论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略词表 | 第7-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-15页 |
| 第二章 文献综述 | 第15-26页 |
| 2.1 百脉根分子生物学研究进展 | 第15-18页 |
| 2.1.1 百脉根的应用领域 | 第15页 |
| 2.1.2 百脉根资源评价 | 第15-16页 |
| 2.1.3 百脉根分子生物学研究进展 | 第16-18页 |
| 2.2 AP2/ERF类转录因子分子调控机理 | 第18-24页 |
| 2.2.1 AP2/ERF类转录因子概述 | 第18-19页 |
| 2.2.2 AP2/ERF应用于基因工程育种 | 第19-20页 |
| 2.2.3 AP2/ERF类转录因子代谢机理 | 第20-24页 |
| 2.3 本研究主要内容和技术路线 | 第24-26页 |
| 2.3.1 研究的主要内容 | 第24-25页 |
| 2.3.2 研究的技术路线 | 第25-26页 |
| 第三章 百脉根种质资源评价 | 第26-34页 |
| 3.1 实验材料 | 第26页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 3.2 实验方法 | 第26-27页 |
| 3.2.1 材料种植 | 第26页 |
| 3.2.2 形态特征和农艺性状 | 第26-27页 |
| 3.2.3 基因组DNA的提取 | 第27页 |
| 3.2.4 ITS反应体系 | 第27页 |
| 3.2.5 系统发育分析 | 第27页 |
| 3.3 结果与分析 | 第27-31页 |
| 3.3.1 百脉根形态的多样性 | 第27-29页 |
| 3.3.2 农艺性状多样性 | 第29-30页 |
| 3.3.3 基于ITS序列的系统发育 | 第30-31页 |
| 3.4 讨论 | 第31-34页 |
| 第四章 百脉根新种质创制 | 第34-49页 |
| 4.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第34页 |
| 4.1.2 菌株与质粒 | 第34页 |
| 4.1.3 药品和试剂 | 第34-35页 |
| 4.2 实验方法 | 第35-38页 |
| 4.2.1 百脉根遗传转化 | 第35页 |
| 4.2.2 遗传转化植株的培养 | 第35页 |
| 4.2.3 PCR检测 | 第35页 |
| 4.2.4 RNA提取及cDNA合成方法 | 第35-36页 |
| 4.2.5 半定量PCR | 第36页 |
| 4.2.6 盐及干旱胁迫处理 | 第36页 |
| 4.2.7 生理生化指标的测定方法 | 第36-37页 |
| 4.2.8 荧光定量PCR检测 | 第37-38页 |
| 4.2.9 分析软件及数据库查询 | 第38页 |
| 4.3 结果与分析 | 第38-47页 |
| 4.3.1 共表达PeDREB2a和KcERF百脉根株系的获得 | 第38-39页 |
| 4.3.2 共表达PeDREB2a和KcERF百脉根株系中目的基因表达量分析 | 第39-40页 |
| 4.3.3 共表达PeDREB2a和KcERF百脉根无性繁殖苗的获得 | 第40-41页 |
| 4.3.4 盐胁迫和干旱对共表达PeDREB2a和KcERF百脉根株系表型的影响 | 第41-42页 |
| 4.3.5 干旱胁迫下共表达PeDREB2a和KcERF百脉根株系组织染色分析 | 第42-43页 |
| 4.3.6 盐胁迫和干旱对百脉根转化株系相对含水量和膜透性的影响 | 第43-44页 |
| 4.3.7 干旱胁迫对百脉根转化株系丙二醛和脯氨酸含量的影响 | 第44-45页 |
| 4.3.8 盐胁迫和干旱对百脉根转化株系逆境相关基因表达的影响 | 第45-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-49页 |
| 第五章 百脉根LcSRA13对植株表型和耐盐性的影响 | 第49-65页 |
| 5.1 实验材料 | 第49-50页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第49页 |
| 5.1.2 菌株和载体 | 第49-50页 |
| 5.1.3 药品和试剂 | 第50页 |
| 5.2 实验方法 | 第50-53页 |
| 5.2.1 LcSRA13基因生物信息学分析 | 第50页 |
| 5.2.2 PCR产物的回收与纯化 | 第50页 |
| 5.2.3 酶切反应 | 第50-51页 |
| 5.2.4 连接反应 | 第51页 |
| 5.2.5 大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第51-52页 |
| 5.2.6 农杆菌感受态的制备及转化 | 第52页 |
| 5.2.7 百脉根遗传转化 | 第52页 |
| 5.2.8 RNA提取及cDNA的合成 | 第52页 |
| 5.2.9 半定量PCR | 第52页 |
| 5.2.10 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第52页 |
| 5.2.11 分析软件及数据库查询 | 第52页 |
| 5.2.12 盐胁迫处理方法 | 第52-53页 |
| 5.2.13 生理生化指标测定 | 第53页 |
| 5.3 结果与分析 | 第53-62页 |
| 5.3.1 LcSRA13基因序列分析 | 第53-55页 |
| 5.3.2 LcSRA13过表达及干扰表达百脉根株系的获得 | 第55-56页 |
| 5.3.3 LcSRA13过表达及干扰表达百脉根株系LcSRA13基因表达分析 | 第56-58页 |
| 5.3.4 LcSRA13过表达及干扰表达对百脉根植株表型的影响 | 第58-59页 |
| 5.3.5 LcSRA13过表达及干扰表达对百脉根耐盐表型的影响 | 第59页 |
| 5.3.6 LcSRA13过表达及干扰表达百脉根耐盐组织化学染色分析 | 第59-61页 |
| 5.3.7 LcSRA13过表达及干扰表达对百脉根耐盐生理生化指标的影响 | 第61-62页 |
| 5.4 讨论 | 第62-65页 |
| 第六章 转录组分析LcSRA13参与的调控网络 | 第65-89页 |
| 6.1 实验材料 | 第65-66页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第65-66页 |
| 6.1.2 药品和试剂 | 第66页 |
| 6.2 实验方法 | 第66-69页 |
| 6.2.1 转录组测序 | 第66-67页 |
| 6.2.2 差异基因分析(NOISeq方法) | 第67页 |
| 6.2.3 基因功能和富集分析 | 第67页 |
| 6.2.4 差异基因启动子分析 | 第67页 |
| 6.2.5 荧光定量PCR分析 | 第67页 |
| 6.2.6 酵母单杂交实验 | 第67页 |
| 6.2.7 凝胶阻滞实验 | 第67-68页 |
| 6.2.8 酵母双杂交试验 | 第68页 |
| 6.2.9 双分子荧互补试验 | 第68-69页 |
| 6.3 结果与分析 | 第69-86页 |
| 6.3.1 差异表达基因 | 第69-70页 |
| 6.3.2 差异表达基因聚类分析 | 第70-71页 |
| 6.3.3 差异基因的GO(Gene Ontology)分析 | 第71-73页 |
| 6.3.4 差异基因的Pathway显著性富集分析 | 第73-75页 |
| 6.3.5 差异基因KEGG富集分析 | 第75-77页 |
| 6.3.6 LcSRA13调控与生长及逆境胁迫相关基因 | 第77-78页 |
| 6.3.7 LcSRA13基因直接调控的靶基因分析 | 第78-80页 |
| 6.3.8 差异基因的荧光定量PCR验证 | 第80-81页 |
| 6.3.9 LcSRA13结合Lj0g3v0242029启动子中的GCC-box | 第81-83页 |
| 6.3.10 Lj0g3v0242029编码的蛋白功能预测 | 第83-84页 |
| 6.3.11 酵母双杂交验证百脉根LcSRA13和LcMED25蛋白互作 | 第84-85页 |
| 6.3.12 BiFC验证百脉根LcSRA13和LcMED25互作 | 第85-86页 |
| 6.4 讨论 | 第86-89页 |
| 第七章 全文结论与展望 | 第89-91页 |
| 7.1 结论 | 第89-90页 |
| 7.2 展望 | 第90页 |
| 7.3 创新点 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-103页 |
| 附录 | 第103-107页 |
| 在学期间的研究成果 | 第107-108页 |
| 致谢 | 第108页 |
