 实验结果第104-110页
    5.3.1 巨噬细胞增殖活性第104页
    5.3.2 巨噬细胞粘附与铺展第104-107页
    5.3.3 巨噬细胞炎症相关因子分泌第107-108页
    5.3.4 巨噬细胞M1/M2极化第108-110页
    5.3.5 巨噬细胞凋亡第110页
  5.4 讨论第110-112页
  5.5 结论第112-113页
第6章 转化生长因子-β1亲和肽的淘选及评价第113-133页
  6.1 引言第113页
  6.2 材料与方法第113-117页
    6.2.1 亲和肽的淘选第113-114页
    6.2.2 亲和性评价第114页
    6.2.3 Tβm结构预测第114-115页
    6.2.4 细胞培养及表征第115-116页
    6.2.5 Westernblot分析第116-117页
    6.2.6 统计学分析第117页
  6.3 实验结果第117-128页
    6.3.1 TGF-β1亲和肽的淘选结果第117-118页
    6.3.2 亲和肽Tβms序列分析第118-121页
    6.3.3 TGF-β1与Tβms亲和性评价第121-124页
    6.3.4 Tβms对成骨细胞的单独作用第124-125页
    6.3.5 TGF-β1和Tβms对成骨细胞的协同作用第125-128页
  6.4 讨论第128-131页
  6.5 结论第131-133页
第7章 TGF-β1亲和肽-噬菌体膜对间充质干细胞成骨分化的调控第133-151页
  7.1 引言第133页
  7.2 材料与方法第133-135页
    7.2.1 样品制备及表征第133-134页
    7.2.2 亲和性分析第134页
    7.2.3 MSCs培养及检测第134-135页
    7.2.4 统计学分析第135页
  7.3 实验结果第135-147页
    7.3.1 样品表征第135-136页
    7.3.2 MSCs粘附与铺展第136-138页
    7.3.3 TGF-β1分泌及通路表达第138-139页
    7.3.4 MSCs增殖与分化第139-147页
  7.4 讨论第147-149页
  7.5 结论第149-151页
第8章 TGF-β1亲和肽-噬菌体膜对巨噬细胞功能的调控第151-179页
  8.1 引言第151页
  8.2 材料与方法第151-154页
    8.2.1 样品制备第151页
    8.2.2 蛋白吸附第151-152页
    8.2.3 巨噬细胞培养及检测第152页
    8.2.4 免疫荧光染色—NF-κBp第152页
    8.2.5 流式细胞仪分析—细胞凋亡第152-153页
    8.2.6 Westernblot分析第153页
    8.2.7 RT-PCR分析第153-154页
    8.2.8 统计学分析第154页
  8.3 实验结果第154-172页
    8.3.1 表面蛋白吸附第154-155页
    8.3.2 巨噬细胞增殖活性第155-156页
    8.3.3 巨噬细胞粘附与凋亡第156-159页
    8.3.4 巨噬细胞整合素表达第159-161页
    8.3.5 巨噬细胞极化表型第161-165页
    8.3.6 巨噬细胞NF-κB通路表达第165-167页
    8.3.7 巨噬细胞TGF-β1通路表达第167-169页
    8.3.8 组织愈合相关基因表达第169-172页
  8.4 讨论第172-177页
  8.5 结论第177-179页
第9章 钛表面不同噬菌体膜对体内骨整合的影响第179-193页
  9.1 引言第179页
  9.2 材料与方法第179-181页
    9.2.1 样品制备第179页
    9.2.2 手术过程第179-180页
    9.2.3 HE切片及染色第180页
    9.2.4 免疫组化染色第180-181页
    9.2.5 硬组织切片及染色第181页
    9.2.6 统计学分析第181页
  9.3 实验结果第181-190页
    9.3.1 噬菌体膜表征第181-182页
    9.3.2 HE染色表征第182-185页
    9.3.3 巨噬细胞表征第185-188页
    9.3.4 TGF-β1分泌表征第188-189页
    9.3.5 骨形成表征第189-190页
  9.4 讨论第190-192页
  9.5 结论第192-193页
结论与展望第193-195页
致谢第195-197页
参考文献第197-221页
攻读博士学位期间已发表及待发表的论文第221页

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