论文目录 | |
摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-16页 |
第一章 绪论 | 第16-31页 |
· 乳腺癌 | 第16-17页 |
· 癌症转移 | 第17-18页 |
· 天然植物提取物治疗乳腺癌的研究进展 | 第18-24页 |
· 干预乳腺癌细胞增殖 | 第19-20页 |
· 促进乳腺癌细胞的凋亡 | 第20-21页 |
· 改善乳腺癌细胞的多药耐药性 | 第21页 |
· 对乳腺癌细胞抑癌相关基因的去甲基化作用 | 第21-22页 |
· 对乳腺癌细胞侵袭、转移的影响 | 第22-23页 |
· 对乳腺癌细胞端粒酶活性的影响 | 第23页 |
· 抑制雌激素合成相关酶的活性 | 第23-24页 |
· 调节细胞信号传导通路 | 第24页 |
· DMY 的研究进展 | 第24-28页 |
· DMY 的简介 | 第24-25页 |
· DMY 的生理活性研究 | 第25-26页 |
· DMY 的抗肿瘤作用 | 第26-27页 |
· DMY 的抗肿瘤作用机理 | 第27-28页 |
· 本课题的研究目的、意义及主要内容 | 第28-31页 |
· 本课题的研究目的和意义 | 第28-29页 |
· 本课题的主要研究内容 | 第29-31页 |
第二章 DMY 对人乳腺癌细胞体外抗增殖作用评价及其机制探讨 | 第31-49页 |
· 材料 | 第31-35页 |
· 细胞株 | 第31页 |
· 主要试剂、试剂盒及耗材 | 第31-33页 |
· 主要试剂的配制 | 第33-34页 |
· 主要实验仪器 | 第34-35页 |
· 方法 | 第35-38页 |
· 细胞培养 | 第35-36页 |
· DMY 纯度检测 | 第36页 |
· DMY 对乳腺癌细胞的抗增殖作用 | 第36页 |
· DMY 对人正常细胞增殖的作用 | 第36页 |
· 细胞周期分析 | 第36-37页 |
· DNA ladder 分析 | 第37-38页 |
· 明胶酶谱分析 | 第38页 |
· 结果与讨论 | 第38-48页 |
· DMY 的纯度检测 | 第38-39页 |
· 不同乳腺癌细胞对 DMY 敏感性比较 | 第39-40页 |
· DMY 对 MDA-MB-231 细胞形态的影响 | 第40-41页 |
· DMY 对 MDA-MB-231 细胞增殖的时间-剂量关系 | 第41页 |
· DMY 处理 MDA-MB-231 细胞 1 h 后对细胞增殖的影响 | 第41-42页 |
· DMSO 对 MDA-MB-231 细胞增殖的影响 | 第42页 |
· DMY 对人胚肾细胞 HEK-293 和人肝细胞 L-02 增殖的影响 | 第42-45页 |
· DMY 对 MDA-MB-231 细胞周期和细胞凋亡的影响 | 第45-47页 |
· DMY 对 MDA-MB-231 细胞明胶酶谱的影响 | 第47-48页 |
· 本章小结 | 第48-49页 |
第三章 DMY 诱导人乳腺癌 MDA-MB-231 细胞凋亡的机制研究 | 第49-62页 |
· 材料 | 第50-51页 |
· 细胞株 | 第50页 |
· 主要试剂、试剂盒及耗材 | 第50-51页 |
· 主要试剂的配制 | 第51页 |
· 仪器设备 | 第51页 |
· 方法 | 第51-54页 |
· DAPI 染色观察细胞凋亡 | 第51-52页 |
· Annexin V-FITC/PI 双标记法检测细胞凋亡 | 第52页 |
· 流式细胞术检测细胞内钙离子浓度 | 第52-53页 |
· 流式细胞术检测线粒体跨膜电位(ΔΨm) | 第53页 |
· Western 印迹检测 Caspase-3 和 Caspase-9 蛋白表达 | 第53-54页 |
· 结果与讨论 | 第54-61页 |
· DAPI 染色观察细胞凋亡 | 第54-55页 |
· Annexin V-FITC/PI 双标记法检测 MDA-MB-231 细胞凋亡 | 第55-57页 |
· DMY 对 MDA-MB-231 细胞内钙离子浓度的影响 | 第57-58页 |
· DMY 对 MDA-MB-231 细胞线粒体跨膜电位(ΔΨm)的影响 | 第58-59页 |
· Western 印迹检测 Caspase-3 和 Caspase-9 蛋白表达 | 第59-61页 |
· 本章小结 | 第61-62页 |
第四章 DMY 对人乳腺癌 MDA-MB-231 细胞侵袭转移的抑制效应和分子机制 | 第62-85页 |
· 材料 | 第62-63页 |
· 细胞株 | 第62页 |
· 主要试剂、试剂盒和耗材 | 第62-63页 |
· 主要仪器设备 | 第63页 |
· 方法 | 第63-69页 |
· 原子力显微镜扫描细胞表面结构 | 第63-64页 |
· 细胞划痕实验 | 第64页 |
· 细胞体外侵袭实验 | 第64-65页 |
· Real-time PCR 分析 | 第65-68页 |
· Western 印迹分析检测 MMP-9 和 MM-2 蛋白表达 | 第68-69页 |
· 结果与讨论 | 第69-84页 |
· 原子力显微镜扫描细胞表面结构 | 第69-70页 |
· DMY 抑制 MDA-MB-231 细胞迁移和侵袭 | 第70-72页 |
· MDA-MB-231 细胞总 RNA 提取 | 第72-73页 |
· DMY 对 MDA-MB-231 细胞 MMP-9 和 MMP-2 基因表达的影响 | 第73-75页 |
· Western blot 分析 MMP-9 和 MMP-2 蛋白的表达 | 第75-76页 |
· DMY 对 MDA-MB-231 细胞其他转移相关基因表达的影响 | 第76-83页 |
· DMY 对 MDA-MB-231 细胞其他基因表达的影响 | 第83-84页 |
· 本章小结 | 第84-85页 |
第五章 DMY 对小鼠乳腺癌 4T1 细胞的增殖、凋亡和侵袭转移的影响 | 第85-97页 |
· 材料 | 第85-86页 |
· 细胞株和动物 | 第85页 |
· 主要试剂、耗材和试剂盒 | 第85页 |
· 主要仪器设备 | 第85-86页 |
· 方法 | 第86-90页 |
· MTT 法测定 DMY 对 4T1 细胞的体外抗增殖作用 | 第86页 |
· DAPI 染色观察细胞凋亡 | 第86页 |
· 流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡 | 第86页 |
· 明胶酶谱实验 | 第86-87页 |
· 细胞划痕实验 | 第87页 |
· 细胞侵袭实验 | 第87-88页 |
· Real-time PCR 检测 MMP-9 和 MMP-2 的表达 | 第88页 |
· ELISA 检测 MMP-9 和 MMP-2 蛋白的表达 | 第88-90页 |
· 结果与讨论 | 第90-96页 |
· DMY 对 4T1 细胞增殖的时间剂量关系 | 第90-91页 |
· DMY 对 4T1 细胞形态的影响 | 第91页 |
· DAPI 染色观察 DMY 诱导 4T1 细胞凋亡 | 第91-92页 |
· 流式细胞术检测 DMY 对 4T1 细胞细胞周期和晚期凋亡的影响 | 第92-93页 |
· DMY 对 4T1 细胞明胶酶谱的影响 | 第93页 |
· DMY 抑制 4T1 细胞迁移和侵袭 | 第93-95页 |
· DMY 对 4T1 细胞 MMP-9 和 MMP-2 mRNA 表达的影响 | 第95-96页 |
· DMY 对 4T1 细胞 MMP-9 和 MMP-2 蛋白表达的影响 | 第96页 |
· 本章小结 | 第96-97页 |
第六章 DMY 联合阿霉素抗乳腺癌的体外研究 | 第97-107页 |
· 材料 | 第98-99页 |
· 细胞株 | 第98页 |
· 主要试剂、试剂盒和耗材 | 第98页 |
· 主要仪器设备 | 第98-99页 |
· 方法 | 第99-100页 |
· 细胞培养 | 第99页 |
· 肿瘤细胞体外增殖抑制实验 | 第99页 |
· 药物联合作用评价 | 第99-100页 |
· 结果与讨论 | 第100-106页 |
· DMY 和阿霉素单独或联用对 MDA-MB-231 细胞的抗增殖作用 | 第100-101页 |
· DMY 和阿霉素单独或联用对 4T1 细胞的抗增殖作用 | 第101-103页 |
· DMY 与阿霉素作用于 MDA-MB-231 细胞的合用指数 | 第103-104页 |
· DMY 与阿霉素作用于 4T1 细胞的合用指数 | 第104-106页 |
· 本章小结 | 第106-107页 |
第七章 DMY 对乳腺癌 4T1 细胞荷瘤小鼠的抗肿瘤作用 | 第107-123页 |
· 材料 | 第108-109页 |
· 细胞株和动物 | 第108页 |
· 主要试剂、耗材和试剂盒 | 第108页 |
· 主要仪器设备 | 第108页 |
· 主要试剂的配制 | 第108-109页 |
· 方法 | 第109-111页 |
· 肿瘤模型建立 | 第109页 |
· 动物分组 | 第109页 |
· 计算抑瘤率、脾脏指数和肺转移灶 | 第109页 |
· 荷瘤小鼠血清微转移的检测 | 第109页 |
· 血清生化检测 | 第109页 |
· 血清 MMP-9 和 MMP-2 的 ELISA 检测 | 第109-110页 |
· HE 染色观察肿瘤组织形态学 | 第110-111页 |
· 结果与讨论 | 第111-122页 |
· DMY 对小鼠体重及取食的影响 | 第111-112页 |
· DMY 对小鼠瘤重及抑瘤率的影响 | 第112-113页 |
· DMY 对小鼠乳腺癌肺转移的影响 | 第113-114页 |
· DMY 对荷瘤小鼠血浆微转移的影响 | 第114-115页 |
· DMY 对荷瘤小鼠脾脏指数的影响 | 第115页 |
· DMY 对阿霉素心脏毒性的影响 | 第115-117页 |
· DMY 对阿霉素肝毒性的影响 | 第117-118页 |
· DMY 对荷瘤小鼠血清 MMP-9 和 MMP-2 水平的影响 | 第118-119页 |
· HE 染色观察瘤块组织形态 | 第119-122页 |
· 本章小结 | 第122-123页 |
结论与展望 | 第123-125页 |
参考文献 | 第125-141页 |
攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第141-142页 |
致谢 | 第142-143页 |
附录 | 第143页 |