论文目录 | |
| 摘要 | 第11-15页 |
| Abstract | 第15-20页 |
| 第一章 柞蚕空胴病及柞蚕免疫的研究现状及进展 | 第20-35页 |
| 1.1 柞蚕空胴病的研究进展 | 第22-27页 |
| 1.1.1 病原物鉴定及重新分类 | 第23-24页 |
| 1.1.2 外部病症及组织病变 | 第24页 |
| 1.1.3 致病机理 | 第24页 |
| 1.1.4 传染规律 | 第24-25页 |
| 1.1.5 柞蚕空胴病防治研究 | 第25-26页 |
| 1.1.6 柞蚕空胴病病原菌的研究展望 | 第26-27页 |
| 1.2 昆虫先天免疫Toll通路研究现状及柞蚕免疫研究进展 | 第27-33页 |
| 1.2.1 昆虫先天免疫研究现状 | 第27-29页 |
| 1.2.2 昆虫先天免疫Toll通路研究进展 | 第29-31页 |
| 1.2.3 柞蚕免疫研究进展 | 第31-33页 |
| 1.3 本论文的目的及意义 | 第33-34页 |
| 1.4 本论文的技术路线 | 第34-35页 |
| 第二章 柞蚕空胴病病原菌基因组测序及分析 | 第35-64页 |
| 2.1 材料 | 第35-37页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第35-36页 |
| 2.1.2 主要试剂及药品 | 第36页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第36-37页 |
| 2.2 试验方法 | 第37-40页 |
| 2.2.1 柞蚕空胴病病原菌基因组DNA的提取及检测 | 第37页 |
| 2.2.2 柞蚕空胴病病原菌基因组测序 | 第37页 |
| 2.2.3 柞蚕空胴病病原菌基因组生物信息学分析 | 第37-40页 |
| 2.3 结果与分析 | 第40-61页 |
| 2.3.1 柞蚕空胴病病原菌基因组DNA的提取及检测 | 第40-41页 |
| 2.3.2 柞蚕空胴病病原菌基因组测序数据概况 | 第41-42页 |
| 2.3.3 柞蚕空胴病病原菌基因组大小估计 | 第42-43页 |
| 2.3.4 柞蚕空胴病病原菌基因组组装分析 | 第43-44页 |
| 2.3.5 柞蚕空胴病病原菌基因组组分分析 | 第44-49页 |
| 2.3.6 柞蚕空胴病病原菌基因组编码基因功能注释 | 第49-53页 |
| 2.3.7 柞蚕空胴病病原菌全基因组图谱 | 第53-54页 |
| 2.3.8 比较基因组学分析 | 第54-61页 |
| 2.4 讨论 | 第61-64页 |
| 第三章 柞蚕肠球菌侵染后柞蚕血淋巴蛋白质组学研究 | 第64-95页 |
| 3.1 材料 | 第65-66页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第65页 |
| 3.1.2 主要试剂及药品 | 第65页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第65-66页 |
| 3.2 试验方法 | 第66-68页 |
| 3.2.1 蛋白质提取 | 第66页 |
| 3.2.2 蛋白质定量 | 第66页 |
| 3.2.3 SDS-PAGE电泳检测 | 第66页 |
| 3.2.4 蛋白质酶解 | 第66页 |
| 3.2.5 iTRAQ标记 | 第66-67页 |
| 3.2.6 反相色谱法分离肽段 | 第67页 |
| 3.2.7 高效液相色谱-电喷雾串联质谱法 | 第67页 |
| 3.2.8 信息分析 | 第67-68页 |
| 3.3 结果与分析 | 第68-92页 |
| 3.3.1 柞蚕血淋巴蛋白质提取及质量检测 | 第68-70页 |
| 3.3.2 柞蚕血淋巴蛋白质鉴定 | 第70-72页 |
| 3.3.3 鉴定蛋白质的功能注释 | 第72-81页 |
| 3.3.4 柞蚕蛋白质定量分析 | 第81-82页 |
| 3.3.5 柞蚕差异蛋白质的GO富集分析 | 第82-88页 |
| 3.3.6 柞蚕差异蛋白质的Pathway富集分析 | 第88-92页 |
| 3.4 讨论 | 第92-95页 |
| 第四章 柞蚕Spatzle基因克隆、原核表达载体构建及其抗体制备 | 第95-114页 |
| 4.1 材料 | 第95-97页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第95页 |
| 4.1.2 主要试剂及药品 | 第95-96页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第96-97页 |
| 4.2 试验方法 | 第97-102页 |
| 4.2.1 柞蚕总RNA的提取 | 第97页 |
| 4.2.2 柞蚕cDNA第一条链的合成 | 第97页 |
| 4.2.3 柞蚕Spatzle基因PCR扩增 | 第97-98页 |
| 4.2.4 柞蚕Spatzle基因RACE | 第98-99页 |
| 4.2.5 柞蚕Spatzle基因的生物信息学分析 | 第99-100页 |
| 4.2.6 柞蚕Spatzle基因原核表达载体的构建 | 第100页 |
| 4.2.7 柞蚕Spatzle重组蛋白表达和纯化 | 第100-101页 |
| 4.2.8 柞蚕Spatzle重组蛋白抗体制备 | 第101-102页 |
| 4.2.9 Western blot检测 | 第102页 |
| 4.3 结果与分析 | 第102-111页 |
| 4.3.1 柞蚕总RNA的提取 | 第102-103页 |
| 4.3.2 柞蚕Spatzle基因的克隆及序列分析 | 第103-105页 |
| 4.3.3 柞蚕Spatzle蛋白与其他Spatzle蛋白序列比对分析 | 第105-106页 |
| 4.3.4 柞蚕Spatzle蛋白与其他Spatzle蛋白聚类分析 | 第106-108页 |
| 4.3.5 柞蚕Spatzle基因原核表达载体的构建 | 第108页 |
| 4.3.6 柞蚕Spatzle重组蛋白表达与纯化 | 第108-110页 |
| 4.3.7 抗血清制备及Western-blot检测 | 第110-111页 |
| 4.4 讨论 | 第111-114页 |
| 第五章 Toll通路在柞蚕免疫不同外源微生物过程中的作用 | 第114-128页 |
| 5.1 材料 | 第114-115页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第114-115页 |
| 5.1.2 主要试剂及药品 | 第115页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第115页 |
| 5.2 试验方法 | 第115-117页 |
| 5.2.1 材料准备 | 第115-116页 |
| 5.2.2 柞蚕总RNA的提取及定量 | 第116页 |
| 5.2.3 cDNA第一条链的合成 | 第116页 |
| 5.2.4 RT-PCR | 第116-117页 |
| 5.2.5 qRT-PCR | 第117页 |
| 5.3 结果与分析 | 第117-125页 |
| 5.3.1 Toll通路基因时空表达谱 | 第117-121页 |
| 5.3.2 Toll通路基因对外源微生物诱导的响应 | 第121-125页 |
| 5.4 讨论 | 第125-128页 |
| 第六章 结论 | 第128-132页 |
| 参考文献 | 第132-144页 |
| 附录 | 第144-152页 |
| 致谢 | 第152-153页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第153页 |
