论文目录 | |
| 摘要 | 第11-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-38页 |
| 1.1 昆虫病毒的研究现状 | 第14-23页 |
| 1.1.1 昆虫病毒分类研究 | 第15-17页 |
| 1.1.2 昆虫核型多角体病毒的主要特征 | 第17-19页 |
| 1.1.3 柞蚕核型多角体病毒 | 第19-23页 |
| 1.2 昆虫抗病毒机制研究 | 第23-28页 |
| 1.2.1 昆虫抗NPV的免疫途径研究 | 第23-24页 |
| 1.2.2 昆虫免疫信号转导研究 | 第24页 |
| 1.2.3 昆虫免疫效应因子研究进展 | 第24-26页 |
| 1.2.4 其他途径和效应分子 | 第26-28页 |
| 1.3 柞蚕核型多角体病毒(ApNPV)的感染及危害 | 第28-29页 |
| 1.4 基因转录组学的研究进展 | 第29-33页 |
| 1.4.1 转录组研究技术 | 第29-30页 |
| 1.4.2 转录组测序技术的应用 | 第30-31页 |
| 1.4.3 转录组测序技术在鳞翅目昆虫上的应用 | 第31-33页 |
| 1.5 脂肪酶研究进展 | 第33-34页 |
| 1.6 小G蛋白家族的概述 | 第34-37页 |
| 1.6.1 小G蛋白的结构 | 第35页 |
| 1.6.2 小G蛋白的分类 | 第35-36页 |
| 1.6.3 小G蛋白的生物学功能 | 第36-37页 |
| 1.7 本项目的研究意义 | 第37-38页 |
| 第二章 柞蚕感染核型多角体病毒后转录组测序 | 第38-67页 |
| 2.1 材料与方法 | 第38-44页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第38页 |
| 2.1.2 试验方法 | 第38-44页 |
| 2.2 结果与分析 | 第44-62页 |
| 2.2.1 RNA-Seq数据整体质量评估 | 第44-48页 |
| 2.2.2 Unigene注释分析 | 第48-51页 |
| 2.2.3 CDS预测 | 第51-52页 |
| 2.2.4 微卫星标记(SSR)分析 | 第52-53页 |
| 2.2.5 基因表达水平分析 | 第53-55页 |
| 2.2.6 RNA-seq整体质量评估 | 第55-58页 |
| 2.2.7 差异表达分析 | 第58-62页 |
| 2.3 讨论 | 第62-67页 |
| 第三章 鸟苷三磷酸酶基因克隆及功能研究 | 第67-89页 |
| 3.1 材料 | 第67-69页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第67页 |
| 3.1.2 试验试剂 | 第67-68页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第68-69页 |
| 3.2 试验方法 | 第69-77页 |
| 3.2.1 柞蚕总RNA的提取及mRNA的纯化 | 第69-70页 |
| 3.2.2 柞蚕cDNA第一条链的合成 | 第70页 |
| 3.2.3 目的基因PCR扩增 | 第70-71页 |
| 3.2.4 PCR产物目的条带的回收与纯化 | 第71页 |
| 3.2.5 感受态细胞的制备 | 第71-72页 |
| 3.2.6 PCR产物的连接转化 | 第72页 |
| 3.2.7 序列分析 | 第72-73页 |
| 3.2.8 系统进化的分析 | 第73页 |
| 3.2.9 ApGTPase重组蛋白的表达 | 第73-75页 |
| 3.2.10 柞蚕不同发育时期和组织cDNA的制备 | 第75页 |
| 3.2.11 外源病原物对4龄柞蚕幼虫的诱导 | 第75-77页 |
| 3.3 结果与分析 | 第77-87页 |
| 3.3.1 柞蚕总RNA质量的电泳检测 | 第77-78页 |
| 3.3.2 目的基因的检测 | 第78页 |
| 3.3.3 柞蚕鸟苷三磷酸酶的序列分析 | 第78-80页 |
| 3.3.4 柞蚕ApGTPase基因同源比对及系统进化分析 | 第80-82页 |
| 3.3.5 ApGTPase基因原核表达及检测 | 第82-84页 |
| 3.3.6 柞蚕鸟苷三磷酸酶基因ApGTPase组织表达谱分析 | 第84-85页 |
| 3.3.7 Real-time PCR引物特异性分析 | 第85-86页 |
| 3.3.8 外源病原物诱导后柞蚕中肠鸟苷三磷酸酶基因的Real-time PCR检测 | 第86-87页 |
| 3.4 讨论 | 第87-89页 |
| 3.4.1 柞蚕鸟甘三磷酸酶基因的克隆及功能分析 | 第87-88页 |
| 3.4.2 柞蚕鸟苷三磷酸酶基因对外源病原物入侵响应 | 第88-89页 |
| 第四章 柞蚕脂肪酶基因受病原物侵染后表达谱分析 | 第89-106页 |
| 4.1 试验材料与试剂 | 第89页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第89页 |
| 4.1.2 试验试剂 | 第89页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第89页 |
| 4.2 试验方法 | 第89-94页 |
| 4.2.1 柞蚕脂肪酶基因的克隆 | 第89-90页 |
| 4.2.2 Aplipase基因的序列分析 | 第90页 |
| 4.2.3 柞蚕脂肪酶基因的原核表达 | 第90-92页 |
| 4.2.4 柞蚕4个发育阶段与5龄幼虫各组织Aplipase基因的半定量检测 | 第92-93页 |
| 4.2.5 外源病原物诱导后柞蚕中肠Aplipase基因的实时定量PCR检测分析 | 第93-94页 |
| 4.3 结果与分析 | 第94-104页 |
| 4.3.1 柞蚕脂肪酶基因克隆 | 第94页 |
| 4.3.2 Aplipase的序列分析 | 第94-97页 |
| 4.3.3 柞蚕脂肪酶基因的进化分析 | 第97-100页 |
| 4.3.4 脂肪酶基因的原核表达及检测 | 第100-102页 |
| 4.3.5 Aplipase基因的半定量检测 | 第102-103页 |
| 4.3.6 外源病原物诱导下Aplipase基因的实时定量PCR检测 | 第103-104页 |
| 4.4 讨论 | 第104-106页 |
| 第五章 结论 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-117页 |
| 致谢 | 第117-118页 |
| 攻读学位论文期间发表文章 | 第118页 |
